目的：研究VEGF、Ang-1/Ang-2三種細(xì)胞因子對血管內(nèi)皮細(xì)胞的分化及成熟的影響,及其對CNV分化以及成熟過程影響的作用機制。 方法：在培養(yǎng)大鼠臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)加入VEGF、Ang-1/Ang-2因子后,劃痕實驗和MTT檢測對細(xì)胞遷移與增殖的影響,觀察內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)、活性、遷移能力,通過掃描、透射電鏡觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)、細(xì)胞間連接的改變；采用激光光凝誘導(dǎo)建立大鼠CNV動物模型后,分別玻璃體腔注射VEGF、Ang-1/Ang-2,通過其眼底熒光造影與病理切片的變化觀察上述因子的作用。 結(jié)果：劃痕實驗顯示僅有VEGF時,與空白對照組細(xì)胞遷移無明顯差異,僅有Ang-1存在時,不僅不能增加RUVEC細(xì)胞的遷移作用,反較空白對照組有所減弱,僅Ang-2單獨作用時RUVEC遷移較對照組明顯增強,當(dāng)VEGF與Ang-1或Ang-2聯(lián)合作用時,RUVEC遷移較對照組明顯增強；MTT實驗結(jié)果表明：單純加入VEGF或Ang-1或Ang-2的任何一種因子,都不能起到有效促進內(nèi)皮細(xì)胞增殖的作用；聯(lián)合應(yīng)用VEGF+Ang-1/VEGF+Ang-2可有效促進增殖,提高Ang1或Ang2的濃度,效果傾向于更明顯,...

【文章頁數(shù)】：95 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
提要
Abstract
引言
第一部分 細(xì)胞培養(yǎng)與因子作用觀察
    實驗方法與結(jié)果
        一、劃痕法測定細(xì)胞遷移能力
            (一) 材料與方法
            (二) 結(jié)果
        二、MTT法測定細(xì)胞增殖
            (一) MTT法測定細(xì)胞增殖實驗中不同濃度因子的篩選
            (二) MTT法測定細(xì)胞增殖實驗
        三、透射電鏡觀察細(xì)胞形態(tài)
            (一) 取材與方法
            (二) 結(jié)果
    分析
    結(jié)論
第二部分 動物實驗
    材料與方法
        一、實驗材料
            (一) 實驗動物
            (二) 主要試劑及儀器
        二、實驗方法
            (一) CNV動物模型的制作
            (二) 血管生成素-1對CNV的抑制作用的評估
            (三) 血管生成素-1對視網(wǎng)膜毒性的評估
            (四) 血管生成素-1對已形成的CNV的作用的評估
            (五) 統(tǒng)計學(xué)分析
    實驗結(jié)果
        一、血管生成素-1對激光誘導(dǎo)的鼠CNV形成的抑制作用
            (一) CNV的發(fā)生率
            (二) CNV的眼底血管造影結(jié)果
        二、玻璃體注射血管生成素-1對視網(wǎng)膜毒性作用
            (一) 視網(wǎng)膜電圖
            (二) 視網(wǎng)膜組織切片HE染色結(jié)果顯示
        三、血管生成素-1對已形成的CNV的作用
            (一) FFA結(jié)果顯示
            (二) 組織病理切片照片
    分析
        一、血管生成素-1對激光誘導(dǎo)的鼠CNV的抑制作用
        二、玻璃體注射血管生成素-1對視網(wǎng)膜毒性作用
        三、血管生成素-1對已形成的CNV的作用
結(jié)論
結(jié)語
參考文獻
附錄
致謝
查新報告
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本文編號：3827416