本文關(guān)鍵詞：PTEN基因?qū)υ缙谂咛ヮ^部神經(jīng)嵴細(xì)胞遷移的作用研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的 通過(guò)研究抑癌基因PTEN在早期雞胚中對(duì)神經(jīng)嵴細(xì)胞遷移、分化的影響，為進(jìn)一步對(duì)與神經(jīng)嵴細(xì)胞遷移相關(guān)疾病的治療提供基礎(chǔ)理論支持。 方法 胚胎原位雜交：利用分子生物學(xué)方法合成chick PTEN的RNA探針，檢測(cè)PTEN在早期雞胚中尤其是神經(jīng)嵴細(xì)胞及神經(jīng)嵴前體細(xì)胞的原位表達(dá)情況。 電穿孔：我們選擇經(jīng)典的電穿孔方法來(lái)過(guò)表達(dá)PTEN突變體及野生型PTEN后用特定的神經(jīng)嵴細(xì)胞marker來(lái)檢測(cè)神經(jīng)嵴細(xì)胞遷移情況。 免疫熒光：用特異的marker，分別用HNK1和Pax7來(lái)標(biāo)記神經(jīng)嵴細(xì)胞，以此來(lái)展示神經(jīng)嵴細(xì)胞的遷移情況。 神經(jīng)嵴細(xì)胞原代培養(yǎng)：為了更好地研究神經(jīng)嵴細(xì)胞及更容易對(duì)神經(jīng)嵴細(xì)胞定量，可以對(duì)神經(jīng)嵴細(xì)胞原代培養(yǎng)，進(jìn)而對(duì)神經(jīng)嵴細(xì)胞遷移的面積、細(xì)胞數(shù)等等做統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，這樣可以更清楚明了地顯示PTEN對(duì)神經(jīng)嵴細(xì)胞的影響。 結(jié)果 chick PTEN在HH4雞胚的上胚層和中胚層已開(kāi)始表達(dá)，隨著胚胎發(fā)育的繼續(xù)，其在暗區(qū)及胚體均有表達(dá)。在HH9雞胚中主要表達(dá)在神經(jīng)管和神經(jīng)嵴細(xì)胞中。過(guò)表達(dá)PTEN C124S后用神經(jīng)嵴細(xì)胞特異的marker標(biāo)記神經(jīng)嵴細(xì)胞后可以發(fā)現(xiàn)，PTENC124的過(guò)表達(dá)沒(méi)有造成神經(jīng)嵴細(xì)胞遷移或者神經(jīng)嵴細(xì)胞數(shù)變化，而過(guò)表達(dá)PTENWT后可以觀察到過(guò)表達(dá)側(cè)神經(jīng)嵴細(xì)胞遷移收到抑制，包括神經(jīng)嵴細(xì)胞遷移的縱向距離和橫向距離都較對(duì)照側(cè)變�。╬0.05），從背側(cè)神經(jīng)管遷出的神經(jīng)嵴細(xì)胞數(shù)也較對(duì)照側(cè)明顯變�。╬0.05）。相似地，過(guò)表達(dá)只有脂質(zhì)磷酸酶活性的PTEN Y138L也得到了和PTEN WT相似的結(jié)果。而過(guò)表達(dá)只有蛋白磷酸酶活性的PTEN G129E后，可以觀察到其對(duì)神經(jīng)嵴細(xì)胞的遷移也沒(méi)有產(chǎn)生影響，對(duì)神經(jīng)嵴細(xì)胞的細(xì)胞數(shù)也沒(méi)有產(chǎn)生影響。對(duì)神經(jīng)嵴細(xì)胞原代培養(yǎng)的結(jié)果也說(shuō)明了LY294002抑制了神經(jīng)嵴細(xì)胞的遷移，這說(shuō)明了PI3K信號(hào)通路調(diào)控著神經(jīng)嵴細(xì)胞遷移。 結(jié)論 過(guò)表達(dá)PTEN WT和PTEN Y138L后，，神經(jīng)嵴前體細(xì)胞的粘附分子E-cadherin會(huì)上調(diào)，進(jìn)而抑制了神經(jīng)嵴細(xì)胞的遷移。這些PTEN的功能主要是由PTEN的脂質(zhì)磷酸酶活性體現(xiàn)的。
【關(guān)鍵詞】：PTEN 神經(jīng)嵴細(xì)胞 胚胎發(fā)育 細(xì)胞遷移 EMT PI3K
【學(xué)位授予單位】：暨南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類(lèi)號(hào)】：R321
【目錄】：

