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miR-106b對(duì)鼻咽癌細(xì)胞凋亡的促進(jìn)和對(duì)增殖的抑制作用

發(fā)布時(shí)間:2018-03-07 14:28

  本文選題:miR-b 切入點(diǎn):鼻咽癌 出處:《西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)》2017年06期  論文類型:期刊論文


【摘要】:目的探討miR-106b對(duì)鼻咽癌細(xì)胞凋亡和增殖的影響。方法應(yīng)用miRNA芯片分析獲得鼻咽癌組織和癌旁正常組織表達(dá)差異的miRNA,TaqMan miRNA檢測(cè)試劑盒和實(shí)時(shí)熒光定量PCR分別檢測(cè)miR-106和RhoC mRNA在鼻咽癌和癌旁組織中的表達(dá),用miRnada預(yù)測(cè)miR-106b和靶基因的結(jié)合位點(diǎn),采用雙熒光素酶驗(yàn)證靶基因,Western blot檢測(cè)miR-106b調(diào)控靶基因RhoC的表達(dá)水平。用Annexin V-PI和TUNEL檢測(cè)miR-106b對(duì)鼻咽癌細(xì)胞凋亡的影響,用MTT檢測(cè)miR-106b對(duì)鼻咽癌細(xì)胞增殖的影響。結(jié)果 miRNA芯片分析發(fā)現(xiàn)鼻咽癌組織中miR-106b的表達(dá)較癌旁正常組織低。RT-PCR結(jié)果顯示miR-106b在鼻咽癌組織中表達(dá)減少(P0.05),RhoC在鼻咽癌組織中表達(dá)增加(P0.05),miR-106b和RhoC在鼻咽癌組織中表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r= 0.586 6,P0.001)。熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)結(jié)果顯示miR-106b組熒光素酶活性低于空質(zhì)粒組(P0.05),Western blot結(jié)果顯示miR-106b組鼻咽癌細(xì)胞中RhoC的表達(dá)較空質(zhì)粒組降低(P0.05)。Annexin V-PI和TUNEL結(jié)果顯示,miR-106b組鼻咽癌細(xì)胞凋亡較空質(zhì)粒組增加(P0.05);MTT結(jié)果顯示miR-106b組鼻咽癌細(xì)胞增殖能力較空質(zhì)粒組降低(P0.05)。結(jié)論 miR-106b可能通過下調(diào)RhoC的表達(dá)誘導(dǎo)鼻咽癌細(xì)胞凋亡并抑制鼻咽癌細(xì)胞增殖。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of miR-106b on apoptosis and proliferation of nasopharyngeal carcinoma cells. Methods the differential expression of miRNA-TaqMan miRNA assay kit and real-time fluorescent quantitative PCR were obtained by miRNA microarray analysis for miR-106 and RhoC in nasopharyngeal carcinoma tissues and adjacent normal tissues, respectively. Expression of mRNA in nasopharyngeal carcinoma and adjacent tissues. The binding sites of miR-106b and target gene were predicted by miRnada, the expression level of miR-106b regulated target gene RhoC was detected by double luciferase Western blot, and the effect of miR-106b on apoptosis of nasopharyngeal carcinoma cells was detected by Annexin V-PI and TUNEL. Results miRNA microarray analysis showed that the expression of miR-106b in nasopharyngeal carcinoma tissues was lower than that in adjacent normal tissues. RT-PCR results showed that the expression of miR-106b in nasopharyngeal carcinoma tissues was lower than that in nasopharyngeal carcinoma tissues. The results of luciferase reporter gene experiment showed that luciferase activity in miR-106b group was lower than that in empty plasmid group. Western blot showed that RhoC expression in nasopharyngeal carcinoma cells in miR-106b group was higher than that in miR-106b group. The results showed that the apoptosis of nasopharyngeal carcinoma cells in the empty plasmid group was higher than that in the empty plasmid group. The results showed that the proliferation ability of nasopharyngeal carcinoma cells in the miR-106b group was lower than that in the empty plasmid group. Conclusion miR-106b may induce the apoptosis of nasopharyngeal carcinoma cells by down-regulating the expression of RhoC. Apoptosis of nasopharyngeal carcinoma cells and inhibition of proliferation of nasopharyngeal carcinoma cells.
【作者單位】: 川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科;川北醫(yī)學(xué)院人體解剖教研室;大連醫(yī)科大學(xué)第一臨床學(xué)院;
【基金】:四川省科技廳重點(diǎn)項(xiàng)目資助(No.14ZA0198)~~
【分類號(hào)】:R739.63

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本文編號(hào):1579680

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