本文關(guān)鍵詞：重組人生長(zhǎng)激素促進(jìn)頜骨缺損修復(fù)的實(shí)驗(yàn)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的： 腫瘤、外傷、炎癥以及先天性因素等各種各樣的原因均可以造成不同程度的頜骨缺損，進(jìn)而導(dǎo)致患者喪失了咀嚼、語(yǔ)言功能，影響義齒的修復(fù)和患者的生活質(zhì)量。目前如何通過(guò)促進(jìn)骨組織的形成來(lái)修復(fù)頜骨缺損是研究的難點(diǎn)和熱點(diǎn)問(wèn)題。1958年人們發(fā)現(xiàn)可以將人生長(zhǎng)激素(human growth hormone, hGH)用于治療侏儒癥，但是由于當(dāng)時(shí)僅僅能夠從尸體的腦垂體中提取出人生長(zhǎng)激素，數(shù)量有限，難以保證臨床用量，而限制了其應(yīng)用。1986年波耶爾通過(guò)基因重組的技術(shù)成功的合成了重組人生長(zhǎng)激素(recombinant human growth hormone, rhGH)，其結(jié)構(gòu)與人垂體分泌的生長(zhǎng)激素完全相同，這樣便實(shí)現(xiàn)了重組人生長(zhǎng)激素的大規(guī)模生產(chǎn)和應(yīng)用。重組人生長(zhǎng)激素經(jīng)皮下注射具有促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育、促進(jìn)創(chuàng)面愈合的作用；在臨床上已經(jīng)廣泛應(yīng)用于預(yù)防和治療因生長(zhǎng)激素缺乏導(dǎo)致的兒童生長(zhǎng)發(fā)育遲緩、呆小癥、老年人免疫功能的低下、手術(shù)或燒傷患者的創(chuàng)面愈合遲緩等。成骨細(xì)胞表面能夠表達(dá)生長(zhǎng)激素受體，有學(xué)者據(jù)此推測(cè)重組人生長(zhǎng)激素可能通過(guò)調(diào)節(jié)成骨細(xì)胞表面受體的表達(dá)來(lái)影響成骨細(xì)胞的成骨和破骨功能，進(jìn)而參與骨重建。從而對(duì)此展開(kāi)研究，研究發(fā)現(xiàn)重組人生長(zhǎng)激素具有體外促進(jìn)成骨細(xì)胞的增殖和提高堿性磷酸酶活性的作用，對(duì)成骨細(xì)胞的合成代謝有直接的影響。本實(shí)驗(yàn)將重組人生長(zhǎng)激素應(yīng)用于頜骨缺損的大鼠模型，通過(guò)大體標(biāo)本肉眼觀察、組織形態(tài)學(xué)檢測(cè)以及血清學(xué)研究，旨在判斷重組人生長(zhǎng)激素對(duì)成骨細(xì)胞活性的影響，進(jìn)而推測(cè)重組人生長(zhǎng)激素在頜骨缺損修復(fù)過(guò)程中的作用，為重組人生長(zhǎng)激素將來(lái)能夠應(yīng)用于口腔領(lǐng)域促進(jìn)頜骨成骨提供理論依據(jù)；同時(shí)通過(guò)比較腹部皮下用藥與缺損區(qū)域局部用藥的差異，確定重組人生長(zhǎng)激素的最佳給藥途徑。 材料和方法： 本研究主要通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及血清學(xué)研究實(shí)現(xiàn)。實(shí)驗(yàn)主要分為三個(gè)部分：下頜骨部分缺損模型的建立，應(yīng)用重組人生長(zhǎng)激素注射，檢測(cè)成骨相關(guān)的指標(biāo)。以60只雄性Wistar大鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象隨機(jī)建立雙側(cè)下頜骨缺損模型，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)1組24只、實(shí)驗(yàn)2組24只。實(shí)驗(yàn)1組缺損區(qū)局部注射重組人生長(zhǎng)激素，實(shí)驗(yàn)2組腹部皮下注射等量重組人生長(zhǎng)激素。