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三種用于透明質(zhì)酸檢測的融合蛋白的構(gòu)建表達及檢測效果比較

發(fā)布時間:2023-05-03 22:21
  透明質(zhì)酸是一種長鏈大分子糖胺聚糖,存在于各組織器官中,是細胞外基質(zhì)的重要組成部分.透明質(zhì)酸不僅能夠與其他胞外多糖及蛋白構(gòu)成骨架,參與組織器官的結(jié)構(gòu)形成,也可以與細胞表面相關(guān)蛋白受體相互作用,通過相關(guān)信號通路影響細胞的生存、增殖以及遷移.研究證實,透明質(zhì)酸與腫瘤細胞的生存、遷移,腫瘤血管發(fā)生等均有密切關(guān)系,組織中透明質(zhì)酸含量的變化也與某些病理狀況如慢性炎癥相關(guān).因此,細胞表面或組織中的透明質(zhì)酸含量的定量檢測,對于疾病的診斷及預后都具有重要意義.目前透明質(zhì)酸的檢測方法主要依靠抗體,通過酶聯(lián)免疫檢測體液中的透明質(zhì)酸,而缺乏在細胞或組織水平上檢測透明質(zhì)酸的手段.本研究將三種人源的透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(P32,CDC37以及RHAMM)與綠色熒光蛋白(EGFP)進行融合,在大腸桿菌中進行可溶性表達,經(jīng)親和純化,獲得了三種能夠與透明質(zhì)酸結(jié)合的蛋白探針.通過在溶液與細胞水平上比較與透明質(zhì)酸結(jié)合的能力,從中篩選出了最適合用來進行透明質(zhì)酸檢測的熒光蛋白探針RHC-EGFP.

【文章頁數(shù)】:7 頁

【文章目錄】:
1材料與方法
2結(jié)果
3討論



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