本文關(guān)鍵詞：三帶喙庫(kù)蚊對(duì)重要?dú)⑾x(chóng)劑靶標(biāo)抗性及其對(duì)乙腦病毒易感性研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：三帶喙庫(kù)蚊（Culex tritaeniorhynchus）是我國(guó)流行性乙型腦炎（Japanese Bencephalitis，乙腦）的主要傳播媒介。其孳生地多為稻田，廣泛接觸農(nóng)業(yè)用殺蟲(chóng)劑，由于殺蟲(chóng)劑的連續(xù)大量使用加之蚊蟲(chóng)世代歷期短、繁殖力強(qiáng)等因素，導(dǎo)致了三帶喙庫(kù)蚊抗藥性的發(fā)生和發(fā)展。目前我國(guó)不同地區(qū)三帶喙庫(kù)蚊已經(jīng)對(duì)多種殺蟲(chóng)劑產(chǎn)生了不同程度的抗性，因此迫切需要對(duì)殺蟲(chóng)劑抗性的發(fā)生和發(fā)展進(jìn)行深入研究。蚊蟲(chóng)產(chǎn)生抗藥性的同時(shí)，往往伴隨著某些生理生化功能的改變，而蚊蟲(chóng)生理生化功能的改變會(huì)影響蟲(chóng)媒病毒在其體內(nèi)的增殖發(fā)育，最終影響蚊蟲(chóng)對(duì)疾病的傳播。本研究以野外采集的三帶喙庫(kù)蚊種群為研究對(duì)象，測(cè)定其生物抗性，并對(duì)其靶標(biāo)基因（鈉離子通道基因和乙酰膽堿酯酶基因）進(jìn)行研究，分析基因頻率與生物抗性之間的相關(guān)性，了解三帶喙庫(kù)蚊種群Kdr和AChE抗性基因頻率的現(xiàn)狀并推測(cè)抗性發(fā)展趨勢(shì)。另外還對(duì)不同種群三帶喙庫(kù)蚊進(jìn)行經(jīng)口感染乙腦病毒，并測(cè)定各感染種群對(duì)溴氰菊酯和高效氯氰菊酯的抗性水平，分析抗性水平與感染率之間的相關(guān)性，初步探索抗性對(duì)于媒介蚊蟲(chóng)易感性的影響。 本研究結(jié)果如下： 1．三帶喙庫(kù)蚊自然種群抗性水平檢測(cè)結(jié)果 幼蟲(chóng)抗性檢測(cè)結(jié)果顯示：各自然種群三帶喙庫(kù)蚊幼蟲(chóng)對(duì)常用的5種殺蟲(chóng)劑產(chǎn)生了不同程度的抗性。對(duì)溴氰菊酯、高效氯氰菊酯、氯菊酯、敵敵畏和殘殺威的抗藥性指數(shù)分別為：（1.70-103.93）、（7.83-65.81）、（3.54-75.70）、（291.85-530.89）和（51.32至108.83）倍。成蟲(chóng)抗性檢測(cè)結(jié)果顯示：6個(gè)自然種群成蚊對(duì)溴氰菊酯（0.025%）的KT50值為36.99至89.96min，1小時(shí)擊倒率為16.67%至66.33%，24小時(shí)死亡率為5.17%至75.25%；4個(gè)三帶喙庫(kù)蚊種群對(duì)氯菊酯（0.5%）的KT50值為6.63至160.37min，3小時(shí)擊倒率為51.92%至100.00%，24小時(shí)死亡率為15.38%至91.30%。 2．三帶喙庫(kù)蚊擊倒抗性的研究 通過(guò)克隆測(cè)序獲得敏感和抗性三帶喙庫(kù)蚊鈉通道ⅡS4-ⅡS6區(qū)段部分cDNA序列，該序列長(zhǎng)度為360bp，包含L1014(Kdr)突變位點(diǎn)，編碼120個(gè)氨基酸殘基。敏感序列Genbank登錄號(hào)為：KC878694。與敏感個(gè)體相比，抗性個(gè)體鈉通道ⅡS4-ⅡS6區(qū)段cDNA序列1014位點(diǎn)堿基“A”突變?yōu)椤癟”，導(dǎo)致相應(yīng)位置亮氨酸（L）突變?yōu)楸奖彼幔‵）。不同地理種群的三帶喙庫(kù)蚊鈉通道內(nèi)含子長(zhǎng)度和堿基組成具有多態(tài)性。 3三帶喙庫(kù)蚊kdr基因頻率與抗性水平的相關(guān)性分析 各個(gè)自然種群kdr基因頻率在10.00%至39.55%�？剐约兒献樱≧R）在部分種群未檢測(cè)出，其余種群抗性純合子（RR）個(gè)體在檢測(cè)樣本中所占比例為（2.86-10.00%）；敏感純合子（SS）為（50.00-80.00%）；雜合子（RS）為（17.65-50.00%）。三帶喙庫(kù)蚊種群幼蟲(chóng)對(duì)3種擬除蟲(chóng)菊酯類殺蟲(chóng)劑的致死中濃度（LC50）與Kdr基因頻率有一定的相關(guān)性。對(duì)溴氰菊酯、高效氯氰菊酯和氯菊酯半數(shù)致死濃度（LC50）與kdr基因頻率之間的相關(guān)系數(shù)分別為0.7150、0.6874和0.4280，P值都小于0.05。提示kdr等位基因突變（L1014F）可以作為三帶喙庫(kù)蚊對(duì)擬除蟲(chóng)菊酯類殺蟲(chóng)劑抗性的分子標(biāo)記。 4三帶喙庫(kù)蚊乙酰膽堿酯酶(AChE)基因與抗性水平的相關(guān)性分析 RT-PCR法獲得AChE基因部分cDNA序列，，長(zhǎng)709bp�？剐云废礎(chǔ)ChE基因片段第250-251號(hào)堿基“TT”突變?yōu)椤癎G”，突變導(dǎo)致相應(yīng)位置氨基酸由苯丙氨酸（F）突變?yōu)樯彼幔╓）發(fā)生變化，即F455W突變。AChE基因頻率的檢測(cè)結(jié)果顯示：所有檢測(cè)樣本AChE基因型都為抗性純合子（RR），AChE基因頻率都為100%。提示該等位基因突變（F455W）已經(jīng)不可以作為三帶喙庫(kù)蚊對(duì)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類殺蟲(chóng)劑抗性的分子標(biāo)記。 5三帶喙庫(kù)蚊對(duì)乙腦病毒易感性與其抗性水平的相關(guān)性分析 三帶喙庫(kù)蚊實(shí)驗(yàn)室品系、南京江浦種群F1、濉溪南坪種群F1代、安康建民種群F1代和F3代對(duì)乙腦病毒感染率分別為84.44%、80.56%、62.5%、86.00%和91.89%。三帶喙庫(kù)蚊對(duì)乙腦病毒的感染率與其對(duì)溴氰菊酯和高效氯氰菊酯的抗性指數(shù)之間均有線性負(fù)相關(guān)關(guān)系（R~2值分別為0.887和0.783,P值分別為0.0167和0.0460）。表明三帶喙庫(kù)蚊在殺蟲(chóng)劑的選擇壓力下，可能會(huì)影響其對(duì)乙腦病毒易感性，但這種影響的機(jī)制尚待進(jìn)一步研究。
【關(guān)鍵詞】：三帶喙庫(kù)蚊 鈉離子通道 抗性 乙型腦炎病毒 易感性
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R384.1
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• Abstract7-10
• 1 前言10-13
• 2 材料與方法13-29
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料13-17
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法17-29
• 3 結(jié)果29-58
• 3.1 三帶喙庫(kù)蚊對(duì)常用殺蟲(chóng)劑抗性的生物測(cè)定29-36
• 3.2 三帶喙庫(kù)蚊抗性靶標(biāo)鈉離子通道基因研究36-51
• 3.3 三帶喙庫(kù)蚊抗性靶標(biāo)乙酰膽堿酯酶基因研究51-54
• 3.4 三帶喙庫(kù)蚊對(duì)乙腦病毒易感性研究54-58
• 4 討論58-63
• 5 結(jié)論63-64
• 參考文獻(xiàn)64-68
• 綜述68-77
• 參考文獻(xiàn)74-77
• 發(fā)表論文77-86
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷86-87
• 致謝87-88

