本文選題：中耳膽脂瘤　切入點(diǎn)：TLR4　出處：《山西醫(yī)科大學(xué)》2012年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：研究背景 中耳膽脂瘤是一種位于中耳內(nèi)的囊性結(jié)構(gòu)，而非真性腫瘤，但它具有類似腫瘤的持續(xù)生長及破壞能力，常引起一系列嚴(yán)重的顱內(nèi)外并發(fā)癥，危及生命，因此一直受到國內(nèi)外專家的廣泛關(guān)注。后天性膽脂瘤發(fā)病機(jī)理存在爭議已有一個(gè)世紀(jì)，至少已證實(shí)存在有四個(gè)方面證據(jù),但現(xiàn)在唯一達(dá)成共識(shí)的是機(jī)體為防御慢性炎癥而產(chǎn)生的一系列異常免疫應(yīng)答，造成膽脂瘤持續(xù)發(fā)展及骨質(zhì)破壞。Toll樣受體(toll-like receptors，TLRs)是先天性免疫模式識(shí)別受體(pattern recognition receptor，PRR)之一，通過識(shí)別病原微生物及其病原相關(guān)分子模式(pathogen associated molecularpatterns，PAMPs)快速激活天然免疫系統(tǒng)。現(xiàn)M Szczepanski，WSzyfter等研究發(fā)現(xiàn)TLR（TLR-2，TLR-3，TLR-4）在膽脂瘤微環(huán)境中表達(dá)豐富，提示Toll樣受體4有可能參與了中耳膽脂瘤的發(fā)生發(fā)展過程。本實(shí)驗(yàn)擬采用SYBR Green實(shí)時(shí)定量反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(SYBR RT-PCR)方法,觀察炎癥反應(yīng)程度不同的中耳膽脂瘤組織中TLR4的表達(dá)及其下游傳導(dǎo)分子MyD88的表達(dá)，進(jìn)一步探討TLR4信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑在中耳膽脂瘤發(fā)生發(fā)展過程中的作用，深入了解中耳膽脂瘤發(fā)病機(jī)制，并為找尋中耳膽脂瘤有效的保守治療方法提供新的途徑。 方法 選擇中耳膽脂瘤組織標(biāo)本35例，均來自山西醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院耳鼻咽喉-頭頸外科住院患者35例（男13例，女22例，年齡16—62歲)平均37.12歲，耳流膿史1個(gè)月～30年，平均5.14年；其中聽骨無破壞者8例，破壞一個(gè)聽骨者8例，破壞兩個(gè)聽骨者13例，破壞三個(gè)聽骨者6例。然后我們根據(jù)顯微鏡下所見上皮下基質(zhì)炎癥反應(yīng)的程度，在手術(shù)中取標(biāo)本時(shí)即分為炎癥組與非炎癥組，其中炎癥組占13份，非炎癥組占12份。對照組標(biāo)本取自中耳乳突根治術(shù)中正常外耳道皮膚組織10例。上述所有標(biāo)本在收集后立即在顯微鏡下仔細(xì)剔除中耳膽脂瘤鱗屑及其他壞死組織，置于-80℃冰箱保存，以備用作RT-PCR檢測。所有選取患者術(shù)前均行顳骨高分辨CT檢查，術(shù)后病理活檢均證實(shí)為后天繼發(fā)性膽脂瘤。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR（Real-time PCR）直接檢測炎癥組、非炎癥組、正常對照組TLR4、MyD88 mRNA的表達(dá)。 結(jié)果 1、Real time -PCR方法直接檢測三組實(shí)驗(yàn)樣本TLR4mRNA，炎癥組TLR4平均2-~(ΔΔCT)值為0.689（0.200,2.050），非炎癥組TLR4平均2-~(ΔΔCT)值為0.291（0.020,0.990），正常對照組TLR4、平均2-~(ΔΔCT)值為0.163（0.001,0.990）。 2、Real time -PCR方法直接檢測三組實(shí)驗(yàn)樣本MyD88mRNA的表達(dá)顯示：炎癥組為MyD88平均2-~(ΔΔCT)值0.777（0.320，1.84）；非炎癥組MyD88平均2-~(ΔΔCT)值為0.320（0.01,0.990），正常對照組MyD88平均2-~(ΔΔCT)值為0.224（0.002,0.990）。 3、炎癥組TLR4、MyD88mRNA表達(dá)水平較正常外耳道組分別上升了4倍和3倍，，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p值均0.05）;炎癥組TLR4、MyD88mRNA表達(dá)水平較非炎癥組分別上升了2倍和1倍，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p值均0.05)。 4.我們將TLR4與MyD88做spearman秩相關(guān)性分析，相關(guān)系數(shù)為r=0.955，P值0.05。表明在膽脂瘤型中耳炎發(fā)病過程中，在基因水平，TLR4與MyD88是呈正相關(guān)的。 結(jié)論 1、中耳膽脂瘤組織中有TLR4mRNA、MyD88mRNA的表達(dá)。 2、中耳膽脂瘤組織中，尤其是炎癥反應(yīng)明顯的膽脂瘤組織，TLR4及其下游信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子的表達(dá)量發(fā)生改變，提示膽脂瘤型中耳炎的發(fā)病確實(shí)與炎癥程度密切相關(guān)。 3、炎癥反應(yīng)明顯的膽脂瘤上皮組織中TLR4表達(dá)上調(diào)，同時(shí)它的下游傳導(dǎo)分子MyD88表達(dá)增強(qiáng)，兩者呈正相關(guān)。因此我們推論TLR4-MyD88信號(hào)傳導(dǎo)途徑可能是膽脂瘤發(fā)病的一個(gè)重要機(jī)制。
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【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：R764

【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 任艷杰;高糖環(huán)境下脂聯(lián)素對人腎小管上皮細(xì)胞凋亡率及Bax、Bcl-2表達(dá)的影響[D];山西醫(yī)科大學(xué);2013年

本文編號(hào)：1620615