本文關(guān)鍵詞：臨床白念珠菌耐藥性與ERG3基因突變及表達的關(guān)系，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：近年來，隨著侵襲性真菌感染危險因素的增多，其感染的發(fā)病率和死亡率不斷上升，但感染的菌種仍以念珠菌屬感染為主，其中白念珠菌是最常見的條件致病性真菌。由于抗真菌藥物長期反復(fù)的廣泛應(yīng)用，導(dǎo)致耐藥現(xiàn)象不斷增加。因此，探討白念珠菌耐藥機制，指導(dǎo)臨床合理用藥，具有十分重要的意義。 目的：探討白念珠菌對常見抗真菌藥物的耐藥性。對臨床分離的白念珠菌ERG3基因行DNA提取、PCR擴增、測序及生物信息學(xué)分析。對ERG3基因表達的mRNA進行相對定量分析。明確白念珠菌ERG3基因突變及高表達與白念珠菌臨床株耐藥性的關(guān)系。 方法：收集臨床患者分離的白念珠菌36株。運用KOH鏡檢、沙氏培養(yǎng)基、CHROMagar念珠菌顯色培養(yǎng)基和API20CAUX鑒定系統(tǒng)進行鑒定。對36株白念珠菌行體外藥物敏感性試驗，獲得耐藥菌株和敏感菌株。提取白念珠菌ERG3基因組DNA，行PCR擴增，將擴增后的產(chǎn)物純化測序，與genbank中已知的標(biāo)準(zhǔn)序列(AF069572)進行BLAST比對分析；采用實時定量PCR（RT-PCR）法，對白念珠菌ERG3基因表達的mRNA行相對定量分析。 結(jié)果： （1）36株經(jīng)鑒定后的白念珠菌體外藥物敏感性試驗結(jié)果顯示：白念珠菌對5-氟胞嘧啶和兩性霉素B有較高的敏感性，對氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑的耐藥率分別為50.06%、72.22%和58.33%。 （2）19株白念珠菌的ERG3基因發(fā)生同義突變，它們發(fā)生的突變位點分別為T51C、T381C、T432C、C438T、T1044C，，均不引起編碼氨基酸的改變。2株白念珠菌發(fā)生錯義突變，1052位堿基由C突變?yōu)門，導(dǎo)致第351位氨基酸由丙氨酸轉(zhuǎn)變?yōu)槔i氨酸，發(fā)生錯義突變的菌株產(chǎn)生多重耐藥。 （3）對白念珠菌氟康唑的耐藥菌株和敏感菌株ERG3mRNA的表達水平進行檢測。18株氟康唑耐藥菌中白念珠菌ERG3mRNA的高表達率達94.4%，16株氟康唑敏感菌中ERG3mRNA高表達率達50.0%。在高表達菌株中存在多重耐藥和交叉耐藥現(xiàn)象，并有1株菌發(fā)生錯義突變，其余部分菌株發(fā)生同義突變。 結(jié)論： （1）白念珠菌對5-氟胞嘧啶、兩性霉素B敏感性較高，對氟康唑、伊曲康唑和伏立康唑有不同程度的耐藥，且對伊曲康唑、伏立康唑的耐藥率高于氟康唑，存在多藥耐藥和交叉耐藥現(xiàn)象。 （2）本研究表明ERG3基因突變及高表達均可能是引起白念珠菌產(chǎn)生耐藥的重要因素之一，兩者之間的相互作用有待進一步深入的探討。同時可能有多種調(diào)節(jié)機制共同參與白念珠菌耐藥的形成。
【關(guān)鍵詞】：白念珠菌 耐藥機制 ERG3基因
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R379.4
【目錄】：

• 中文摘要5-6
• Abstract6-8
• 英文縮略詞語表8-9
• 前言9-11
• 第一節(jié) 臨床菌種分離、鑒定與耐藥性分析11-18
• 1.1 實 驗 材 料11-12
• 1.2 實 驗 方 法12-13
• 1.3 結(jié) 果13-16
• 1.4 討 論16-18
• 第二節(jié) 白念珠菌念珠菌臨床分離菌株ERG3基因突變分析18-25
• 2.1 實 驗 材 料18-19
• 2.2 實驗 方 法19-21
• 2.3 結(jié) 果21-23
• 2.4 討 論23-25
• 第三節(jié) 白念珠菌ERG3基因mRNA表達水平分析25-32
• 3.1 實 驗 材 料25-26
• 3.2 實 驗 方 法26-27
• 3.3 結(jié) 果27-30
• 3.4 討 論30-32
• 結(jié)論32-33
• 參考文獻33-37
• 綜述37-43
• 參考文獻40-43
• 個人簡歷43-44
• 致謝44

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 吳憲明;吳松鋒;任大明;朱云平;賀福初;;密碼子偏性的分析方法及相關(guān)研究進展[J];遺傳;2007年04期

2 姜遠英;劉偉;曹永兵;;念珠菌的耐藥機制及應(yīng)對策略研究[J];中國真菌學(xué)雜志;2011年04期

  本文關(guān)鍵詞：臨床白念珠菌耐藥性與ERG3基因突變及表達的關(guān)系，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：364746