• 中文摘要3-5
• Abstract5-7
• 目錄7-8
• 1 前言8-15
• 1.1 神經(jīng)嵴細(xì)胞遷移9-12
• 1.2 PTEN 基因與神經(jīng)嵴細(xì)胞的遷移12-14
• 1.3 研究目的與意義14-15
• 2 實(shí)驗(yàn)材料與方法15-28
• 2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物15
• 2.2 試劑與儀器15-16
• 2.3 實(shí)驗(yàn)溶液配置16-21
• 2.4 實(shí)驗(yàn)方法21-27
• 2.5 研究路線27-28
• 3. 結(jié)果28-39
• 3.1 PTEN 基因在早期胚胎及神經(jīng)嵴細(xì)胞中的表達(dá)28-30
• 3.2 PTEN 的脂質(zhì)磷酸酶活性抑制 HNK1 標(biāo)記的神經(jīng)嵴細(xì)胞遷移30-33
• 3.3 PTEN 的脂質(zhì)磷酸酶活性抑制 PAX7 標(biāo)記的神經(jīng)嵴細(xì)胞的遷移33-35
• 3.4 PTEN 脂質(zhì)磷酸酶活性通過(guò)上調(diào) E-CAD 的表達(dá)來(lái)抑制神經(jīng)嵴細(xì)胞的遷移35-37
• 3.5 PI3K 信號(hào)通路調(diào)控神經(jīng)嵴的遷移37-39
• 討論39-42
• 小結(jié)42-43
• 參考文獻(xiàn)43-46
• 英文縮略詞表索引46-47
• 在學(xué)期間發(fā)表論文清單47-48
• 致謝48

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1 徐敏;PTEN/MMAC_1/TEP_1抑癌基因與子宮內(nèi)膜癌的相關(guān)性[J];實(shí)用腫瘤雜志;2002年06期

2 陳明,陳洪雷,陳福春,朱潤(rùn)慶,劉銘球;轉(zhuǎn)移性肺癌中TPEN蛋白的表達(dá)及其臨床意義[J];數(shù)理醫(yī)藥學(xué)雜志;2002年06期

3 許逸卿,王春友,陶京,俞建雄;PTEN蛋白在胰腺癌中的表達(dá)及其意義[J];中華實(shí)驗(yàn)外科雜志;2003年07期

4 馬玉芳,劉銘球,易建華,姚俊霞,熊奎,劉濤,朱紅波;腫瘤抑癌基因PTEN在宮頸鱗癌中的表達(dá)及其與分化程度的關(guān)系[J];鄖陽(yáng)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2003年01期

5 黃學(xué)勤,李清泉,李儒佑;小細(xì)胞肺癌中PTEN的表達(dá)及其與凋亡的關(guān)系[J];醫(yī)師進(jìn)修雜志;2004年09期

6 劉志香,路濤,黃長(zhǎng)征,李家文,涂亞庭;皮膚腫瘤中PTEN基因突變的研究[J];中華皮膚科雜志;2004年12期

7 戴淑真,徐冰,姚勤,李超;子宮內(nèi)膜癌、宮頸癌組織中PTEN基因突變的檢測(cè)及意義[J];山東醫(yī)藥;2003年24期

8 劉斌,吳軍正,雷德林,劉彥普;PTEN基因?qū)φ骋罕砥影┘?xì)胞裸鼠移植瘤生長(zhǎng)的抑制作用[J];中國(guó)口腔頜面外科雜志;2003年01期

