EB病毒與多種人類腫瘤相關(guān)，尤其與鼻咽癌密切相關(guān)，但由于缺乏實驗動物學(xué)方面的證據(jù)，EB病毒在鼻咽癌的發(fā)生、發(fā)展中所起的作用一直是研究的熱點。但至今尚未能用EB病毒或其致瘤基因建立鼻咽癌動物模型，分析原因，我們認(rèn)為主要與沒有利用鼻咽組織相對特異性啟動子有關(guān)。為了解決這一問題，本研究利用嗜上皮細(xì)胞特異性啟動子ED-L2，攜帶增強型綠色熒光蛋白報告基因(enhanced green fluorescent protein,EGFP)與EB病毒潛伏膜蛋白(LMP1)，構(gòu)建融合蛋白基因載體。本研究擬分別構(gòu)建ED-L2-EGFP慢病毒表達(dá)載體、ED-L2-N-LMP1-EGFP慢病毒表達(dá)載體、ED-L2-B-LMP1-EGFP慢病毒表達(dá)載體；將EB病毒潛伏膜蛋白(LMP1)與增強型綠色熒光蛋白(EGFP)作為目的基因，通過顯微注射技術(shù)，建立攜帶靶基因的轉(zhuǎn)基因小鼠，為進(jìn)一步建立鼻咽癌動物模型探索新途徑。 研究內(nèi)容及結(jié)果如下： 一、成功構(gòu)建了ED-L2-EGFP慢病毒載體、ED-L2-N-LMP1-EGFP慢病毒載體、ED-L2-B-LMP1-EGFP慢病毒表達(dá)載體 以pED-L2-...

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【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖6:c一FUGW質(zhì)粒PacFBamHI雙酶切鑒定

并切膠回收載體片段，可見8687bP的載體片段及1254bP的泛素啟動子序列。(見圖6)234﹃﹃7s0bP啊250bPl000p激而帥溉師!3l:941哪436232202564圖6:c一FUGW質(zhì)粒PacFBamHI雙酶切鑒定Lanel:HindlllMarkLaneZ:eF....

圖10:ED一LZ幣ue118質(zhì)粒ane:n

lanel:DL2000MarklaneZ:膠回收ED一LZ片段782bP5.ED一L2一puclls載體連接后提取質(zhì)粒1%瓊脂糖凝膠電泳(見圖10)123爵璐溉沖舊416川川322027晰圖10:ED一LZ幣ue118質(zhì)粒lanel:HindlllMark一aneZ:ED一LZ....

圖11:ED一LZ一EorP慢病毒質(zhì)粒

6.重組載體質(zhì)粒(9469bP)1%瓊脂糖凝膠電泳。(見圖11)2345珊撒s64bP圖11:ED一LZ一EorP慢病毒質(zhì)粒lanel:HindlllMarklaneZ，3，4，5:Eo一LZ一EJP慢病毒質(zhì)粒9469飾7.測序驗證ED一LZ啟動子(見圖12)圖12:ED一LZ啟....

圖12:ED一LZ啟動子序列測序結(jié)果

lanel:HindlllMarklaneZ，3，4，5:Eo一LZ一EJP慢病毒質(zhì)粒9469飾7.測序驗證ED一LZ啟動子(見圖12)圖12:ED一LZ啟動子序列測序結(jié)果25

本文編號：3946935