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生物功能化粒子/核酸探針技術(shù)快速檢測(cè)病原菌及ATP的研究

發(fā)布時(shí)間:2024-04-19 20:44
  病原菌引起的感染性疾病是近年威脅人類健康和造成社會(huì)恐慌的主要因素,同時(shí)也是造成人類死亡的重要原因。檢測(cè)任務(wù)的緊迫性與檢測(cè)樣品的復(fù)雜性給傳統(tǒng)病原菌檢測(cè)方法提出了嚴(yán)峻的挑戰(zhàn),而傳統(tǒng)的檢測(cè)方法由于在特異性、靈敏度、操作簡(jiǎn)便性、快捷性等方面存在缺陷,難以滿足日益發(fā)展的病原菌快速檢測(cè)的需要。因此發(fā)展病原菌的快速、靈敏和準(zhǔn)確的檢測(cè)方法具有十分重要的意義。納米材料有著獨(dú)特的表面效應(yīng)、小尺寸效應(yīng)、量子尺寸效應(yīng)和宏觀隧道效應(yīng),在其表面進(jìn)行各種修飾獲得的各種功能化納米材料與傳統(tǒng)檢測(cè)方法相結(jié)合,衍生出具有高通量、高靈敏、快速檢測(cè)的方法;核酸探針技術(shù)是目前分子生物學(xué)中應(yīng)用最廣泛的技術(shù)之一,是定性或定量檢測(cè)特異RNA或DNA序列的有力工具。本論文以三種納米粒子和核酸探針技術(shù)為基礎(chǔ),結(jié)合新型的檢測(cè)工具,發(fā)展了新的靈敏度高、特異性好的病原菌及ATP分子檢測(cè)技術(shù)。本論文主要包括以下幾個(gè)研究?jī)?nèi)容: (1)構(gòu)建了基于免疫磁珠(Immunomolecular magnetic beads, IMBs)/表面等離子共振技術(shù)(surface plasmon resonance, SPR)的G群鏈球菌(Group G Strep...

【文章頁數(shù)】:116 頁

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第1章 緒論
    1.1 傳統(tǒng)的病原菌檢測(cè)方法
    1.2 現(xiàn)代病原菌檢測(cè)方法
        1.2.1 以免疫學(xué)為基礎(chǔ)的檢測(cè)技術(shù)
        1.2.2 PCR技術(shù)在病原菌檢測(cè)中的應(yīng)用
        1.2.3 生物傳感器在病原菌檢測(cè)中的應(yīng)用
        1.2.4 基因芯片技術(shù)在病原菌檢測(cè)中的應(yīng)用
        1.2.5 基因探針技術(shù)在病原菌檢測(cè)中的應(yīng)用
    1.3 功能化納米材料在病原菌檢測(cè)中的應(yīng)用
        1.3.1 磁性納米材料在病原菌檢測(cè)中的應(yīng)用
        1.3.2 量子點(diǎn)在病原菌檢測(cè)中的應(yīng)用
        1.3.3 金納米粒子在病原菌檢測(cè)中的應(yīng)用
    1.4 參考文獻(xiàn)
第2章 免疫磁珠在G群鏈球菌快速檢測(cè)中的應(yīng)用研究
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)部分
        2.2.1 三種不同功能基團(tuán)免疫磁珠制備
        2.2.2 免疫磁珠特征分析
        2.2.3 免疫磁珠快速分離鏈球菌
        2.2.4 SPR技術(shù)對(duì)G群鏈球菌菌濃度快速檢測(cè)的初步探討
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 三種功能化免疫磁珠反應(yīng)原理
        2.3.2 三種磁珠表面固定化抗體分子的SDS-PAGE分
        2.3.3 三種功能化磁珠固定人IgG分子的能力
        2.3.4 免疫磁珠對(duì)鏈球菌的分離結(jié)果
        2.3.5 SPR技術(shù)對(duì)G群鏈球菌菌濃度快速檢測(cè)的初步探討
    2.4 結(jié)論
    2.5 參考文獻(xiàn)
第3章 基于核酸適配體—熒光染料EvaGreen TM快速檢測(cè)ATP的研究
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
        3.2.1 材料與試劑
        3.2.2 方法
    3.3 結(jié)果與分析
    3.4 結(jié)論
    3.5 參考文獻(xiàn)
第4章 基于多序列比對(duì)的量子點(diǎn)熒光標(biāo)記探針快速檢測(cè)金黃色葡萄球菌16s rDNA的研究
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)部分
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
        4.2.2 溶液配制
        4.2.3 實(shí)驗(yàn)步驟
    4.3 結(jié)果與討論
    4.4 結(jié)論
    4.5 參考文獻(xiàn)
第5章 核酸適配子修飾的金納米粒子在金黃色葡萄球菌快速檢測(cè)中的應(yīng)用研究
    5.1 引言
    5.2 實(shí)驗(yàn)部分
        5.2.1 材料與方法
        5.2.2 金納米粒子的合成
        5.2.3 金納米粒子表征
        5.2.4 DNA對(duì)金納米粒子的修飾
        5.2.5 金納米粒子對(duì)金黃色葡萄球菌的快速檢測(cè)
    5.3 結(jié)果與分析
        5.3.1 金納米粒子溶液的表征
        5.3.2 金納米粒子溶液的穩(wěn)定性
        5.3.3 金納米粒子探針對(duì)金黃色葡萄球菌的檢測(cè)
    5.4 結(jié)論
    5.5 參考文獻(xiàn)
結(jié)語
本文縮略表
攻讀博士學(xué)位期間發(fā)表(或待發(fā)表)的學(xué)術(shù)論文
致謝



本文編號(hào):3958353

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