【目的】脊髓損傷（Spinal Cord Injury,SCI）是一種嚴(yán)重的創(chuàng)傷性疾病,修復(fù)手段主要有手術(shù)治療、藥物治療、細(xì)胞移植等。神經(jīng)干細(xì)胞移植能夠有效促進(jìn)SCI后神經(jīng)功能的恢復(fù),是當(dāng)前研究的熱點(diǎn)。iPSCs誘導(dǎo)的神經(jīng)干細(xì)胞（induced Pluripotent Stem Cells-Neural Stem Cells,iPS-NSCs）是一種具有自我更新和多向分化潛能的多能干細(xì)胞,自體取材避免了倫理學(xué)爭(zhēng)議和免疫排斥,應(yīng)用于細(xì)胞移植治療脊髓損傷具有顯著的優(yōu)勢(shì)。然而干細(xì)胞在體內(nèi)存活率低、向神經(jīng)方向分化較難,因此如何更好的促進(jìn)其增殖、定向分化是眾多研究者關(guān)注的焦點(diǎn)。國(guó)內(nèi)外研究表明低強(qiáng)度脈沖超聲（Low Intensity Pulsed Ultrasound,LIPUS）是一種可以促進(jìn)多種細(xì)胞增殖、分化的物理刺激手段,本研究旨在明確LIPUS對(duì)iPS-NSCs細(xì)胞特性的影響以及LIPUS介導(dǎo)的iPS-NSCs對(duì)脊髓損傷的修復(fù)作用,為干細(xì)胞的優(yōu)化和SCI的治療提供一種新的策略。本研究通過(guò):1)體外培養(yǎng)iPS-NSCs,將自主研制的LIPUS激勵(lì)系統(tǒng)作用于iPS-NSCs細(xì)胞,觀察細(xì)胞的形態(tài)...

【文章頁(yè)數(shù)】：133 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語(yǔ)/符號(hào)說(shuō)明
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、LIPUS激勵(lì)iPS-NSCs最佳物理參數(shù)的研究
    1.1 對(duì)象和方法
        1.1.1 實(shí)驗(yàn)器械
        1.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        1.1.3 低強(qiáng)度脈沖超聲系統(tǒng)的搭建
        1.1.4 iPS-NSCs傳代培養(yǎng)及細(xì)胞鑒定
        1.1.5 低強(qiáng)度脈沖超聲激勵(lì)細(xì)胞模型的建立
        1.1.6 CCK-8 檢測(cè)iPS-NSCs增殖活性
        1.1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    1.2 結(jié)果
        1.2.1 成功搭建低強(qiáng)度脈沖超聲激勵(lì)系統(tǒng)
        1.2.2 iPS-NSCs細(xì)胞的形態(tài)學(xué)觀察及細(xì)胞鑒定
        1.2.3 LIPUS對(duì) iPS-NSCs增殖活性的影響以及最佳激勵(lì)條件的確定
    1.3 討論
        1.3.1 LIPUS在生物組織中的理學(xué)效應(yīng)及其在骨科學(xué)中的應(yīng)用
        1.3.2 神經(jīng)干細(xì)胞在神經(jīng)系統(tǒng)中的起源、特點(diǎn)和作用
        1.3.3 誘導(dǎo)神經(jīng)干細(xì)胞的來(lái)源及誘導(dǎo)體系
        1.3.4 LIPUS對(duì)細(xì)胞增殖的作用
    1.4 小結(jié)
二、在最佳生物學(xué)參數(shù)下,LIPUS優(yōu)化iPS-NSCs細(xì)胞特性的研究
    2.1 對(duì)象和方法
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)器械
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.3 低強(qiáng)度脈沖超聲系統(tǒng)的搭建
        2.1.4 iPS-NSCs傳代培養(yǎng)及細(xì)胞鑒定
        2.1.5 低強(qiáng)度脈沖超聲激勵(lì)細(xì)胞模型的建立
        2.1.6 TUNEL檢測(cè)iPS-NSCs細(xì)胞凋亡的情況
        2.1.7 ELISA檢測(cè)iPS-NSCs細(xì)胞上清液中神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的含量
        2.1.8 Western Blot檢測(cè)Notch信號(hào)通路及細(xì)胞分化情況
        2.1.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 LIPUS激勵(lì)iPS-NSCs后細(xì)胞凋亡率的變化
        2.2.2 LIPUS激勵(lì)iPS-NSCs后細(xì)胞中NTFs含量的變化
        2.2.3 LIPUS激勵(lì)iPS-NSCs后細(xì)胞分化的情況
        2.2.4 LIPUS激勵(lì)iPS-NSCs后 Notch信號(hào)通路相關(guān)蛋白含量的變化
    2.3 討論
        2.3.1 LIPUS對(duì) iPS-NSCs細(xì)胞生物特性的影響
        2.3.2 LIPUS激勵(lì)iPS-NSCs可能的作用機(jī)制
        2.3.3 LIPUS修復(fù)神經(jīng)損傷的潛力
    2.4 小結(jié)
三、LIPUS介導(dǎo)iPS-NSCs細(xì)胞移植修復(fù)脊髓損傷的研究
    3.1 對(duì)象和方法
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)器械
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        3.1.3 脊髓損傷動(dòng)物模型建立
        3.1.4 細(xì)胞移植
        3.1.5 BBB運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分
        3.1.6 脊髓標(biāo)本取出及制作切片
        3.1.7 石蠟切片的制備
        3.1.8 HE染色
        3.1.9 免疫熒光觀察移植細(xì)胞在體內(nèi)分化情況
        3.1.10 ELISA檢測(cè)測(cè)定脊髓組織內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)因子的表達(dá)情況
        3.1.11 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 HE染色結(jié)果
        3.2.2 GFAP、NF200 免疫熒光染色結(jié)果
        3.2.3 脊髓組織內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)因子的表達(dá)情況
        3.2.4 BBB評(píng)分結(jié)果
    3.3 討論
        3.3.1 脊髓損傷動(dòng)物模型的制備及運(yùn)動(dòng)功能評(píng)價(jià)指標(biāo)的選擇
        3.3.2 NSCs在脊髓損傷修復(fù)中的作用及應(yīng)用
        3.3.3 多潛能干細(xì)胞在神經(jīng)損傷等再生醫(yī)學(xué)方面的應(yīng)用
        3.3.4 LIPUS介導(dǎo)的iPSc-NSCs修復(fù)脊髓損傷可能的作用機(jī)制
    3.4 小結(jié)
全文結(jié)論
論文創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說(shuō)明
附錄
綜述 低強(qiáng)度脈沖超聲在神經(jīng)修復(fù)中的應(yīng)用
    參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：4007416