【共引文獻(xiàn)】

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3 徐齊云;水克娟;羅建軍;翁群芳;鐘國(guó)華;;昆蟲(chóng)鈉離子通道與擊倒抗性研究進(jìn)展[A];科技創(chuàng)新與綠色植�！袊�(guó)植物保護(hù)學(xué)會(huì)2006學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2006年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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3 王建軍;小菜蛾P(guān)lutella xylostella （L.）殺蟲(chóng)劑靶標(biāo)抗性的分子生物學(xué)研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2001年

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6 賀艷萍;中國(guó)重要蝗區(qū)東亞飛蝗有機(jī)磷殺蟲(chóng)劑抗性生化機(jī)制研究[D];山西大學(xué);2004年

7 李飛;棉蚜的殺蟲(chóng)劑神經(jīng)靶標(biāo)分子生物學(xué)研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2003年

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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7 段辛樂(lè);二斑葉螨對(duì)甲氰菊酯和螺螨酯的抗性機(jī)理及兩種藥劑的亞致死效應(yīng)研究[D];甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

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10 林凡旭;家蠅抗藥性治理策略及其酶學(xué)性質(zhì)的研究[D];福建農(nóng)林大學(xué);2003年

  本文關(guān)鍵詞：三帶喙庫(kù)蚊對(duì)重要?dú)⑾x(chóng)劑靶標(biāo)抗性及其對(duì)乙腦病毒易感性研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：374752