9 周傳香;抑癌基因PTEN與頭頸腫瘤研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).口腔醫(yī)學(xué)分冊(cè);2003年03期

10 項(xiàng)友群,徐美榮,方慶安,施公勝;c-erbB-2、PTEN在乳腺癌中的表達(dá)及其意義[J];南通醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2004年01期

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1 Emily Fox;James Pao;Sheila McCormick;;Overexpression of Arabidopsis thaliana PTEN Caused Accumulation of Autophagic Bodies in Pollen Tubes by Disrupting Phosphatidylinositol 3-Phosphate Dynamics[A];2011全國(guó)植物生物學(xué)研討會(huì)論文集[C];2011年

2 蘇玉紅;康林;王磊;耿丹丹;杜鵑;;Draxin參與對(duì)雞胚脊髓神經(jīng)嵴細(xì)胞遷移的調(diào)節(jié)[A];中國(guó)解剖學(xué)會(huì)2011年年會(huì)論文文摘匯編[C];2011年

3 武姍姍;景雅;楊艷萍;李海榮;喬從進(jìn);張濤;;神經(jīng)嵴細(xì)胞和Isl-1陽(yáng)性細(xì)胞與小鼠胚胎心流出道的發(fā)育[A];中國(guó)解剖學(xué)會(huì)2011年年會(huì)論文文摘匯編[C];2011年

4 李艷;王曉鈺;王麗京;徐濤;盧曉曄;蔡冬青;耿建國(guó);楊雪松;;PTEN抑制胚胎原腸胚形成期EMT的過(guò)程[A];“細(xì)胞活動(dòng) 生命活力”——中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)全體會(huì)員代表大會(huì)暨第十二次學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要集[C];2011年

5 姚丹;何雪;江克文;趙正言;;大鼠缺氧缺血性腦損傷后海馬P13K/Akt信號(hào)通路及PTEN的分布與表達(dá)[A];2011年浙江省醫(yī)學(xué)會(huì)兒科學(xué)分會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)暨兒內(nèi)科疾病診治新進(jìn)展國(guó)家級(jí)學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2011年

6 郭小芳;陳攀;周后德;張文玲;廖前進(jìn);鄧敏;唐海林;曹莉;李桂源;;LMP1通過(guò)上調(diào)miR-141影響PTEN/AKT信號(hào)通路的機(jī)制研究[A];第六屆全國(guó)鼻咽癌學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2010年

7 金軍;金永德;金順吉;;PTEN在喉癌細(xì)胞中表達(dá)及其臨床意義[A];吉林省醫(yī)學(xué)會(huì)第九次耳鼻咽喉—頭頸外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2011年

8 李祥勇;劉美蓮;曾今誠(chéng);林觀平;周克元;;PTEN基因過(guò)表達(dá)對(duì)乳腺癌細(xì)胞的化療增敏作用[A];“細(xì)胞活動(dòng) 生命活力”——中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)全體會(huì)員代表大會(huì)暨第十二次學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要集[C];2011年

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1 劉海英　王小龍;神經(jīng)嵴細(xì)胞在眼睛發(fā)育中起關(guān)鍵作用[N];科技日?qǐng)?bào);2011年

2 本報(bào)實(shí)習(xí)記者 馬佳;鯊魚(yú)第六感覺(jué)可以感知電脈沖[N];北京科技報(bào);2006年

3 余志平;蛋白質(zhì)水平影響乳腺癌療效[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2004年

4 梓樺;前列腺癌新藥將展開(kāi)臨床試驗(yàn)[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2004年

