目的:探討TNF-α誘導(dǎo)人胎盤(pán)胎兒來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞（hfPMSCs）發(fā)生凋亡和自噬的作用,以及自噬對(duì)細(xì)胞凋亡的調(diào)控作用。方法:利用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)無(wú)血清培養(yǎng)hfPMSCs中CD73、CD90、CD105、CD14、CD34、CD45的表達(dá);用終濃度20μg/L的TNF-α處理hfPMSCs 24h,以未處理細(xì)胞作為對(duì)照組。Annexin V/PI雙染色檢測(cè)TNF-α對(duì)hfPMSCs凋亡程度的影響;分別提取各組總蛋白,Western blot檢測(cè)自噬標(biāo)志基因LC3Ⅰ/Ⅱ的表達(dá);利用mRFP-GFP-LC3腺病毒感染細(xì)胞,觀察胞內(nèi)點(diǎn)狀聚集形成的情況;利用Atg5干擾慢病毒（si-Atg5）及陰性對(duì)照慢病毒（si-NC）感染hfPMSCs,Annexin V/PI雙染色檢測(cè)TNF-α對(duì)慢病毒感染后hfPMSCs凋亡程度的影響。結(jié)果:所培養(yǎng)細(xì)胞具有典型的MSCs形態(tài),呈CD73⁺CD90⁺CD105⁺/CD14^-CD34^-CD45^-細(xì)胞; Annexin V/PI染... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)生物工程雜志. 2019,39(09)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 人胎盤(pán)胎兒來(lái)源MSCs的培養(yǎng)
        1.2.2 MSCs特異性標(biāo)志物的鑒定
        1.2.3 細(xì)胞凋亡的檢測(cè)
        1.2.4 自噬標(biāo)志蛋白LC3Ⅰ/Ⅱ表達(dá)的鑒定
        1.2.5 MSCs胞內(nèi)自噬體的檢測(cè)
        1.2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 MSCs形態(tài)觀察
    2.2 MSCs表面標(biāo)志分子的檢測(cè)
    2.3 TNF-α誘導(dǎo)MSCs發(fā)生凋亡
    2.4 TNF-α誘導(dǎo)MSCs自噬的發(fā)生
    2.5 TNF-α誘導(dǎo)MSCs自噬體的形成
    2.6 TNF-α誘導(dǎo)的自噬調(diào)控MSCs凋亡發(fā)生
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