丙型肝炎病毒（HCV）感染是目前影響人類健康的嚴重問題,它的持續(xù)感染可引起慢性肝炎、肝硬化和肝細胞癌（HCC）的發(fā)生,但對于HCV 持續(xù)感染導(dǎo)致慢性肝疾病的機理還不清楚。HCV 是一種RNA 病毒,無逆轉(zhuǎn)錄酶活性,只在細胞胞漿內(nèi)復(fù)制,不能與宿主基因整合,主要是通過其表達的蛋白質(zhì)起作用。盡管對于HCV 是否直接參與肝細胞惡性轉(zhuǎn)化這一問題尚不清楚,但已有研究顯示HCV 的結(jié)構(gòu)蛋白C 和非結(jié)構(gòu)蛋白NS3、NS4B、NS5A 具有致癌作用。其中HCV NS3 蛋白（核苷酸3420⁵312,含631 個氨基酸殘基）是一個多功能的蛋白質(zhì),其N 端1/3 具有絲氨酸蛋白酶活性,C 端2/3 則表現(xiàn)為解旋酶和NTP 酶活性,HCV NS3 介導(dǎo)的蛋白酶解過程是病毒在體內(nèi)復(fù)制所必需。因HCV NS3 在病毒生活周期中起重要作用,并可和宿主蛋白相互作用,故其在HCV 相關(guān)性HCC 中的作用已成為研究的熱點之一。HCV 為嗜肝細胞病毒,其自然宿主細胞是人或黑猩猩的肝細胞,采用非肝細胞作為研究體系,不能真實反映HCV 感染的自然進程,而以往的大部分研究均未采用肝細胞。因此本研究首次選用人... 

【文章來源】：中南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

轉(zhuǎn)染后經(jīng)G418篩選2周獲得的陽性克隆，

測轉(zhuǎn)染細胞基因組 DNA 產(chǎn)物 M: 100bp 分子HCNS3/QSG 細胞，2: pRcCMV/QSG 細胞，32 3 4 5 6 estern Blot 檢測 HCV NS3 蛋白的表達S3/QSG 轉(zhuǎn)染細胞獲得的 7 個克隆，8、9 分別SG7701 細胞，上圖顯示 NS3 蛋白的表達，而

疫細圖 4. Western Blot 檢測 HCV NS3 蛋白的表達，1~7 分別代表pRcHCNS3/QSG 轉(zhuǎn)染細胞獲得的 7 個克隆，8、9 分別代表 pRcCMV/QSG細胞和 QSG7701 細胞，上圖顯示 NS3 蛋白的表達，而下圖為 α-tubulin蛋白作為上樣量對照胞化學(xué)檢測28

【參考文獻】：
期刊論文
[1]人肺鱗癌組織及癌旁組織蛋白質(zhì)雙向電泳圖譜的差異分析[J]. 李萃,陳主初,肖志強,吳曉英,詹顯全,李茂玉,馮雪萍,章曉鵬,李建玲,陳平,梁宋平.  癌癥. 2004(01)
[2]肝細胞癌患者血清蛋白質(zhì)組成分的雙向凝膠電泳-飛行時間質(zhì)譜分析[J]. 王征,阮幼冰,官陽.  中華病理學(xué)雜志. 2003(04)
[3]腫瘤的HLA表達及其臨床意義[J]. 劉新,王夢華.  微生物學(xué)雜志. 2003(03)
[4]蛋白質(zhì)組學(xué)研究的主要策略及其在腫瘤研究中的應(yīng)用[J]. 夏晴.  中國腫瘤生物治療雜志. 2003(01)
[5]肝癌與凋亡抵抗性——肝癌發(fā)病進展中的免疫監(jiān)視逃逸機制[J]. 佐佐木裕,尹良民.  日本醫(yī)學(xué)介紹. 2003(01)
[6]MAPK/JNK信號傳導(dǎo)通路研究進展[J]. 胡智.  國外醫(yī)學(xué)(分子生物學(xué)分冊). 2002(04)
[7]MAPK信號傳導(dǎo)通路研究進展[J]. 端木德強,李中海,王敬澤.  細胞生物學(xué)雜志. 2002(03)
[8]丙型肝炎病毒非結(jié)構(gòu)蛋白NS3對端粒酶活性的影響[J]. 歐陽小明,程瑞雪,馮德云,鄭暉.  中華病理學(xué)雜志. 2001(06)
[9]重組人TFAR19蛋白對羥基喜樹堿誘導(dǎo)人7721肝癌細胞凋亡的增敏作用[J]. 李惠平,曹志敏,邵玉霞,孫武,賈廷珍.  北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2000(05)
[10]酪氨酸蛋白激酶抑制劑的研究進展[J]. 周意明,孫黎光.  解剖科學(xué)進展. 2000(03)



本文編號：3495071