5 記者 毛磊 何德功 顏亮 張錦芳;人類(lèi)仍在不懈努力[N];新華每日電訊;2003年

6 張中橋;肝癌與PTEN蛋白表達(dá)缺失有關(guān)[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2002年

7 本報(bào)記者 陳丹;尋找人類(lèi)的疾病基因[N];科技日?qǐng)?bào);2010年

8 通訊員 衣曉峰邋記者 李麗云;我赴美學(xué)者鎖定癌癥治療藥物新靶點(diǎn)[N];科技日?qǐng)?bào);2008年

9 姜微 錢(qián)海虹;復(fù)旦大學(xué)首次發(fā)現(xiàn)先天性心臟病致病禍?zhǔn)譡N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2000年

10 記者 衣曉峰;癌癥治療藥物新靶點(diǎn)被發(fā)現(xiàn)[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2008年

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1 陳洲;PTEN在擬阿爾茨海默病樣細(xì)胞模型發(fā)生中的變化及作用[D];福建醫(yī)科大學(xué);2010年

2 范小平;涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞中PTEN基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化狀態(tài)的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2010年

3 郭亮;PTEN調(diào)控增生性瘢痕成纖維細(xì)胞凋亡及相關(guān)功能的機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2012年

4 王素云;PTEN基因?qū)Χ喟l(fā)性骨髓瘤細(xì)胞增殖、凋亡和侵襲力的影響及其機(jī)制的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2010年

5 鄭克彬;PTEN基因重組腺病毒治療腦膠質(zhì)瘤的實(shí)驗(yàn)研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2011年

6 張勇;抑癌基因PTEN對(duì)肝癌細(xì)胞的放射增敏作用研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2011年

7 周喬丹;PTEN對(duì)抗氧化蛋白調(diào)控機(jī)制及效應(yīng)研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2010年

8 李洪凌;PTEN基因亞細(xì)胞定位提高膠質(zhì)瘤放射敏感性的實(shí)驗(yàn)研究[D];吉林大學(xué);2010年

9 安君艷;腺病毒介導(dǎo)的PTEN基因防治大鼠肝纖維化的體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2011年

10 楊春華;PTEN負(fù)調(diào)控癌蛋白AIB1的機(jī)理[D];大連理工大學(xué);2013年

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1 張兆龍;PTEN基因?qū)υ缙谂咛ヮ^部神經(jīng)嵴細(xì)胞遷移的作用研究[D];暨南大學(xué);2013年

2 崔國(guó)振;人腦膠質(zhì)瘤中PTEN和COX-2的表達(dá)及臨床意義[D];吉林大學(xué);2010年

3 董華承;PTEN和nm23-H1在大腸癌中的表達(dá)及其臨床意義[D];大連醫(yī)科大學(xué);2010年

4 李艷;PTEN在胚胎早期血管發(fā)生中的作用研究[D];暨南大學(xué);2011年

5 方冬冬;口腔鱗癌組織中PTEN、COX-2表達(dá)和MVD測(cè)定及意義[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2011年

6 戚紅;宮頸癌中PTEN、P16和P15蛋白的表達(dá)及臨床意義[D];青島大學(xué);2002年

7 張嬌;PTEN在兔晶狀體上皮細(xì)胞增殖中的表達(dá)及意義[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2003年

8 沈慧;原發(fā)性肝癌中PTEN蛋白表達(dá)及其與HBV感染的關(guān)系[D];山西醫(yī)科大學(xué);2004年

9 楊寧;非小細(xì)胞肺癌組織中PTEN、VEGF、MVD的表達(dá)及臨床意義[D];河北醫(yī)科大學(xué);2010年

10 陳偉;抑癌基因PTEN、p27在肝細(xì)胞性肝癌組織中的表達(dá)及臨床相關(guān)性研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2003年

  本文關(guān)鍵詞：PTEN基因?qū)υ缙谂咛ヮ^部神經(jīng)嵴細(xì)胞遷移的作用研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：347904