Mac-1（CD11b/CD18）為位于白細(xì)胞表面的整合素家族粘附分子之一，它是白細(xì)胞游走、趨化、吞噬的基礎(chǔ)，在機(jī)體防御作用及免疫反應(yīng)過程中起著極為重要的作用。然而，迄今為止，盡管白細(xì)胞活化后Mac-1如何參與粘附的研究已相當(dāng)深入，但關(guān)于Mac-1在白細(xì)胞脫粘附中的作用及其機(jī)制則研究得還很少；對于Mac-1的貯存、轉(zhuǎn)位、變構(gòu)的過程，尚缺乏在一個(gè)細(xì)胞對其全過程進(jìn)行動(dòng)態(tài)定位定量的研究；對不同的激動(dòng)劑引起的Mac-1的活化過程，還只是一個(gè)統(tǒng)一的籠統(tǒng)的模式。為此，本課題擬對Mac-1在細(xì)胞內(nèi)的走向進(jìn)行研究。 以往文獻(xiàn)上研究Mac-1的貯存、轉(zhuǎn)位以及內(nèi)吞的方法，主要采用的是抗體標(biāo)記Mac-1，用流式細(xì)胞術(shù)測定或免疫組化技術(shù)顯微鏡下直接觀察Mac-1的細(xì)胞內(nèi)分布，但其缺點(diǎn)是不可能在單細(xì)胞、活細(xì)胞連續(xù)地觀察，如果要研究在細(xì)胞內(nèi)的走向則還需要使細(xì)胞表面通透性增高（permeabilize）,這就難免干擾了細(xì)胞的靜態(tài)及生理過程。我們決定嘗試采用綠色熒光蛋白（GFP）標(biāo)記Mac-1形成融合蛋白的方法，研究其細(xì)胞內(nèi)定位和細(xì)胞內(nèi)的走向。 首先，為了更全面更明確地了解Ma... 

【文章頁數(shù)】：93 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
縮略語表
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 Mac-1－FP融合蛋白的構(gòu)建、表達(dá)與鑒定
    實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
    一、 Mac-1－FP融合基因的構(gòu)建
        1、 材料與方法
        2、 結(jié)果與討論
    二、 Mac-1－FP在細(xì)胞株中的表達(dá)與鑒定
        （一） CD11b-BFP、YFP-CD18在U937細(xì)胞株中的表達(dá)與鑒定
            1、 材料與方法
            2、 結(jié)果與討論
        （二） CD11b-BFP、YFP-CD18在CHO細(xì)胞株中的表達(dá)與鑒定
            1、 材料與方法
            2、 結(jié)果與討論
    結(jié)論與展望
第二部分 PMA和ICAM-1作用后Mac-1－FP融合蛋白在細(xì)胞內(nèi)走向的探討
    概述
    一、 材料與方法
    二、 結(jié)果
        （一） PMA活化前后Mac-1-FP的變化
            1、 免疫組化實(shí)驗(yàn)結(jié)果
            2、 激光共聚焦顯微鏡觀測結(jié)果
        （二） Mac-1-FP與ICAM-1包被磁珠結(jié)合后的變化
            1、 ICAM-1包被磁珠與Mac-1-FP-CHO細(xì)胞粘附結(jié)果
            2、 激光共聚焦顯微鏡觀測
    三、 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]山莨菪堿（654-2）抗休克作用的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 陳祥銀,嚴(yán)儀昭,西品香.  中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào). 1987(04)



本文編號：3712803