發(fā)布時間：2021-11-10 03:51

　　目的 克隆表達人腺病六鄰體高變區(qū)片段,了解其結(jié)構(gòu)和功能,為研發(fā)腺病毒基因工程重組疫苗奠定基礎(chǔ)。方法 根據(jù)生物信息學(xué)軟件預(yù)測的腺病毒六鄰體的高變區(qū)域,選擇目標(biāo)基因,設(shè)計其對應(yīng)的引物,并以團隊保存的人腺病毒六鄰體核酸序列為模板,聚合酶鏈反應(yīng)擴增目標(biāo)基因,定向插入載體pQE32中構(gòu)建工程質(zhì)粒。通過酶切和基因測序鑒定陽性工程質(zhì)粒,并誘導(dǎo)其在大腸桿菌M15中高效表達帶有組氨酸標(biāo)記的靶蛋白,應(yīng)用鎳樹脂親和層析的方法分離純化靶蛋白。結(jié)果 構(gòu)建了含有人腺病毒六鄰體高變區(qū)片段的重組質(zhì)粒,同時探索出其在大腸桿菌M15中高效表達的條件,純化目標(biāo)蛋白,其分子量約為188 000,與應(yīng)用生物信息學(xué)分析預(yù)測的結(jié)果相同。結(jié)論 成功地克隆、表達和純化了人腺病毒六鄰體高變區(qū)片段。 

【文章來源】：國際免疫學(xué)雜志. 2019,42(03)

【文章頁數(shù)】：6 頁


本文編號：3486519