本文關(guān)鍵詞：豬囊尾蚴膜聯(lián)蛋白基因的原核表達(dá)和免疫學(xué)分析，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的對(duì)豬囊尾蚴AF239799-1膜聯(lián)蛋白基因進(jìn)行高效原核表達(dá),對(duì)表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行免疫學(xué)分析。方法通過(guò)DNA自動(dòng)合成儀,用固相亞磷酸酰胺法合成一段5'端有NdeⅠ內(nèi)切酶位點(diǎn),3'端有XhoⅠ內(nèi)切酶位點(diǎn)的豬囊尾蚴AF239799-1基因序列,并將其克隆到原核表達(dá)載體pET28a(+)中,經(jīng)測(cè)序、PCR及雙酶切鑒定后,將其轉(zhuǎn)入到宿主菌E.coli BL21(DE3)中,用IPTG誘導(dǎo)表達(dá),表達(dá)產(chǎn)物采用十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)進(jìn)行鑒定,并用Ni-NTA親和層析柱純化,純化的重組蛋白用Western blot進(jìn)行免疫學(xué)分析。結(jié)果該基因全長(zhǎng)為1 250bp,編碼區(qū)為2~1 042bp,編碼346個(gè)氨基酸,理論分子質(zhì)量、等電點(diǎn)分別為40.39ku和6.80。經(jīng)DNA測(cè)序、PCR及雙酶切鑒定,pET28a(+)-AF239799-1重組質(zhì)粒構(gòu)建成功。重組質(zhì)粒在E.coli BL21(DE3)主要以包涵體形式表達(dá),Western blot顯示重組蛋白可被豬帶絳蟲(chóng)病豬血清識(shí)別。結(jié)論豬囊尾蚴AF239799-1基因可在原核表達(dá)系統(tǒng)中高效表達(dá),表達(dá)產(chǎn)物具有免疫反應(yīng)性。
【作者單位】： 貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院臨床生化教研室;
【關(guān)鍵詞】： 豬囊尾蚴 AF-基因 原核表達(dá) 免疫反應(yīng)性
【基金】：2012年度貴州省優(yōu)秀科技教育人才省長(zhǎng)基金項(xiàng)目[黔省專(zhuān)合字2012(43)號(hào)]
【分類(lèi)號(hào)】：R383.34
【正文快照】： ***豬囊尾蚴病是一種人畜共患病,在許多國(guó)家包括中國(guó)在內(nèi)有著廣泛的流行區(qū)域,全國(guó)大約存在1 000萬(wàn)名囊尾蚴病患者,每年屠宰的囊尾蚴病豬大約有1200萬(wàn)頭,每年造成經(jīng)濟(jì)損失大約20億元,它不僅對(duì)人類(lèi)健康造成嚴(yán)重危害,也對(duì)養(yǎng)豬行業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失[1-3]。因此,開(kāi)展豬囊尾蚴病的

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 趙森林,付治鋒,李云生,許熾標(biāo),尤金英,趙冠宏;吡喹酮對(duì)體外豬囊尾蚴作用的電鏡觀察[J];寄生蟲(chóng)學(xué)與寄生蟲(chóng)病雜志;1986年02期

2 侯云圣,李景琦,劉昱,張家駒,王國(guó)瑞,范明;豬囊尾蚴超微結(jié)構(gòu)的觀察[J];中國(guó)寄生蟲(chóng)學(xué)與寄生蟲(chóng)病雜志;1988年02期

3 劉殿武,張莉,丁月新,張孟余,閆會(huì)敏,郭麗莉,劉樹(shù)賢;豬囊尾蚴蛋白水解酶的初步研究[J];中國(guó)寄生蟲(chóng)學(xué)與寄生蟲(chóng)病雜志;2000年04期

4 紀(jì)洪石;人腦內(nèi)豬囊尾蚴囊胞的掃描電鏡觀察[J];沈陽(yáng)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2001年04期

5 孫曉菲,賈廣炎,楊貴貞;抗豬囊尾蚴單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞建株研究[J];中國(guó)免疫學(xué)雜志;1987年03期

6 劉永杰,李慶章,郝艷紅;豬囊尾蚴發(fā)育過(guò)程中的細(xì)胞凋亡[J];中國(guó)人獸共患病雜志;2003年01期

7 杜軍,伊藤洋一,李淑紅,連建安;豬囊尾蚴可溶性蛋白的提取和分析[J];中國(guó)寄生蟲(chóng)學(xué)與寄生蟲(chóng)病雜志;1994年02期

8 徐建農(nóng),吳燦理,李霖,陳培霞;豬囊尾蚴三種組分的抗原特性分析[J];中國(guó)寄生蟲(chóng)學(xué)與寄生蟲(chóng)病雜志;1988年S1期

9 史大中,郭虹,呂剛,劉德山;豬囊尾蚴表面蛋白及其抗原性的初步測(cè)定分析[J];中國(guó)人獸共患病雜志;1989年01期

10 周文琴;;豬囊尾蚴石灰小體兩種染色方法的比較[J];河北醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1992年01期

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 廣圣芳;一個(gè)新的豬囊尾蚴蛋白的cDNA分子篩選、克隆、表達(dá)與鑒定[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2007年

2 李文玲;豬囊尾蚴一種蛋白抗原的分子克隆[D];河北醫(yī)科大學(xué);2002年

  本文關(guān)鍵詞：豬囊尾蚴膜聯(lián)蛋白基因的原核表達(dá)和免疫學(xué)分析，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：410300