另設(shè)12只為對(duì)照組，對(duì)照組局部注射等體積生理鹽水。分別于給藥結(jié)束后2周、4周、6周隨機(jī)抽取實(shí)驗(yàn)1組8只，實(shí)驗(yàn)2組8只，對(duì)照組4只處死，測(cè)定相應(yīng)的成骨指標(biāo)。 一般狀況及大體標(biāo)本肉眼觀察：術(shù)后觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的一般情況，包括毛色、進(jìn)食、體重以及活動(dòng)的狀況；創(chuàng)口是否紅腫，有無(wú)溢膿、竇道出現(xiàn)；有無(wú)繼發(fā)性骨折。肉眼觀察大體標(biāo)本炎癥狀況，軟組織附著情況，缺損區(qū)骨生長(zhǎng)情況：包括缺損區(qū)域的大小、新生骨的顏色、排列及骨質(zhì)致密程度。組織學(xué)光鏡下觀察骨缺損區(qū)新骨生長(zhǎng)情況，纖維組織長(zhǎng)入情況，骨缺損區(qū)周?chē)袩o(wú)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，骨小梁排列情況，新骨成熟程度等。血清中堿性磷酸酶活性檢測(cè)。 結(jié)合肉眼觀察、組織形態(tài)學(xué)觀察及血清中堿性磷酸酶活性檢測(cè)結(jié)果，評(píng)價(jià)重組人生長(zhǎng)激素對(duì)于頜骨缺損修復(fù)是否具有促進(jìn)作用。 結(jié)果： 一般狀況:術(shù)后所有大鼠生命體征平穩(wěn)，毛色及活動(dòng)基本正常。術(shù)后當(dāng)日即可進(jìn)少量的食物，術(shù)后的第2天進(jìn)食及活動(dòng)恢復(fù)正常；手術(shù)創(chuàng)口愈合良好，未見(jiàn)明顯紅腫、化膿，術(shù)后1周左右大部分縫線自行脫落；動(dòng)物均存活至取材的時(shí)間，這期間下頜術(shù)區(qū)未見(jiàn)明顯紅腫等炎性反應(yīng)。 肉眼觀察：給藥結(jié)束后第2周末：局部炎癥反應(yīng)不明顯，骨缺損區(qū)范圍減小不明顯，實(shí)驗(yàn)1組與實(shí)驗(yàn)2組無(wú)明顯差異，同期對(duì)照組無(wú)明顯變化。給藥結(jié)束后第4周末：實(shí)驗(yàn)1組與實(shí)驗(yàn)2組缺損區(qū)范圍均較給藥結(jié)束后第2周末明顯減小，可見(jiàn)明顯新生骨，色白，微透明，質(zhì)地較韌，探針不易探入。對(duì)照組缺損區(qū)減小不明顯。給藥結(jié)束后第6周末：實(shí)驗(yàn)1組缺損區(qū)被大量新生骨所充填，形態(tài)不規(guī)則，表面不平整，質(zhì)地較硬，探針不能探入，中央覆蓋少量軟組織，，邊緣為硬組織；實(shí)驗(yàn)2組與實(shí)驗(yàn)1組無(wú)明顯差異；對(duì)照組缺損區(qū)范圍有所減小，周?chē)梢?jiàn)少量新生骨。 組織形態(tài)學(xué)觀察：HE染色鏡下觀察，給藥結(jié)束后第2周末：實(shí)驗(yàn)1組骨缺損區(qū)明顯可見(jiàn)，邊緣可見(jiàn)新骨形成，大量纖細(xì)的骨小梁，大致呈網(wǎng)狀，排列紊亂，成骨細(xì)胞形態(tài)典型，可見(jiàn)少量巨噬細(xì)胞。高倍鏡下靠近缺損邊緣處，成骨細(xì)胞分化明顯，但數(shù)目較少；實(shí)驗(yàn)2組與實(shí)驗(yàn)1組差異不明顯；對(duì)照組缺損清晰可見(jiàn)，缺損區(qū)邊緣成骨較少，偶見(jiàn)新生骨小梁。給藥結(jié)束后第4周末：實(shí)驗(yàn)1組骨缺損區(qū)邊緣可見(jiàn)大量的新生骨，新生骨主要為骨小梁，增粗、成團(tuán)的骨小梁排列紊亂，骨小梁內(nèi)部有骨細(xì)胞的形成，存在于骨陷窩內(nèi)，骨小梁的周邊有成排的成骨細(xì)胞；實(shí)驗(yàn)2組與實(shí)驗(yàn)1組差異不明顯；對(duì)照組骨缺損區(qū)邊緣有新骨形成，新生骨小梁數(shù)量少，分布較為分散。