本文關(guān)鍵詞：抗幽門螺桿菌人胃源乳桿菌的篩選及其作用評價，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的 從正常人胃粘膜中分離乳桿菌，篩選其中能耐胃腸液的酸性和膽鹽，并具有抗幽門螺桿菌作用的菌株，通過小鼠雙悉生模型，評價該菌株在胃內(nèi)抗幽門螺桿菌感染的作用，為進一步研制防治幽門螺桿菌感染的益生菌提供實驗材料。 方法 采集胃鏡檢查者的胃粘膜標本，接種于MRS選擇性平板，37℃微需氧培養(yǎng)，挑取可疑菌落涂片鏡檢，對其中的革蘭陽性桿菌進行分純培養(yǎng)，通過形態(tài)學(xué)和生化反應(yīng)初步鑒定。對疑為乳桿菌的細菌再PCR擴增特異性16SrDNA，并測序鑒定。 對分離的乳桿菌，評價其在模擬胃腸液pH2.5～pH4.5酸性條件和0.05%～0.2%膽鹽條件下的耐受性，通過瓊脂擴散牛津杯法及細胞粘附試驗評價其抑制幽門螺桿菌生長和粘附人胃上皮細胞的能力，同時半定量檢測生物膜形成能力和產(chǎn)酸量的多少。 用幽門螺桿菌和篩選出的乳桿菌給無菌昆明小鼠灌胃，分別建立幽門螺桿菌和乳桿菌單悉生和雙悉生感染模型。并于末次灌胃后對胃內(nèi)定植的細菌進行定量培養(yǎng)和定量PCR檢測。同時檢測胃粘膜組織內(nèi)髓過氧化物酶的含量及切片HE染色觀察，評價其炎癥程度。 結(jié)果 1.從21例胃鏡檢查者胃粘膜中分離出6株乳桿菌，編號為L1、L2、L3、L4-1、L4-2、L4-3。經(jīng)測序、NCBI序列比對確定L1、L2為口腔乳桿菌，L3為卷曲乳桿菌，L4-1為唾液乳桿菌，L4-2為加氏乳桿菌，L4-3為德氏保加利亞乳桿菌。 2.6株乳桿菌中的L3株，產(chǎn)酸量最大，形成生物膜的能力強于其它菌株，在pH2.5、 pH3.0時生長率均達到了150%，耐高濃度膽鹽，，有較強的抗幽門螺桿菌活性，阻止幽門螺桿菌粘附人胃上皮細胞的作用最強。 3.乳桿菌和幽門螺桿菌在各實驗組中感染率均為100%，單悉生幽門螺桿菌感染組胃粘膜有明顯的腺體病變，大量上皮細胞脫落，髓過氧化物酶含量高，炎癥程度重。乳桿菌和幽門螺桿菌雙悉生組中幽門螺桿菌的定植量明顯降低（P0.05），炎癥變化不明顯，髓過氧化物酶含量低于單悉生幽門螺桿菌組（P0.05）。 結(jié)論 成功地從人胃粘膜中分離出6株乳桿菌，并篩選到一株抗幽門螺桿菌活性較強的菌株L3；成功建立了昆明小鼠的單悉生模型和雙悉生模型；乳桿菌L3能降低胃內(nèi)幽門螺桿菌的定植和對胃粘膜的損傷。
【關(guān)鍵詞】：幽門螺桿菌 乳桿菌 篩選 無菌小鼠 悉生模型
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R378
【目錄】：

• 符號說明5-6
• 摘要6-8
• ABSTRACT8-11
• 前言11-13
• 第一部分 人胃粘膜中乳桿菌的分離和鑒定13-23
• 引言13
• 1 材料與方法13-17
• 2 結(jié)果17-22
• 3 討論22-23
• 第二部分 抗幽門螺桿菌人胃源乳桿菌的篩選23-37
• 引言23
• 1 材料與方法23-29
• 2 結(jié)果29-36
• 3 討論36-37
• 第三部分 悉生小鼠模型評價人胃源乳桿菌體內(nèi)抗幽門螺桿菌的作用37-49
• 引言37
• 1 材料與方法37-42
• 2 結(jié)果42-48
• 3 討論48-49
• 全文總結(jié)49-50
• 參考文獻50-55
• 文獻綜述55-62
• 參考文獻59-62
• 致謝62-63
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文及參與研究的課題63-64

【共引文獻】

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本文編號：398316