C、Y、W 135群腦膜炎球菌莢膜多糖化學結構核磁共振檢測方法的建立
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【摘要】:目的建立基于核磁共振(nuclear magnetic resonance,NMR)技術檢測C群腦膜炎球菌莢膜多糖(group C meningococcal capsular polysaccharide,GCMP)、Y群腦膜炎球菌莢膜多糖(GYMP)和W135群腦膜炎球菌莢膜多糖(GWMP)化學結構的方法。方法建立1H-NMR檢測方法:使用布魯克600 MHz超導傅里葉核磁共振譜儀,配置5 mm BBO正向寬帶高分辨液體探頭。脈沖程序為水峰壓制(zgpr),溫度為298 K(25℃)。具體參數設置如下:中心頻率約為4.7 ppm;圖譜寬度為7 211 Hz;采樣時間為2.272 s;弛豫延遲時間為2 s;掃描次數為512次;信號經傅里葉轉換后加入1.0 Hz的窗口函數,檢測結果使用Topspin 3.0軟件進行處理。驗證該方法的專屬性、重復性及中間精密性。結果 5批GCMP、GYMP和GWMP檢測結果的CV值均小于0.35%;3個濃度GCMP、GYMP和GWMP在相同的操作條件下以及不同工作日間、不同實驗員間的檢測結果的CV值均小于0.35%。結論建立的1H-NMR檢測方法簡便、快速、準確,檢測GCMP、GYMP和GWMP具有極高的專屬性、重復性和中間精密性,適用于疫苗生產研究中GCMP、GYMP和GWMP樣品的定性結構鑒定。
【作者單位】: 蘭州生物制品研究所有限責任公司;中國生物技術股份有限公司總裁辦公室;
【關鍵詞】: 腦膜炎球菌 莢膜多糖 核磁共振
【基金】:國家科技重大專項重大新藥創(chuàng)制專項(2013ZX09402-302-215) 國家科技支撐計劃項目(2008BAI66B01) 甘肅省科技重大專項(0801NKDA003) 甘肅省“十二五”隴藥產業(yè)發(fā)展規(guī)劃項目
【分類號】:O657.2;R378.15
【正文快照】: 奈瑟腦膜炎球菌(Neisseria meningococcus)是具有多糖莢膜的革蘭陰性雙球菌,其莢膜多糖結構差異導致至少13種不同的血清群,其中絕大多數侵襲性腦膜炎球菌感染由表達A、B、C、X、Y、W135群莢膜多糖的血清群引起[1-3],這兩種疾病給大腦帶來嚴重損害,如不治療,50%的患者會失去生
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