發(fā)布時(shí)間：2018-01-25 12:42

  本文關(guān)鍵詞： 鼻咽腫瘤 放射療法 微小RNA- 糖原合成酶激酶類　出處：《中國(guó)全科醫(yī)學(xué)》2016年12期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的探討微小RNA(miR)-150對(duì)于鼻咽癌細(xì)胞放療抵抗的影響,并分析其機(jī)制。方法 2014年1月—2015年6月,建立放療抵抗的鼻咽癌細(xì)胞株CNE-2R。取CNE-2和CNE-2R,通過克隆形成實(shí)驗(yàn)計(jì)算不同放療劑量下(0、3、6 Gy)的克隆形成率(PE)、細(xì)胞存活率,采用MTS法檢測(cè)照射1、2、3、4、5 d時(shí)的細(xì)胞增殖活性,實(shí)時(shí)定量熒光聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Real-time PCR)法檢測(cè)miR-150、糖原合成酶激酶3β(GSK3β)mRNA水平,Western blotting法檢測(cè)GSK3β水平。將CNE-2隨機(jī)分為miR-150模擬物組(轉(zhuǎn)染miR-150模擬物)、微小RNAs(miRs)無關(guān)序列組(轉(zhuǎn)染miRs無關(guān)序列),通過熒光素酶報(bào)告載體實(shí)驗(yàn)檢測(cè)熒光素酶活性。結(jié)果 0 Gy放療劑量時(shí),CNE-2與CNE-2R的PE、細(xì)胞存活率比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);3 Gy、6 Gy放療劑量時(shí),CNE-2R的PE、細(xì)胞存活率高于CNE-2(P0.05)。照射1~5 d時(shí),CNE-2R的細(xì)胞增殖活性高于CNE-2(P0.05)。CNE-2R中miR-150水平高于CNE-2,GSK3βmRNA水平低于CNE-2(P0.05)。CNE-2R中GSK3β水平低于CNE-2(P0.05)。轉(zhuǎn)染GSK3β野生型質(zhì)粒后,miR-150模擬物組熒光素酶活性低于miRs無關(guān)序列組(P0.05);轉(zhuǎn)染GSK3β突變型質(zhì)粒后,miRs無關(guān)序列組與miR-150模擬物組熒光素酶活性比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論miR-150參與了鼻咽癌細(xì)胞的放療抵抗,GSK3β是miR-150的直接靶基因,miR-150-GSK3β軸可能成為一種新的用于合理治療鼻咽癌的策略。
[Abstract]:Objective to study the effect of RNA (miR) -150 for radiotherapy of nasopharyngeal carcinoma cells resistance, and analyze its mechanism. Methods from January 2014 to June 2015, the establishment of radioresistance of nasopharyngeal carcinoma cell line CNE-2R. CNE-2 and CNE-2R, through cloning experiment calculation different radiotherapy dose (0,3,6 Gy) the clone formation rate (PE), the cell survival rate. MTS method was used to detect 1,2,3,4,5 irradiation when D cell proliferation, real-time quantitative polymerase chain reaction (Real-time PCR) method to detect miR-150, glycogen synthase kinase 3 beta (GSK3 beta) mRNA level detection of GSK3 beta Western level blotting method. The CNE-2 were randomly divided into miR-150 group (transfected with miR-150 mimic analogue), tiny RNAs (miRs) group (transfected with miRs sequence independent, unrelated sequence) by luciferase reporter vector assay of luciferase activity. Results of the 0 Gy radiation dose, CNE-2 and CNE-2R PE, the cell survival rate than Relatively, the difference was not statistically significant (P0.05); 3 Gy, 6 Gy dose, CNE-2R PE, the cell survival rate was higher than that of CNE-2 (P0.05). 1~5 D irradiation, cell proliferation activity of CNE-2R was higher than that of CNE-2 (P0.05) miR-150 level in.CNE-2R is higher than CNE-2, GSK3 beta mRNA level was lower than that of CNE-2 (P0.05) GSK3.CNE-2R beta level is lower than CNE-2 (P0.05). The wild type plasmid after transfection of GSK3 beta, miR-150 analogue group luciferase activity was lower than that of miRs group (P0.05); sequence independent transfection of GSK3 beta mutant plasmid, miRs group and unrelated sequence analogue of miR-150 luciferase activity were compared, the difference was not statistically significant (P0.05) conclusion. MiR-150 is involved in the radiotherapy of nasopharyngeal carcinoma cells are resistant to GSK3 beta is a direct target gene of miR-150, miR-150-GSK3 beta axis may become a new strategy for rational treatment of nasopharyngeal carcinoma.

【作者單位】： 南華大學(xué)附屬第二醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科;南華大學(xué)腫瘤研究所;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81172210) 湖南省省級(jí)科技計(jì)劃項(xiàng)目(2014SK3081)
【分類號(hào)】：R739.63
【正文快照】： Influence of miR-150 on the Radioresistance of Nasopharyngeal Carcinoma Cells ZHANG Xian-feng,HUANG Yuan-jian,XIAO Juan,et al.Department of Otorhinolaryngology,the Second Hospital,University of South China,Hengyang421001,China鼻咽癌是一種具有較強(qiáng)局部侵襲

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本文編號(hào)：1462868