目的:探討牛抵抗素的促炎效應以及與TLR4/MyD88依賴途徑的聯(lián)系。方法:本試驗采用終濃度為100 ng/ml的牛抵抗素誘導牛肺泡巨噬細胞0、1.5、3、6、12、24 h,采用實時熒光定量PCR（Real-time PCR）檢測TLR4/MyD88依賴途徑信號通路相關基因（TLR4、MyD88、IRAK4、NF-κB）mRNA表達量,免疫印跡法（Western blot）檢測抵抗素誘導12 h后上述蛋白表達,酶聯(lián)免疫分析法（ELISA）檢測細胞上清中細胞因子IL-6、IL-1β、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）表達水平。結果:牛肺泡巨噬細胞經(jīng)100 ng/ml終濃度抵抗素誘導后,TLR4、MyD88、IRAK4、NF-κB基因表達量6 h極顯著上調(diào)（P<0.01）,12 h達到峰值;蛋白表達量在12 h極顯著上調(diào)（P<0.01）;促炎細胞因子IL-6、IL-1β和TNF-α于1.5 h后極顯著升高且呈時間依賴效應（P<0.01）。結論:牛抵抗素可誘導牛肺泡巨噬細胞釋放IL-6、IL-1β和TNF-α等促炎細胞因子,促進細胞炎癥反應,這可能與TLR4/MyD88依賴途... 

【文章來源】：中國免疫學雜志. 2019,35(19)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 牛肺泡巨噬細胞的采集與分組
        1.2.2 實時熒光定量
        1.2.3 Western blot法檢測牛肺泡巨噬細胞中TLR4、MyD88、IRAK4、NF-κB等的蛋白水平
        1.2.4 ELISA檢測牛肺泡巨噬細胞上清液中IL-6、IL-1β和TNF-α濃度
    1.3 數(shù)據(jù)處理
2 結果
    2.1 抵抗素促進牛肺泡巨噬細胞TLR4、MyD88、IRAK4和NF-κB的mRNA表達
    2.2 抵抗素上調(diào)牛肺泡巨噬細胞TLR4、MyD88、IRAK4和NF-κB蛋白表達
    2.3 抵抗素增加牛肺泡巨噬細胞IL-6、IL-1β和TNF-α的釋放
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3460066