本文關(guān)鍵詞：甘露聚糖肽對細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞的活性的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的甘露聚糖肽(?)nannatide)是一種生物反應(yīng)修飾物,是從健康人口腔分離的α-溶血性鏈球菌(a-hemolytic Streptococcui)33號菌株經(jīng)深層培養(yǎng),發(fā)酵提取而得到的一種多糖肽類物質(zhì),兼具較強(qiáng)的的免疫活性及抗腫瘤作用的雙重生物學(xué)特性。細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(cytokine induced killer cells, CIK)是利用人外周血單個(gè)核細(xì)胞在體外用多種細(xì)胞因子如重組人白介素2(IL-2)、重組人Y干擾素(IFN-γ)和抗人CD3單克隆抗體(anti-CD3mab)等誘導(dǎo)而獲得的一群異質(zhì)細(xì)胞。其主要的效應(yīng)細(xì)胞為CD3+CD56+細(xì)胞,CIK是一種新型、高效、兼具有T淋巴細(xì)胞強(qiáng)大的抗瘤活性和NK細(xì)胞的非MHC限制性殺瘤特點(diǎn)的免疫效應(yīng)細(xì)胞,在腫瘤過繼性免疫治療中顯露出巨大的應(yīng)用價(jià)值。目前有關(guān)甘露聚糖肽能否增強(qiáng)CIK的增殖及殺傷活性研究報(bào)道較少,本研究通過觀察甘露聚糖肽作用后CIK的增殖及對于K562、Raji細(xì)胞株的殺傷活性的變化,初步探討甘露聚糖肽對人CIK的殺傷活性的影響并探討相應(yīng)機(jī)制,為甘露聚糖肽應(yīng)用于過繼性免疫治療提供實(shí)驗(yàn)和理論依據(jù)。 方法抽取健康供血者外周血,分離單個(gè)核細(xì)胞(PBMC),常規(guī)制備CIK細(xì)胞,收集培養(yǎng)14d的CIK細(xì)胞加入不同濃度的甘露聚糖肽培養(yǎng)48h作為實(shí)驗(yàn)組,對照組不添加甘露聚糖肽。用倒置顯微鏡觀察實(shí)驗(yàn)組及對照組CIK細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化；MTT法檢測細(xì)胞增殖率；FCM法檢測免疫表型及CD3+CD56+細(xì)胞表達(dá)以及CIK細(xì)胞表面NKG2D含量,FCM法檢測CIK細(xì)胞顆粒酶與穿孔素的表達(dá)；LDH釋放法測定CIK細(xì)胞對于K562、Raji細(xì)胞株殺傷活性。 結(jié)果各實(shí)驗(yàn)組的甘露聚糖肽均可促進(jìn)CIK細(xì)胞增殖,并呈濃度依賴性；并可上調(diào)CIK細(xì)胞表面NKG2D受體表達(dá)(P0.05)；其分泌顆粒酶、穿孔素的能力亦顯著高于對照組(P0.05)；經(jīng)甘露聚糖肽作用的CIK細(xì)胞對于K562、Raji細(xì)胞株的殺傷活性明顯升高(P0.05)。 結(jié)論甘露聚糖肽有望作為CIK免疫活性的增強(qiáng)佐劑,但應(yīng)進(jìn)一步研究其確切機(jī)制。
【關(guān)鍵詞】：CIK細(xì)胞 甘露聚糖類 殺傷活性
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R392
【目錄】：

• 中文摘要3-4
• Abstract4-8
• 前言8-10
• 材料與方法10-15
• 1.1 試劑與儀器10-11
• 1.2 主要溶液配置及細(xì)胞株培養(yǎng)11
• 1.3 CIK細(xì)胞的制備11-12
• 1.4 CIK細(xì)胞的免疫表型及NKG2D受體檢測12
• 1.5 甘露聚糖肽作用于CIK細(xì)胞12
• 1.6 甘露聚糖肽作用前后CIK細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察12-13
• 1.7 甘露聚糖肽作用后CIK細(xì)胞免疫表型及NKG2D受體檢測13
• 1.8 MTT法檢測不同濃度的甘露聚糖肽對CIK細(xì)胞增殖的影響13
• 1.9 FCM檢測甘露聚糖肽作用前后CIK細(xì)胞穿孔素、顆粒酶B的表達(dá)13-14
• 1.10 LDH法測定甘露聚糖肽作用后CIK細(xì)胞的殺傷活性14-15
• 結(jié)果15-21
• 2.1 甘露聚糖肽促進(jìn)CIK細(xì)胞增殖15-17
• 2.2 甘露聚糖肽對CIK細(xì)胞免疫表型及NKG2D表達(dá)的影響17-18
• 2.3 甘露聚糖肽對CIK細(xì)胞增殖率的影響18-19
• 2.4 甘露聚糖肽對CIK細(xì)胞穿孔素、顆粒酶B的表達(dá)影響19
• 2.5 甘露聚糖肽作用于CIK細(xì)胞后其對于Raji、K562細(xì)胞的殺傷活性的檢測19-21
• 討論21-26
• 結(jié)論26-27
• 參考文獻(xiàn)27-29
• 綜述29-37
• 參考文獻(xiàn)34-37
• 在學(xué)期間的研究成果37-38
• 致謝38-39
• 英文縮略詞39

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：405460