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鈣離子通道亞基Cacnb3對(duì)小鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化的促進(jìn)作用

發(fā)布時(shí)間:2022-02-15 15:09
  間充質(zhì)干細(xì)胞在治療骨相關(guān)疾病中具有重要意義,但其在成骨分化中的機(jī)制尚未完全闡明。該研究通過(guò)分析GEO數(shù)據(jù)庫(kù)中有關(guān)組蛋白去乙酰化酶抑制劑(HDACi)處理過(guò)的小鼠成骨前體細(xì)胞(MC3T3-E1 preosteoblasts)的生物芯片數(shù)據(jù),篩選出22個(gè)在成骨分化中上調(diào),在成脂分化中下調(diào),且受HDACi緊密調(diào)控的基因。這22個(gè)基因中有6個(gè)基因(Cacnb3、Lpcat2、Cd248等)與Ca2+調(diào)節(jié)功能相關(guān),提示Ca2+可能在MSCs分化中發(fā)揮重要作用。在后續(xù)實(shí)驗(yàn)中,我們觀察到電壓依賴(lài)性鈣通道亞單位β3(calcium voltage-gated channel auxiliary subunit beta 3, Cacnb3)和磷脂;D(zhuǎn)移酶2(lysophosphatidylcholine acyltransferase 2, Lpcat2)在小鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(ADSCs)、人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(hBMSCs)和小鼠成骨前體細(xì)胞(MC3T3-E1)的成骨分化過(guò)程中上調(diào),提示Cacnb3、Lpcat2可能參與ADSCs的體外成骨分化。此外,利... 

【文章來(lái)源】:中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào). 2019,41(08)CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】:11 頁(yè)

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 細(xì)胞和芯片數(shù)據(jù)
    1.2 試劑和儀器
    1.3 數(shù)據(jù)處理及差異基因分析
    1.4 小鼠ADSCs的原代培養(yǎng)
    1.5 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)ADSCs表面標(biāo)志物
    1.6 體外成骨分化
    1.7 ALP染色和茜素紅染色
    1.8 實(shí)時(shí)熒光定量核酸擴(kuò)增檢測(cè)系統(tǒng)(Real-timequantitative PCR detecting system)
    1.9 MC3T3-E1細(xì)胞的轉(zhuǎn)染
    1.1 0 細(xì)胞內(nèi)鈣離子水平檢測(cè)
    1.1 1 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 利用生物信息技術(shù)篩選成骨相關(guān)基因
    2.2 小鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞鑒定分析
    2.3 Cacnb3基因在細(xì)胞成骨誘導(dǎo)過(guò)程中表達(dá)升高
    2.4 敲低Cacnb3抑制MC3T3-E1細(xì)胞成骨分化
    2.5 成骨不全小鼠中Cacnb3表達(dá)降低
3 討論



本文編號(hào):3626848

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