給藥結(jié)束后第6周末：實(shí)驗(yàn)1組骨缺損區(qū)中央大部分被新生骨充填，可見(jiàn)大范圍的新生骨，新生骨小梁進(jìn)一步增粗、成團(tuán)，骨基質(zhì)樣團(tuán)塊組織形成，其間骨小梁形態(tài)不明顯，可見(jiàn)部分骨陷窩內(nèi)出現(xiàn)骨細(xì)胞，成骨細(xì)胞形態(tài)典型；實(shí)驗(yàn)2組：與實(shí)驗(yàn)1組差異不明顯；對(duì)照組：缺損區(qū)邊緣可見(jiàn)大量新生骨，骨小梁成團(tuán)塊狀，排列紊亂，與正常骨組織界限清楚。 血清中堿性磷酸酶活性檢測(cè)：給藥結(jié)束后第2周，4周各實(shí)驗(yàn)組均明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；6周時(shí)各實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組之間沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。各組給藥結(jié)束后第4、6周較第2周下降，各組內(nèi)不同時(shí)間點(diǎn)血清ALP值比較均有顯著性意義(P=0.00)，表明各時(shí)間點(diǎn)間成骨不同，早期成骨活躍。 結(jié)論： 一、rhGH通過(guò)增強(qiáng)成骨細(xì)胞活性，使骨缺損區(qū)成骨活躍，促進(jìn)新骨成熟，在頜骨缺損修復(fù)過(guò)程中具有促進(jìn)成骨的作用。 二、rhGH經(jīng)局部注射在用藥早期效果優(yōu)于腹部皮下注射。
【關(guān)鍵詞】：重組人生長(zhǎng)激素 頜骨缺損 骨組織再生
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類(lèi)號(hào)】：R782.4;R-332
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• Abstract7-14
• 第1章 前言14-17
• 第2章 材料和方法17-22
• 2.1 材料17-18
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物17
• 2.1.2 主要儀器設(shè)備17
• 2.1.3 材料、試劑和藥物17-18
• 2.2 方法18-22
• 2.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇和分組18
• 2.2.2 取血18
• 2.2.3 頜骨缺損模型的制備18-19
• 2.2.4 動(dòng)物處死及標(biāo)本采集19-20
• 2.2.5 組織學(xué)標(biāo)本制備20
• 2.2.6 HE 染色20-21
• 2.2.7 血清中堿性磷酸酶活性檢測(cè)21-22
• 第3章 結(jié)果22-29
• 3.1 臨床一般狀況觀察22
• 3.2 肉眼觀察22-23
• 3.3 組織形態(tài)學(xué)觀察23-26
• 3.4 血清中堿性磷酸酶活性26-29
• 第4章 討論29-39
• 4.1 頜骨缺損修復(fù)方法29-31
• 4.2 RHGH 的相關(guān)研究31-34
• 4.3 RHGH 對(duì)頜骨缺損修復(fù)的影響34-39
• 第5章 結(jié)論39-40
• 參考文獻(xiàn)40-45
• 綜述45-52
• 參考文獻(xiàn)49-52
• 作者簡(jiǎn)介及在學(xué)期間所取得的科研成果52-53
• 致謝53

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 李剛;李爽;楊靜;王軍;郭暉;雷偉;廖Z

本文編號(hào)：366846