發(fā)布時間：2022-01-17 17:31

　　蛇毒金屬蛋白酶/去整合蛋白是蛇毒中的主要功能蛋白之一，它們是引起傷口流血不止的主要蛇毒成分。到現(xiàn)在為止，已有２０多種蛇毒金屬蛋白酶的氨基酸序列被測定，并有四種蛇毒金屬蛋白酶的晶體衍射結(jié)構(gòu)被測定。去整合蛋白是一類首先在蛇毒中發(fā)現(xiàn)的富含半胱氨酸的多肽，它具有抑制血小板聚集等多種功能,后來研究發(fā)現(xiàn)它和ＰⅡ型蛇毒金屬蛋白酶屬于同一前體。我們利用RT-PCR方法從江浙蝮蛇中克隆出一個含去整合蛋白結(jié)構(gòu)域的基因片段，從測定的片段序列中取出特異的序列作為引物獲得它的全長基因。通過序列測定發(fā)現(xiàn)，它和以前報道的蛇毒金屬蛋白酶序列有很高的同源性（和contortrostatin同源性為78%，和bothrostatin同源性為77%），但它是一個新的蛇毒金屬蛋白酶和去整合蛋白基因，而且它的C端去整合蛋白結(jié)構(gòu)域比其他的蛇毒金屬蛋白酶多出兩個半胱氨酸（Cys407,Cys426），我們把它命名為Agkistin以區(qū)別其他蛇毒金屬蛋白酶/去整合蛋白。為了研究Agkistin的功能，我們將含有完整去整合蛋白結(jié)構(gòu)域編碼區(qū)的Agkistin-s小片段（殘基344-488）插入到表達(dá)質(zhì)粒pET-28a（+）上，在30℃用... 

【文章來源】：中國科學(xué)院大學(xué)(中國科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院)上海市

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

蛇毒金屬蛋白酶的結(jié)構(gòu)和分類

所示，RGD殘基形成一個突出的loop

【參考文獻(xiàn)】：
碩士論文
[1]管氏腫腿蜂毒液金屬蛋白酶和絲氨酸蛋白酶基因的克隆與功能研究[D]. 李麗芳.西南林業(yè)大學(xué) 2016
[2]利用生物信息學(xué)方法制備尖吻蝮蛇蛇毒DNA疫苗[D]. 張志曉.云南大學(xué) 2010



本文編號：3595143