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植物乳桿菌細(xì)胞壁肽聚糖緩釋微球免疫效果評(píng)價(jià)

發(fā)布時(shí)間:2017-05-13 00:13

  本文關(guān)鍵詞:植物乳桿菌細(xì)胞壁肽聚糖緩釋微球免疫效果評(píng)價(jià),由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:本課題研究的目的是在實(shí)驗(yàn)室前期研究的基礎(chǔ)上考察肽聚糖緩釋微球的免疫調(diào)節(jié)作用以及對(duì)銅綠假單胞菌感染小鼠的免疫保護(hù)效果,為該免疫增強(qiáng)劑的開發(fā)與應(yīng)用提供前期工作基礎(chǔ)。利用乳化交聯(lián)法制備肽聚糖微球,該緩釋微球的載藥量(46.41±0.829)g/100g,包封率為(82.80±1.74)%。傅立葉紅外光譜(FT-IR)分析微球的結(jié)構(gòu)變化結(jié)果表明肽聚糖被包埋在殼聚糖微球內(nèi)部。肽聚糖緩釋微球?qū)π∈竺庖咝Ч脑u(píng)價(jià)。200只昆明清潔級(jí)小鼠隨機(jī)分為四組:(1)對(duì)照組灌胃0.9%無菌生理鹽水0.2mL/只;(2)肽聚糖組灌胃肽聚糖2mg/只;(3)殼聚糖組灌胃殼聚糖空白微球3mg/只;(4)肽聚糖-殼聚糖緩釋微球組灌胃肽聚糖-殼聚糖復(fù)合微球5mg/只;每隔24h灌胃一次,連續(xù)灌胃7d。分別在第3d,7d,14d,21d進(jìn)行眼球取血,運(yùn)用流式細(xì)胞法測定外周血及脾臟T淋巴細(xì)胞亞群;采用間接ELISA測定小鼠外周血中免疫球蛋白IgA、IgG和IgM的動(dòng)態(tài)變化;同時(shí)監(jiān)測小鼠的臨床行為和臟器指數(shù)。結(jié)果顯示:肽聚糖緩釋微球組免疫器官絕對(duì)重量和指數(shù)均高于對(duì)照組。說明肽聚糖緩釋微球能夠增強(qiáng)機(jī)體對(duì)特異性抗原的免疫功能,提高免疫器官的生長功能。經(jīng)檢測小鼠外周血和脾臟T淋巴細(xì)胞中CD3+、CD4+、CD3+CD4+結(jié)果表明,肽聚糖-殼聚糖緩釋微球組與空白組相比有較顯著提高。說明肽聚糖微球能夠增強(qiáng)機(jī)體免疫的能力,提高T淋巴細(xì)胞亞群的數(shù)量。肽聚糖-殼聚糖復(fù)合微球組在第14d時(shí)小鼠IgG含量有明顯提高,在第21d時(shí)變化顯著(p0.01)。肽聚糖微球組在第21d,28d感染銅綠假單胞菌時(shí),存活率分別為50%,60%,與空白組相比有顯著差異。本課題研究將為口服肽聚糖的理化性質(zhì)及生理活性提供理論依據(jù),對(duì)肽聚糖作為免疫增強(qiáng)劑的研究與開發(fā)具有重要意義。
【關(guān)鍵詞】:肽聚糖微球 免疫 保護(hù)效果
【學(xué)位授予單位】:黑龍江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號(hào)】:R392
【目錄】:
  • 中文摘要3-4
  • Abstract4-9
  • 第1章 前言9-19
  • 1.1 植物乳桿菌簡介9-11
  • 1.1.1 植物乳桿菌及其代謝產(chǎn)物的生理功能9-10
  • 1.1.2 免疫調(diào)節(jié)作用10
  • 1.1.3 降低血清膽固醇含量及預(yù)防心血管疾病10-11
  • 1.1.4 對(duì)致病菌的拮抗作用11
  • 1.2 肽聚糖作為免疫增強(qiáng)劑的研究現(xiàn)狀11-16
  • 1.2.1 肽聚糖免疫識(shí)別蛋白研究進(jìn)展12-14
  • 1.2.2 肽聚糖作為免疫增強(qiáng)劑的研究進(jìn)展14-15
  • 1.2.3 肽聚糖的應(yīng)用前景與展望15-16
  • 1.3 開發(fā)肽聚糖緩釋制劑的必要性16-17
  • 1.4 本實(shí)驗(yàn)室的前期研究工作基礎(chǔ)17
  • 1.5 本課題研究的目的意義17-19
  • 第2章 植物乳桿菌細(xì)胞壁肽聚糖微球的研制19-25
  • 2.1 實(shí)驗(yàn)材料19-20
  • 2.1.1 菌種19
  • 2.1.2 培養(yǎng)基19
  • 2.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑19
