白頭翁湯正丁醇提取物對白念珠菌VVC臨床株體外生物膜形成的抑制作用
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【摘要】:目的探討白頭翁湯正丁醇提取物(Butyl alcohol extract of Bai Tou Weng decoction,BAEB)對分離自外陰陰道念珠菌病(vulvovaginal candidiasis,VVC)的白念珠菌臨床分離株(以下簡稱VVC臨床株)生物膜形成的影響。方法采用微量稀釋法測定BAEB對白念珠菌的最低抑菌濃度(Minimal Inhibitory Concentration,MIC);甲基四氮鹽(XTT)還原法測定BAEB對白念珠菌生物膜代謝活性的影響,Time-kill法檢測BAEB對白念珠菌活菌數(shù)的影響;結(jié)晶紫染色法測定BAEB對白念珠菌生物膜生物量(Biomass)的影響;掃描電鏡(SEM)觀察BAEB對白念珠菌生物膜形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響;激光共聚焦顯微鏡(CLSM)檢測BAEB對白念珠菌生物膜熒光信號強(qiáng)度的影響;實時熒光定量PCR(qRT-PCR)檢測生物膜相關(guān)基因UME6、PES1和HSP90的轉(zhuǎn)錄水平變化。結(jié)果 BAEB對12株白念珠菌的MIC在64~256μg/mL之間,對白念珠菌生物膜的SMIC80(抑制80%生物膜形成的最低藥物濃度)為1 024μg/mL或以上;Time-Kill曲線顯示在12h之后,512、1 024μg/mL濃度的BAEB對白念珠菌均具良好的殺傷作用;結(jié)晶紫染色法表明512、1 024μg/mLBAEB能夠減少其生物膜生物量;SEM觀察到1 024μg/mL BAEB能夠有效抑制白念珠菌在不同黏附介質(zhì)上生物膜的完整度;CLSM顯示512、1 024μg/mL的BAEB可以明顯降低生物膜熒光信號強(qiáng)度;qRT-PCR檢測顯示在256、512、1 024μg/mL的BAEB作用下,UME6轉(zhuǎn)錄水平分別下調(diào)了72%、71%、77%,在512、1 024μg/mL的BAEB下HSP90轉(zhuǎn)錄水平上調(diào)了2.23和3.31倍,而PES1未有明顯變化。結(jié)論 BAEB可以抑制白念珠菌VVC臨床株體外生物膜的形成。
【作者單位】: 安徽中醫(yī)藥大學(xué)中西醫(yī)結(jié)合臨床學(xué)院;安徽省中醫(yī)藥科學(xué)院中西醫(yī)結(jié)合研究所;安徽醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】: 白頭翁湯正丁醇提取物 白念珠菌 外陰陰道念珠菌病 生物膜
【基金】:國家自然科學(xué)基金(81573725) 安徽省高校自然科研重點項目(KJ2015A030) 安徽中醫(yī)藥大學(xué)校級科研基金(2014zr026)
【分類號】:R379.4
【正文快照】: 230038;3.安徽醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院,合肥230032)[Chin J Mycol,2015,10(6):321-327]白念珠菌(Candida albicans)是存在于人體體表或腔道的一種條件致病性真菌,當(dāng)長期應(yīng)用抗生素、免疫抑制劑,患有艾滋病等造成機(jī)體菌群失調(diào)或抵抗力下降時,白念珠菌即可致病[1-2]。中藥復(fù)方白頭翁
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