本文關鍵詞：80株中國大陸新生隱球菌環(huán)境株表型和分子特征的初步研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究背景：新生隱球菌所致的感染好發(fā)于細胞免疫功能低下患者，隨著器官移植、骨髓移植等新技術的發(fā)展以及AIDS患者的增多，，隱球菌感染的發(fā)生率也呈逐年明顯上升的趨勢。研究發(fā)現(xiàn)新生隱球菌是隱球菌屬的重要致病菌，屬環(huán)境腐生菌，可從土壤和鴿糞中分離到，并被認為是人和動物最主要的傳染源，主要引起人的腦膜炎和肺炎。隱球菌病，存在顯著的死亡率，但只有稀缺的流行病學數(shù)據(jù)存在。國內(nèi)的研究大都集中于臨床株，本研究擬對中國大陸新生隱球菌的環(huán)境株的基因型和分子特征進行初步分析，以期進一步了解環(huán)境株與臨床株之間內(nèi)在的關系。我們試圖進行從中國大陸不同地區(qū)鴿子糞中對隱球菌環(huán)境分離，從隱球菌病的病原特征、毒力、基因型等生物學特性進行了概述，并對人新生隱球菌病的傳染和流行的基本環(huán)節(jié)、發(fā)病機制、臨床表現(xiàn)、防治等方面的研究進展進行了綜述。力求建立監(jiān)測計劃，以防止感染。 研究目的：本研究旨在了解中國大陸地區(qū)新生隱球菌環(huán)境株的分布情況及其表型和基因型特征。 研究方法： 1.實驗對象：我們采用CACA培養(yǎng)基培養(yǎng)了1372份來自中國大陸東、西、南、北、中大部分地區(qū)私人和公共養(yǎng)鴿場所的鴿糞標本，共分離得到80株新生隱球菌。另有新生隱球菌臨床株及標準株作為對照。 2.實驗方法： 2.1鴿糞中分離新生隱球菌:獲得新生隱球菌環(huán)境株。 2.2新生隱球菌毒性因子：我們意在了解在新生隱球菌毒力表型特征。 2.2.1莢膜：印度墨汁染色。 2.2.2黑色素：隱球菌在含酚混合物的營養(yǎng)基生長并合成黑色素。 2.2.3尿素酶試驗 2.2.437℃生長試驗：影響致病真菌生長的一個最重要的因素是溫度。在體外條件下，隱球菌屬中的其他中很少能在37℃下生長。 2.3.分子生物學研究：M13-PCR結合ITS序列分析 2.4.動物毒力試驗 結果： 新生隱球菌環(huán)境株分離陽性率約5.5％，所有菌株37℃生長良好，有完整的莢膜，尿素酶試驗陽性，ITS序列分析證實它們都屬于血清型A。M13-PCR顯示，它們的基因型為我國及東南亞地區(qū)特征性的VNIc型，顯示了與臨床株的高度一致性。 結論：中國大陸地區(qū)的隱球菌臨床株與環(huán)境株顯示了高度的同源性，提示對于易感人群，阻斷與相應環(huán)境的接觸可有效防止新生隱球菌的感染。 調(diào)查結果顯示來源于集鴿鴿糞的分離率高于公共廣場。可能的原因是，利用各地集鴿時間采集的鴿糞基本來自每戶私人鴿友，其通風不良，鴿棚中地面和籠子中堆積的鴿糞也更厚，這些條件可能為新生隱球菌在鴿糞中生長繁殖提供了更為適宜的條件。另外，分離率還與地域相關，按照北緯20~0N～50~0N劃分的3個區(qū)域，鴿群的標本分離率以20~0N～30~0N最高(G3，15.25％)，其次為40~0N～5~00N (G1，5.45％)，30~0N～40~0N (G2，5.1％)最低�？赡艹伺c飼養(yǎng)條件、鴿子的活動習性、運動遷徙等有關外，還與氣候條件緊密相關。提示相應的自然環(huán)境(溫帶)更適合該真菌的生存。這些原因與致病力及環(huán)境pH值的關系值得進一步研究。
【關鍵詞】：新生隱球菌 表型 基因型 環(huán)境分離 鴿糞
【學位授予單位】：第二軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R378.1
【目錄】：

• 摘要6-8
• ABSTRACT8-10
• 縮略詞表10-11
• 前言11-12
• 課題設計12-13
• 第一部分 鴿糞中分離新生隱球菌13-17
• （一）材料與儀器13-14
• （二）方法14-16
• （三）分析與討論16
• 參考文獻16-17
• 第二部分 新生隱球菌表型特征研究17-23
• （一）材料與儀器17-18
• （二）方法18-21
• （三）分析與討論21-22
• 參考文獻22-23
• 第三部分 分子特征分析23-34
• （一）材料與儀器23-25
• （二）方法25-32
• （三）分析與討論32-33
• 參考文獻33-34
• 第四部分 動物毒力試驗34-37
• （一）材料與儀器34-35
• （二）方法35
• （三）分析與討論35-36
• 參考文獻36-37
• 綜述37-42
• 參考文獻39-42
• 附錄42-43
• 在讀期間發(fā)表論文43
• 參加科研工作情況說明43-44
• 致謝44

【參考文獻】

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1 李安生,呂桂霞,沈永年,陳偉,吳紹熙;對兩種新生隱球菌選擇性培養(yǎng)基的比較研究[J];微生物學通報;2001年05期

  本文關鍵詞：80株中國大陸新生隱球菌環(huán)境株表型和分子特征的初步研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：400972