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HGF激活PI3K/Akt通路在間充質(zhì)干細(xì)胞抑制TGF-β1誘導(dǎo)腎小管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化中的作用

發(fā)布時(shí)間:2024-05-18 14:18
  目的:本研究旨在探討骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cell,MSC)及其分泌的肝細(xì)胞生長因子(hepatocyte growth factor,HGF)抑制轉(zhuǎn)化生長因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)誘導(dǎo)腎小管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化的作用及其機(jī)制。方法:1.體外實(shí)驗(yàn)(1)MSC的提取與鑒定,收集第3代C57雄性小鼠骨髓來源的MSC并通過流式細(xì)胞術(shù)檢測其表面抗原CD34,CD45,CD105的表達(dá);進(jìn)行成骨或成脂誘導(dǎo)分化,分別用茜素紅和Oil Red染色鑒定;(2)HK-2細(xì)胞分為①對照組,②TGF-β1(8ng/ml)組,③TGF-β1+MSC組,④TGF-β1+MSC+HGF抗體(0.5ug/ml)組,⑤TGF-β1+MSCs+PY294002抑制劑組(10umol/L)。倒置顯微鏡下觀察各組細(xì)胞形態(tài)變化,實(shí)時(shí)定量-聚合酶鏈反應(yīng)(real time polymerase chain reaction,real time PCR)和蛋白印跡法(western blot,WB)檢測α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-smooth mus...

【文章頁數(shù)】:70 頁

【學(xué)位級別】:碩士

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討論
結(jié)論
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