目的 建立永生化人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVECs）系并探討永生化對(duì)HUVECs增殖、凋亡及成瘤性影響。方法 擴(kuò)增并提取猿猴病毒40大T抗原（SV40LT）和人端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶催化亞基（hTERT）基因,反轉(zhuǎn)錄病毒載體介導(dǎo)感染HUVECs；篩選2周；聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）擴(kuò)增后行瓊脂糖凝膠電泳成像鑒定目的基因是否轉(zhuǎn)入HUVECs；細(xì)胞計(jì)數(shù)法比較細(xì)胞增殖、流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡、裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化。結(jié)果 篩選出抗嘌呤霉素陽性克隆,SV40LT、hTERT成功轉(zhuǎn)入HUVECs；永生化組細(xì)胞生長曲線上移,細(xì)胞增殖第5、6、7天,SV40LT永生化組及hTERT永生化組與HUVECs組細(xì)胞數(shù)目差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）,hTERT永生化組和HUVECs組細(xì)胞數(shù)目差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；HUVECs組細(xì)胞總凋亡率為（11.2±0.9）%,SV40LT永生化組HUVECs總凋亡率為（3.4±0.4）%,hTERT永生化組HUVECs總凋亡率為（2.8±0.4）%,SV40LT永生化組、hTERT永生化組凋亡率均低于HUVECs組（均P<0.05）；兩種永生化細(xì)... 

【文章來源】：中華實(shí)驗(yàn)外科雜志. 2019,36(01)

【文章頁數(shù)】：3 頁


本文編號(hào)：3561784