胚胎神經(jīng)祖細胞的永生化及其特性鑒定與功能研究
發(fā)布時間:2024-01-08 18:38
目的:中樞神經(jīng)系統(tǒng)再生困難是由于神經(jīng)再生的不利環(huán)境因素,以及通常認為神經(jīng)細胞不能進行再分裂和增殖的終末分化細胞。神經(jīng)干細胞可以自我更新及復制分裂,被認為能夠替換與治療多種神經(jīng)系統(tǒng)疾病,它們的一系列潛在價值在最近才被發(fā)現(xiàn),神經(jīng)干細胞具有高度的遷移性并能夠被吸引并移至病變大腦側(cè)如缺血或腫瘤的病變部位,從而它成為非常有治療前景的工具。 本研究擬采用逆轉(zhuǎn)錄病毒將攜帶Cre-LoxP系統(tǒng)的SV40-T基因外源性導入胚胎小鼠神經(jīng)干細胞制備永生化胚胎神經(jīng)干/祖細胞系。使用神經(jīng)干/祖細胞特異性標記物鑒定永生化神經(jīng)祖細胞的干/祖細胞表型,及具有多向分化潛能的可能性。另外,實驗擬證明使用Cre重組酶敲除SV40-T基因可逆轉(zhuǎn)永生化神經(jīng)干細胞增殖特性,使其成為原代細胞從而具有向不同神經(jīng)細胞分化的能力。同時運用在體研究證實永生化的神經(jīng)干細胞有別于腫瘤細胞,不具有侵襲性。進一步證實其具有廣泛的臨床及科研利用價值,為中樞神經(jīng)系統(tǒng)再生和功能恢復提供了新的手段。 方法:第一部分:孕12.5天和14天CD1小鼠各1只,從孕鼠子宮中取出12.5天及14天胚胎。解剖顯微鏡下分離胎鼠端腦組織,胰酶消化為單細胞懸液,采用神經(jīng)球...
【文章頁數(shù)】:90 頁
【學位級別】:博士
【文章目錄】:
目錄
英漢縮略語名詞對照
摘要
ABSTRACT
前言
第一部分:小鼠胚胎大腦神經(jīng)干細胞的分離培養(yǎng)及永生化神經(jīng)祖細胞的建立
1 材料與方法
2 實驗結(jié)果
3 討論
第二部分:永生化胚鼠神經(jīng)祖細胞的鑒定與分化
1 材料與方法
2 實驗結(jié)果
3 討論
全文小結(jié)
參考文獻
文獻綜述
參考文獻
致謝
博士期間發(fā)表論文
本文編號:3877457
【文章頁數(shù)】:90 頁
【學位級別】:博士
【文章目錄】:
目錄
英漢縮略語名詞對照
摘要
ABSTRACT
前言
第一部分:小鼠胚胎大腦神經(jīng)干細胞的分離培養(yǎng)及永生化神經(jīng)祖細胞的建立
1 材料與方法
2 實驗結(jié)果
3 討論
第二部分:永生化胚鼠神經(jīng)祖細胞的鑒定與分化
1 材料與方法
2 實驗結(jié)果
3 討論
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文獻綜述
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