補(bǔ)體系統(tǒng)在機(jī)體的抗病毒免疫中處于一線防御地位，是病毒建立感染所必須面對(duì)和克服的機(jī)體的第一道防線。作為機(jī)體重要的天然免疫防御系統(tǒng)及特異性體液免疫應(yīng)答的重要效應(yīng)系統(tǒng)，補(bǔ)體系統(tǒng)除了具有溶解、清除病毒等致病微生物，阻止病毒進(jìn)入靶細(xì)胞，調(diào)理病毒的吞噬等重要功能外，還可通過“識(shí)別”自身組織細(xì)胞表面的補(bǔ)體活化調(diào)節(jié)蛋白來對(duì)自身細(xì)胞加以保護(hù)，使之不受侵害。遺憾的是，一些有包膜的病毒也在長期的演化過程中獲得了補(bǔ)體系統(tǒng)的這種自我保護(hù)機(jī)制，即可以通過結(jié)合宿主膜補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白來逃避補(bǔ)體的攻擊。病毒免疫逃避的機(jī)制也可能是我們尋求有效的抗病毒治療的靶點(diǎn)。因此我們?cè)O(shè)想，1)是否可以通過封閉病毒表面補(bǔ)體活化調(diào)節(jié)蛋白的功能來消除病毒逃避補(bǔ)體攻擊的機(jī)制，恢復(fù)病毒對(duì)補(bǔ)體攻擊的敏感性?2)由于膜補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白在體內(nèi)廣泛表達(dá)，是否可以通過制備針對(duì)病毒及其表面補(bǔ)體活化調(diào)節(jié)蛋白的雙特異性抗體來實(shí)現(xiàn)特異性封閉病毒表面的補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白，同時(shí)利用抗體的Fc段誘導(dǎo)內(nèi)源性補(bǔ)體活化，提高補(bǔ)體抗病毒的效率的目的? 為了驗(yàn)證我們的設(shè)想，本研究進(jìn)行了下面三部分的實(shí)驗(yàn)。 1．以嚴(yán)重危害人類健康，且具有復(fù)雜免疫逃避機(jī)制的有包膜的HIV病毒及痘苗...

【文章頁數(shù)】：147 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖I一6:CD59在EEV上存在的westernBlot結(jié)果，結(jié)果示Hela細(xì)胞(5)及三組純化

2345EEv上存在的westernBlot結(jié)果，結(jié)果示Hela(1)細(xì)上(3，4，5)有特異性的條帶，分子量為70kd左右，。2345

圖2一3:SDS一隊(duì)GE結(jié)果顯示抗體純化后條帶均一

3579111315171921232527293133353739管號(hào)圖2一1兔抗EEV抗體純化洗脫圖C的e司OO圖2一2:CD55單抗純化洗脫圖

圖3一l:CD55單抗雜交瘤細(xì)胞DG3總RNA的提取電泳圖，圖示RNA電泳的完整性好，三條帶清晰

使液體被吸收。培養(yǎng)12一16小時(shí)，可見菌落長提取后，分別進(jìn)行限制性內(nèi)切酶選及鑒定:按試劑盒說明書進(jìn)行(上海華舜co班酶切篩選插入PCR擴(kuò)增產(chǎn)aRa公司完成BL基因庫檢索(網(wǎng)址)燈embl/Submission/webin.html鑒定:將提取的總RNA進(jìn)行電泳型完整，沒有明顯的降....

圖3一2CD55單抗VH、VL的PCR擴(kuò)增，圖示CD55單抗重鏈及輕鏈均有特異性條帶出現(xiàn)，大小分別為35obp(1)及31obp(2)左右，與預(yù)期的分子量相符

‘一185~55圖3一l:CD55單抗雜交瘤細(xì)胞DG3總RNA的提取電泳圖，圖示RNA電泳的完整性好，三條帶清晰。提示可以用作下一步RT一PCR模板。

本文編號(hào)：3991647