發(fā)布時間：2017-05-29 19:01

  本文關鍵詞：甘露聚糖肽對細胞因子誘導的殺傷細胞的活性的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的甘露聚糖肽(?)nannatide)是一種生物反應修飾物,是從健康人口腔分離的α-溶血性鏈球菌(a-hemolytic Streptococcui)33號菌株經(jīng)深層培養(yǎng),發(fā)酵提取而得到的一種多糖肽類物質(zhì),兼具較強的的免疫活性及抗腫瘤作用的雙重生物學特性。細胞因子誘導的殺傷細胞(cytokine induced killer cells, CIK)是利用人外周血單個核細胞在體外用多種細胞因子如重組人白介素2(IL-2)、重組人Y干擾素(IFN-γ)和抗人CD3單克隆抗體(anti-CD3mab)等誘導而獲得的一群異質(zhì)細胞。其主要的效應細胞為CD3+CD56+細胞,CIK是一種新型、高效、兼具有T淋巴細胞強大的抗瘤活性和NK細胞的非MHC限制性殺瘤特點的免疫效應細胞,在腫瘤過繼性免疫治療中顯露出巨大的應用價值。目前有關甘露聚糖肽能否增強CIK的增殖及殺傷活性研究報道較少,本研究通過觀察甘露聚糖肽作用后CIK的增殖及對于K562、Raji細胞株的殺傷活性的變化,初步探討甘露聚糖肽對人CIK的殺傷活性的影響并探討相應機制,為甘露聚糖肽應用于過繼性免疫治療提供實驗和理論依據(jù)。 方法抽取健康供血者外周血,分離單個核細胞(PBMC),常規(guī)制備CIK細胞,收集培養(yǎng)14d的CIK細胞加入不同濃度的甘露聚糖肽培養(yǎng)48h作為實驗組,對照組不添加甘露聚糖肽。用倒置顯微鏡觀察實驗組及對照組CIK細胞形態(tài)學變化；MTT法檢測細胞增殖率；FCM法檢測免疫表型及CD3+CD56+細胞表達以及CIK細胞表面NKG2D含量,FCM法檢測CIK細胞顆粒酶與穿孔素的表達；LDH釋放法測定CIK細胞對于K562、Raji細胞株殺傷活性。 結果各實驗組的甘露聚糖肽均可促進CIK細胞增殖,并呈濃度依賴性；并可上調(diào)CIK細胞表面NKG2D受體表達(P0.05)；其分泌顆粒酶、穿孔素的能力亦顯著高于對照組(P0.05)；經(jīng)甘露聚糖肽作用的CIK細胞對于K562、Raji細胞株的殺傷活性明顯升高(P0.05)。 結論甘露聚糖肽有望作為CIK免疫活性的增強佐劑,但應進一步研究其確切機制。
【關鍵詞】：CIK細胞 甘露聚糖類 殺傷活性
【學位授予單位】：蘭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R392
【目錄】：

• 中文摘要3-4
• Abstract4-8
• 前言8-10
• 材料與方法10-15
• 1.1 試劑與儀器10-11
• 1.2 主要溶液配置及細胞株培養(yǎng)11
• 1.3 CIK細胞的制備11-12
• 1.4 CIK細胞的免疫表型及NKG2D受體檢測12
• 1.5 甘露聚糖肽作用于CIK細胞12
• 1.6 甘露聚糖肽作用前后CIK細胞形態(tài)學觀察12-13
• 1.7 甘露聚糖肽作用后CIK細胞免疫表型及NKG2D受體檢測13
• 1.8 MTT法檢測不同濃度的甘露聚糖肽對CIK細胞增殖的影響13
• 1.9 FCM檢測甘露聚糖肽作用前后CIK細胞穿孔素、顆粒酶B的表達13-14
• 1.10 LDH法測定甘露聚糖肽作用后CIK細胞的殺傷活性14-15
• 結果15-21
• 2.1 甘露聚糖肽促進CIK細胞增殖15-17
• 2.2 甘露聚糖肽對CIK細胞免疫表型及NKG2D表達的影響17-18
• 2.3 甘露聚糖肽對CIK細胞增殖率的影響18-19
• 2.4 甘露聚糖肽對CIK細胞穿孔素、顆粒酶B的表達影響19
• 2.5 甘露聚糖肽作用于CIK細胞后其對于Raji、K562細胞的殺傷活性的檢測19-21
• 討論21-26
• 結論26-27
• 參考文獻27-29
• 綜述29-37
• 參考文獻34-37
• 在學期間的研究成果37-38
• 致謝38-39
• 英文縮略詞39

【參考文獻】

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本文編號：405460