  • 2.1.4 實(shí)驗(yàn)儀器19-20
  • 2.2 肽聚糖-殼聚糖緩釋微球制備方法20
  • 2.3 肽聚糖-殼聚糖緩釋微球結(jié)構(gòu)表征及物理性能檢測20-21
  • 2.3.1 緩釋微球掃描電鏡觀察20
  • 2.3.2 紅外光譜分析(FTIR)20
  • 2.3.3 肽聚糖-殼聚糖緩釋微球載藥量和包封率檢測20-21
  • 2.4 結(jié)果與討論21-24
  • 2.4.1 掃描電鏡觀察微球形態(tài)21-22
  • 2.4.2 傅立葉紅外光譜分析(FTIR)22-23
  • 2.4.3 載藥量包封率23-24
  • 2.5 本章小結(jié)24-25
  • 第3章 肽聚糖-殼聚糖緩釋微球?qū)π∈竺庖吖δ艿挠绊?/span>25-49
  • 3.1 實(shí)驗(yàn)材料25-26
  • 3.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物25
  • 3.1.2 實(shí)驗(yàn)材料及試劑25
  • 3.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器和設(shè)備25-26
  • 3.2 試驗(yàn)方法26-27
  • 3.2.1 動(dòng)物分組及飼養(yǎng)管理26
  • 3.2.2 小鼠免疫器官重量的測定26
  • 3.2.3 外周血T淋巴細(xì)胞亞群的測定26
  • 3.2.4 脾臟T淋巴細(xì)胞亞群的測定26-27
  • 3.2.5 小鼠免疫球蛋白IgA、IgG、IgM的測定27
  • 3.2.6 數(shù)據(jù)處理27
  • 3.3 結(jié)果與分析27-46
  • 3.3.1 小鼠免疫器官重量的測定27-31
  • 3.3.2 外周血T淋巴細(xì)胞亞群的測定31-38
  • 3.3.3 脾臟T淋巴細(xì)胞亞群的測定38-44
  • 3.3.4 小鼠免疫球蛋白IgA、IgG、IgM的測定44-46
  • 3.4 討論46-49
  • 3.4.1 小鼠免疫器官重量的測定46-47
  • 3.4.2 T淋巴細(xì)胞亞群的測定47-48
  • 3.4.3 小鼠免疫球蛋白IgA、IgG、IgM的測定48-49
  • 第4章 肽聚糖-殼聚糖緩釋微球?qū)︺~綠假單胞菌感染小鼠的保護(hù)效果研究49-56
  • 4.1 實(shí)驗(yàn)材料49
  • 4.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物49
  • 4.1.2 實(shí)驗(yàn)材料及試劑49
  • 4.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器和設(shè)備49
  • 4.2 試驗(yàn)方法49-50
  • 4.2.1 環(huán)磷酰胺致小鼠免疫低下模型的建立49-50
  • 4.2.2 緩釋微球?qū)Ω腥俱~綠假單胞菌小鼠免疫保護(hù)效果評(píng)價(jià)50
  • 4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論50-54
  • 4.3.1 環(huán)磷酰胺致小鼠免疫低下模型的建立50-51
  • 4.3.2 不同時(shí)間給予銅綠假單胞菌后小鼠存活率的比較51-54
  • 4.4 本章小結(jié)54-56
  • 第5章 結(jié)論56-57
  • 第6章 本論文的主要?jiǎng)?chuàng)新點(diǎn)及展望57-58
  • 6.1 創(chuàng)新點(diǎn)57
  • 6.2 展望57-58
  • 參考文獻(xiàn)58-66
  • 致謝66-67
  • 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文67-68

【參考文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞:植物乳桿菌細(xì)胞壁肽聚糖緩釋微球免疫效果評(píng)價(jià),,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號(hào):361182

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