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VEGF、Ang-1/Ang-2促進(jìn)CNV分化成熟的作用及機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2023-06-02 01:38
  目的:研究VEGF、Ang-1/Ang-2三種細(xì)胞因子對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的分化及成熟的影響,及其對(duì)CNV分化以及成熟過程影響的作用機(jī)制。 方法:在培養(yǎng)大鼠臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)加入VEGF、Ang-1/Ang-2因子后,劃痕實(shí)驗(yàn)和MTT檢測(cè)對(duì)細(xì)胞遷移與增殖的影響,觀察內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)、活性、遷移能力,通過掃描、透射電鏡觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)、細(xì)胞間連接的改變;采用激光光凝誘導(dǎo)建立大鼠CNV動(dòng)物模型后,分別玻璃體腔注射VEGF、Ang-1/Ang-2,通過其眼底熒光造影與病理切片的變化觀察上述因子的作用。 結(jié)果:劃痕實(shí)驗(yàn)顯示僅有VEGF時(shí),與空白對(duì)照組細(xì)胞遷移無明顯差異,僅有Ang-1存在時(shí),不僅不能增加RUVEC細(xì)胞的遷移作用,反較空白對(duì)照組有所減弱,僅Ang-2單獨(dú)作用時(shí)RUVEC遷移較對(duì)照組明顯增強(qiáng),當(dāng)VEGF與Ang-1或Ang-2聯(lián)合作用時(shí),RUVEC遷移較對(duì)照組明顯增強(qiáng);MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:?jiǎn)渭兗尤隫EGF或Ang-1或Ang-2的任何一種因子,都不能起到有效促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖的作用;聯(lián)合應(yīng)用VEGF+Ang-1/VEGF+Ang-2可有效促進(jìn)增殖,提高Ang1或Ang2的濃度,效果傾向于更明顯,...

【文章頁數(shù)】:95 頁

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【文章目錄】:
提要
Abstract
引言
第一部分 細(xì)胞培養(yǎng)與因子作用觀察
    實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果
        一、劃痕法測(cè)定細(xì)胞遷移能力
            (一) 材料與方法
            (二) 結(jié)果
        二、MTT法測(cè)定細(xì)胞增殖
            (一) MTT法測(cè)定細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)中不同濃度因子的篩選
            (二) MTT法測(cè)定細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)
        三、透射電鏡觀察細(xì)胞形態(tài)
            (一) 取材與方法
            (二) 結(jié)果
    分析
    結(jié)論
第二部分 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
    材料與方法
        一、實(shí)驗(yàn)材料
            (一) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
            (二) 主要試劑及儀器
        二、實(shí)驗(yàn)方法
            (一) CNV動(dòng)物模型的制作
            (二) 血管生成素-1對(duì)CNV的抑制作用的評(píng)估
            (三) 血管生成素-1對(duì)視網(wǎng)膜毒性的評(píng)估
            (四) 血管生成素-1對(duì)已形成的CNV的作用的評(píng)估
            (五) 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        一、血管生成素-1對(duì)激光誘導(dǎo)的鼠CNV形成的抑制作用
            (一) CNV的發(fā)生率
            (二) CNV的眼底血管造影結(jié)果
        二、玻璃體注射血管生成素-1對(duì)視網(wǎng)膜毒性作用
            (一) 視網(wǎng)膜電圖
            (二) 視網(wǎng)膜組織切片HE染色結(jié)果顯示
        三、血管生成素-1對(duì)已形成的CNV的作用
            (一) FFA結(jié)果顯示
            (二) 組織病理切片照片
    分析
        一、血管生成素-1對(duì)激光誘導(dǎo)的鼠CNV的抑制作用
        二、玻璃體注射血管生成素-1對(duì)視網(wǎng)膜毒性作用
        三、血管生成素-1對(duì)已形成的CNV的作用
結(jié)論
結(jié)語
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
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本文編號(hào):3827416

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