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大鼠腎小管上皮細(xì)胞缺氧/復(fù)氧模型的建立

發(fā)布時(shí)間:2021-10-27 16:03
  目的:建立一種新的大鼠腎小管上皮細(xì)胞NRK-52E缺氧/復(fù)氧模型,為下一步實(shí)驗(yàn)選擇合適的缺氧/復(fù)氧時(shí)間點(diǎn)。方法:本實(shí)驗(yàn)使用大鼠NRK-52E細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)分為對(duì)照組及實(shí)驗(yàn)組,實(shí)驗(yàn)組分為缺氧2、4和6 h及缺氧后復(fù)氧1、12和24 h組。缺氧時(shí)換用缺氧液,再置入N294%+O21%+CO25%缺氧環(huán)境;缺氧后換用含10%胎牛血清的DMEM/F12,置入空氣95%+ CO25%有氧環(huán)境,制作缺氧/復(fù)氧模型;臺(tái)盼藍(lán)攝取法進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)及檢測(cè)細(xì)胞存活率,分光光度法檢測(cè)培養(yǎng)基中的乳酸脫氫酶(LDH)含量,用流式細(xì)胞術(shù)(Annexin-V/PI雙標(biāo)記)及TUNEL法檢測(cè)細(xì)胞凋亡。結(jié)果:1、臺(tái)盤(pán)藍(lán)活細(xì)胞計(jì)數(shù)大鼠腎小管上皮細(xì)胞經(jīng)過(guò)缺氧/復(fù)氧處理后,與對(duì)照組比較,臺(tái)盼藍(lán)攝取率顯著提高,細(xì)胞存活率顯著下降;實(shí)驗(yàn)組中,復(fù)氧后細(xì)胞存活率較復(fù)氧前明顯降低,在R12到達(dá)最低值,隨之逐漸升高,但是在R24時(shí)仍較復(fù)氧前降低(P<0.05)。2、LDH檢測(cè)大鼠腎小管上皮細(xì)胞經(jīng)過(guò)缺氧/復(fù)氧處理后,LDH含量升高。實(shí)驗(yàn)組中,復(fù)氧后LDH值較復(fù)氧前明顯升高(P<0.05),在R12到達(dá)最高值,隨之逐漸降低,但是在R24... 

【文章來(lái)源】:山西醫(yī)科大學(xué)山西省

【文章頁(yè)數(shù)】:38 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

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英文摘要
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材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附圖
綜述
    正文
    參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)介
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]人近曲腎小管上皮細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷模型的建立[J]. 杜逸亭,董文斌,王明勇,航永倫.  中國(guó)危重病急救醫(yī)學(xué). 2005(10)
[2]血管緊張素Ⅱ通過(guò)抑制AKT/蛋白激酶B磷酸化誘導(dǎo)腎小管上皮細(xì)胞凋亡[J]. 朱吉莉,丁國(guó)華,王學(xué)玉.  中華腎臟病雜志. 2005(03)
[3]Cyr61基因過(guò)表達(dá)對(duì)人腎小管上皮細(xì)胞凋亡的影響[J]. 沈?qū)W飛,梅長(zhǎng)林,張巖,趙海丹,劉亞偉,戴兵,王文靖,許濤.  腎臟病與透析腎移植雜志. 2005(01)
[4]急性腎功能衰竭腎小管上皮細(xì)胞凋亡機(jī)制[J]. 黃燕飛,李瑛.  腎臟病與透析腎移植雜志. 2004(03)
[5]缺氧與復(fù)氧對(duì)腦動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮合酶Ⅲ表達(dá)的影響[J]. 宋振舉,楊光田,陸德琴,王迪潯.  中國(guó)危重病急救醫(yī)學(xué). 2003(09)
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[7]多囊腎病囊腫襯里上皮細(xì)胞增生與凋亡的研究[J]. 原愛(ài)紅,梅長(zhǎng)林.  腎臟病與透析腎移植雜志. 2001(01)



本文編號(hào):3461931

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