體外培養(yǎng)小鼠微量圓形精子細(xì)胞冷凍保存研究
本文關(guān)鍵詞:體外培養(yǎng)小鼠微量圓形精子細(xì)胞冷凍保存研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:第一部分體外培養(yǎng)小鼠微量圓形精子細(xì)胞冷凍保存方法研究 目的:探討體外培養(yǎng)微量小鼠圓形精子細(xì)胞的最佳冷凍方法和冷凍條件。方法:采用玻璃化冷凍和常規(guī)慢冷凍分別在不同濃度甘油(5%、7%、11%)及不同平衡時間(0、15、30、45、60min)條件下對體外培養(yǎng)所獲微量小鼠圓形精子細(xì)胞進(jìn)行冷凍保存。結(jié)果:(1)玻璃化冷凍和常規(guī)慢冷凍在7%甘油中平衡時間30min均可獲得最佳復(fù)蘇率;(2)在最佳冷凍條件下,玻璃化冷凍小鼠圓形精子細(xì)胞的復(fù)蘇率顯著高于常規(guī)慢冷凍方法(P<0.05)。結(jié)論:采用玻璃化冷凍方法,,在7%濃度的甘油保護(hù)劑中平衡30min行微量小鼠圓形精子細(xì)胞冷凍,可獲得較滿意的細(xì)胞復(fù)蘇率。 第二部分凍融體外培養(yǎng)小鼠圓形精子細(xì)胞在體外受精中的應(yīng)用價值 目的:探討凍融體外培養(yǎng)小鼠圓形精子細(xì)胞在體外受精中的應(yīng)用價值。方法:對玻璃化冷凍復(fù)蘇的體外培養(yǎng)小鼠圓形精子細(xì)胞標(biāo)記DAPI熒光染料,行小鼠卵泡漿內(nèi)顯微注射(ROSI)后觀察其受精和胚胎發(fā)育過程。結(jié)果:解凍后精子細(xì)胞DAPI標(biāo)記率為100%, ROSI后雙原核期雄原核的DAPI標(biāo)記率為80.0%,第一次卵裂的2細(xì)胞期標(biāo)記率為77.3%;受精率、2-細(xì)胞率、4-8細(xì)胞率、桑囊胚率分別為51.9%、51.0%、41.8%和12.2%。結(jié)論:凍融小鼠圓形精子細(xì)胞具有一定的受精能力和胚胎發(fā)育潛能。
【關(guān)鍵詞】:生精細(xì)胞 圓形精子 玻璃化冷凍 甘油 ROSI DAPI
【學(xué)位授予單位】:安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號】:R321.1;R318.52
【目錄】:
- 英文縮略詞表6-7
- 中文摘要7-8
- Abstract8-10
- 引言10-12
- 第一部分12-22
- 1 材料13-15
- 2 方法15-16
- 3 統(tǒng)計學(xué)分析16-17
- 4 結(jié)果17-18
- 5 討論18-21
- 6 結(jié)論21-22
- 第二部分22-31
- 1 材料22-24
- 2 方法24-27
- 3 結(jié)果27-28
- 4 討論28-30
- 5 結(jié)論30-31
- 參考文獻(xiàn)31-35
- 附錄35-36
- 致謝36-38
- 綜述38-45
- 參考文獻(xiàn)43-45
【共引文獻(xiàn)】
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本文編號:489627
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