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電擊介導(dǎo)和Sleeping Beauty轉(zhuǎn)座子介導(dǎo)的人凝血因子Ⅸ基因表達(dá)研究

發(fā)布時(shí)間:2022-08-12 15:05
  (一)小鼠肌肉中以電擊介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移和表達(dá)為了探討如何提高人凝血因子IX cDNA肌肉轉(zhuǎn)移和表達(dá),我們采用低頻脈沖、中等電壓電場(chǎng)促進(jìn)Lac-Z表達(dá)質(zhì)粒pCMVβ和hFIX表達(dá)質(zhì)粒pCMV-hFIX肌肉轉(zhuǎn)移和表達(dá)。電擊組hFIX最高表達(dá)量在小鼠血漿中的表達(dá)量為40±5.4ng/ml,是非電擊組小鼠5.6±2.3ng/ml的4倍多。結(jié)果顯示電擊可以顯著提高h(yuǎn)FIX基因的肌肉轉(zhuǎn)移和表達(dá)。(二)Sleeping Beauty(SB)轉(zhuǎn)座子介導(dǎo)的hFIX基因表達(dá)研究將表達(dá)hFIX的Sleeping Beauty轉(zhuǎn)座子載體pSB-hFIX和pCMV-SB10(表達(dá)轉(zhuǎn)座酶)用尾靜脈液壓法共同注射到小鼠體內(nèi)。探索了不同比例、濃度的pSB-hFIX和pCMV-SB10對(duì)表達(dá)的影響以優(yōu)化hFIX表達(dá)。小鼠體內(nèi)hFIX表達(dá)時(shí)間超過(guò)4個(gè)月,最高表達(dá)量達(dá)到6475.6±278.1ng/mL。結(jié)果顯示,能夠通過(guò)使用SB轉(zhuǎn)座子系統(tǒng)獲得hFIX的長(zhǎng)期和高效表達(dá)。 

【文章頁(yè)數(shù)】:52 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【文章目錄】:
中文摘要
英文摘要
縮寫詞
第一部分
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第二部分
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    小結(jié)
第三部分 (綜述)
致謝
在學(xué)期間發(fā)表論文


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]人類巨細(xì)胞病毒啟動(dòng)子控制的人Ⅸ因子cDNA在人體細(xì)胞中的高效表達(dá)[J]. 王平,戴一凡,邱信芳,薛京倫.  科學(xué)通報(bào). 1991(13)



本文編號(hào):3676096

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