孤兒核受體SHP（small heterodimer partner）是核受體超家族中的一員,具有LXXLL模體及配體結(jié)合域,但無經(jīng)典的DNA結(jié)合域.它可與多種轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合,調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖、分化和代謝等生物學(xué)過程.但目前關(guān)于SHP在BMP9誘導(dǎo)成骨分化中的確切作用卻尚不清楚.本研究證明,SHP參與BMP9誘導(dǎo)的C3H10T1/2細(xì)胞成骨分化.RT-PCR結(jié)合Western印跡方法檢測蛋白揭示,異位表達(dá)BMP9上調(diào)了SHP在C3H10T1/2細(xì)胞中的表達(dá).小干擾RNA敲減SHP基因在C3H10T1/2細(xì)胞的表達(dá)下調(diào)了成骨相關(guān)基因Runx2、Id1、Id2及CTGF的表達(dá),而過表達(dá)BMP9則可上調(diào)這些基因的表達(dá).堿性磷酸酶（ALP）活性測定/染色及茜素紅染色顯示,敲減核受體SHP基因可抑制BMP9的成骨分化作用,而過表達(dá)BMP9可部分消除SHP敲減導(dǎo)致的成骨抑制作用.上述結(jié)果提示,核受體SHP為BMP9誘導(dǎo)的C3H10T1/2細(xì)胞成骨分化所必需.究竟BMP9如何上調(diào)SHP基因表達(dá),以及SHP究竟通過何種機制上調(diào)BMP9下游成骨分化相關(guān)基因的表達(dá)尚待進(jìn)一步研究. 

【文章來源】：中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報. 2015,31(02)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1. 1 材料
    1. 2 穿梭質(zhì)粒 pS ES-HUS-si SHP 的構(gòu)建
    1. 3 重組腺病毒質(zhì)粒 pA d-si SHP 的構(gòu)建及腺病毒的包裝擴增
    1. 4 條件培養(yǎng)基的制備
    1. 5 C3H10T1 /2 細(xì)胞培養(yǎng)
    1. 6堿性磷酸酶活性和染色
    1. 7鈣鹽沉積實驗
    1. 8 RT-PCR
    1. 9 Western 印跡
    1. 10 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2. 1BMP9 促進(jìn)間充質(zhì)干細(xì)胞 C3H10T1 /2 細(xì)胞中 SHP 的表達(dá)
    2. 2Ad-si SHP 可 有 效 下 調(diào) 間 充 質(zhì) 干 細(xì) 胞C3H10T1 / 中 SHP 的表達(dá)
    2. 3Ad-si SHP-4 對 BMP9 誘導(dǎo)的 C3H10T1 /2 細(xì)胞成骨分化的影響
3 討論



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