背景 骨肉瘤起源于間葉組織,是骨關(guān)節(jié)系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤,其治愈率較低,對(duì)青少年健康的危害較高,在早期易發(fā)生肺部轉(zhuǎn)移,死亡率較高。近年來,隨著外科手術(shù)的發(fā)展和新輔助聯(lián)合化療的廣泛應(yīng)用,患者5年生存率得到顯著提高,但發(fā)生轉(zhuǎn)移的患者5年生存率仍較低。因此,深入探討骨肉瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移機(jī)制,尋找新的治療靶點(diǎn)進(jìn)而延長已發(fā)生轉(zhuǎn)移者的生存期是目前亟需解決的問題。Ski基因在不同物種中廣泛參與并調(diào)節(jié)多種細(xì)胞的增殖及分化等過程,在生物進(jìn)化過程中高度保守,參與多種信號(hào)通路,且與腫瘤的發(fā)生發(fā)展、增殖、分化等密切相關(guān)。已有研究表明,Ski基因在多種腫瘤組織中呈高表達(dá)狀態(tài),Ski基因的激活或異常表達(dá)與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。而有關(guān)Ski對(duì)骨肉瘤細(xì)胞增殖和遷移影響的研究在國內(nèi)外尚無相關(guān)報(bào)道。目的 探討沉默Ski基因骨肉瘤U-2OS細(xì)胞是否會(huì)出現(xiàn)生物學(xué)活性的改變。繼而研究骨肉瘤病致病機(jī)制并對(duì)其早期預(yù)防、診斷、治療提供理論依據(jù)。方法 實(shí)驗(yàn)分為3組:空白對(duì)照組(未轉(zhuǎn)染的骨肉瘤細(xì)胞)、陰性對(duì)照組(轉(zhuǎn)染陰性對(duì)照序列)和沉默組(轉(zhuǎn)染Ski-siRNA)。采用脂質(zhì)體法將特異性針對(duì)Ski基因的siRNA和陰性對(duì)照siRNA轉(zhuǎn)入骨肉瘤U...

【文章頁數(shù)】：40 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖3.1Ski在骨肉瘤U-2OS細(xì)胞中顯示為綠色熒光，主要分布于細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)中（×200）

蘭州大學(xué)碩士研究生論文沉默Ski基因?qū)侨饬鯱-2OS細(xì)胞生物學(xué)行為的影響第三章結(jié)果.1Ski在骨肉瘤U-2OS細(xì)胞中的表達(dá)運(yùn)用細(xì)胞免疫熒光技術(shù)檢測(cè)Ski基因在骨肉瘤U-2OS細(xì)胞中的表達(dá)分布，并通過倒置熒光顯微鏡觀察成像。首先骨肉瘤U-2OS細(xì)....

圖3.3沉默ski基因表達(dá)對(duì)U-2OS細(xì)胞增殖活力的影響

顯微鏡下觀察Ski-siRNA轉(zhuǎn)入骨肉瘤U-2OSFITC-control-siRNA轉(zhuǎn)染骨肉瘤U-2OS細(xì)胞orphologicalchangesofosteosarcomaU-2theSkispecificsiRNAwereobserved....

圖3.2倒置光學(xué)顯微鏡下觀察Ski-siRNA轉(zhuǎn)入骨肉瘤U-2OS細(xì)胞后細(xì)胞形態(tài)的變化及熒光顯微鏡下觀察FITC-control-siRNA轉(zhuǎn)染骨肉瘤U-2OS細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率（C）

蘭州大學(xué)碩士研究生論文沉默Ski基因?qū)侨饬鯱-2OS細(xì)胞生物學(xué)行為的影響采用FITC-control-siRNA檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率結(jié)果顯示，將6ulFITC-control-siRNA經(jīng)8uL的siRNALipofectamineRNAiMAXReag....

圖3.4沉默ski基因表達(dá)對(duì)細(xì)胞周期的影響

ontrol-siRNA;Ski-siRNA:U-2OScellstransfectedwiththespecificsiRNAtarene.*P<0.05,vstheNC-siRNAandthemockgroups(n=3)..4沉默Ski....

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