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體外培養(yǎng)小鼠微量圓形精子細胞冷凍保存研究

發(fā)布時間:2017-06-27 11:20

  本文關(guān)鍵詞:體外培養(yǎng)小鼠微量圓形精子細胞冷凍保存研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:第一部分體外培養(yǎng)小鼠微量圓形精子細胞冷凍保存方法研究 目的:探討體外培養(yǎng)微量小鼠圓形精子細胞的最佳冷凍方法和冷凍條件。方法:采用玻璃化冷凍和常規(guī)慢冷凍分別在不同濃度甘油(5%、7%、11%)及不同平衡時間(0、15、30、45、60min)條件下對體外培養(yǎng)所獲微量小鼠圓形精子細胞進行冷凍保存。結(jié)果:(1)玻璃化冷凍和常規(guī)慢冷凍在7%甘油中平衡時間30min均可獲得最佳復蘇率;(2)在最佳冷凍條件下,玻璃化冷凍小鼠圓形精子細胞的復蘇率顯著高于常規(guī)慢冷凍方法(P<0.05)。結(jié)論:采用玻璃化冷凍方法,,在7%濃度的甘油保護劑中平衡30min行微量小鼠圓形精子細胞冷凍,可獲得較滿意的細胞復蘇率。 第二部分凍融體外培養(yǎng)小鼠圓形精子細胞在體外受精中的應用價值 目的:探討凍融體外培養(yǎng)小鼠圓形精子細胞在體外受精中的應用價值。方法:對玻璃化冷凍復蘇的體外培養(yǎng)小鼠圓形精子細胞標記DAPI熒光染料,行小鼠卵泡漿內(nèi)顯微注射(ROSI)后觀察其受精和胚胎發(fā)育過程。結(jié)果:解凍后精子細胞DAPI標記率為100%, ROSI后雙原核期雄原核的DAPI標記率為80.0%,第一次卵裂的2細胞期標記率為77.3%;受精率、2-細胞率、4-8細胞率、桑囊胚率分別為51.9%、51.0%、41.8%和12.2%。結(jié)論:凍融小鼠圓形精子細胞具有一定的受精能力和胚胎發(fā)育潛能。
【關(guān)鍵詞】:生精細胞 圓形精子 玻璃化冷凍 甘油 ROSI DAPI
【學位授予單位】:安徽醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2013
【分類號】:R321.1;R318.52
【目錄】:
  • 英文縮略詞表6-7
  • 中文摘要7-8
  • Abstract8-10
  • 引言10-12
  • 第一部分12-22
  • 1 材料13-15
  • 2 方法15-16
  • 3 統(tǒng)計學分析16-17
  • 4 結(jié)果17-18
  • 5 討論18-21
  • 6 結(jié)論21-22
  • 第二部分22-31
  • 1 材料22-24
  • 2 方法24-27
  • 3 結(jié)果27-28
  • 4 討論28-30
  • 5 結(jié)論30-31
  • 參考文獻31-35
  • 附錄35-36
  • 致謝36-38
  • 綜述38-45
  • 參考文獻43-45

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 張營霞;杜衛(wèi)華;郝海生;朱化彬;王棟;;牛卵母細胞漿內(nèi)單精子注射的研究進展[J];中國畜牧獸醫(yī);2007年09期

2 張永忠,譚景和;哺乳動物精子細胞及精母細胞授精能力研究進展[J];聊城師院學報(自然科學版);2000年04期

3 張永忠,譚景和;哺乳動物生精細胞顯微授精研究與展望[J];自然雜志;2001年02期

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 劉新勇;注射圓形精子細胞的山羊卵母細胞激活和胚胎發(fā)育的研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學;2011年

2 朱少芳;人臍帶間充質(zhì)干細胞移植改善化療損傷卵巢功能的實驗研究[D];南方醫(yī)科大學;2011年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 朱培元;小鼠睪丸及不育患者精液中精子細胞的分離與鑒定[D];南京醫(yī)科大學;2002年

2 包磊;豬圓形精細胞顯微注射受精(ROSI)及相關(guān)問題的初步研究[D];西南大學;2006年

3 張營霞;牛卵母細胞胞漿內(nèi)單精子注射的研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學院;2007年

4 湯文彬;自、異體皮膚混合移植鼠全層皮膚缺損創(chuàng)面的研究[D];暨南大學;2010年

5 鄭娟;SPIO和BrdU標記人成纖維細胞的比較研究[D];重慶醫(yī)科大學;2010年


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本文編號:489627

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