本文關(guān)鍵詞：間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)不成熟樹突狀細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用及其機(jī)制研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：[研究背景]間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs),是一種可以自我更新和分化為多個(gè)胚層細(xì)胞的多能細(xì)胞。目前,間充質(zhì)干細(xì)胞已經(jīng)從多種組織或器官中分離純化獲得,并且具有免疫調(diào)節(jié)的特點(diǎn)和不易形成畸胎瘤的安全性。上述特點(diǎn)使MSCs受到了廣泛的關(guān)注,尤其是在再生醫(yī)學(xué)和組織工程領(lǐng)域。本實(shí)驗(yàn)室前期的研究已經(jīng)從小鼠骨髓中分離純化得到原始的間充質(zhì)干細(xì)胞,并應(yīng)用干細(xì)胞表面標(biāo)志Sca-1對(duì)所獲得的細(xì)胞進(jìn)行純化,得到了Sca-1+MSCs亞群,這種細(xì)胞亞群具有成骨分化和脂肪形成的能力,并且具有一定的免疫調(diào)節(jié)特性。同時(shí)發(fā)現(xiàn),Sca-1+MSCs細(xì)胞亞群具有誘導(dǎo)造血干祖細(xì)胞分化生成調(diào)節(jié)型樹突狀細(xì)胞(DC)的特性,并在細(xì)胞的形態(tài)、表面標(biāo)志和體內(nèi)體外功能等方面研究了所誘導(dǎo)生成的DC所具有的生物學(xué)特點(diǎn),初步表明MSCs可以影響DCs的命運(yùn)。然而MSCs對(duì)不成熟樹突狀細(xì)胞(imDCs)命運(yùn)的影響及其作用機(jī)制尚不清楚,本論文則集中討論Sca-1+MSCs細(xì)胞亞群對(duì)imDCs的免疫調(diào)節(jié)作用以及機(jī)制。 [研究目的]1.從小鼠骨髓中分離純化Sca-1+MSC,并研究其免疫調(diào)節(jié)作用,尤其是對(duì)imDC命運(yùn)的影響；2.比較三種DC亞群的特點(diǎn),尋找與之相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子;3.研究Notch抑制劑(DAPT)在Sca-1+MSC誘導(dǎo)調(diào)節(jié)性DC生成中的作用。 [研究方法]1.磁珠分選純化Sca-1+MSC,檢測(cè)其生物學(xué)特性,包括生長(zhǎng)曲線、細(xì)胞周期、細(xì)胞表型鑒定以及成脂成骨分化能力；2.體外培養(yǎng)imDCs和maDCs,并將Sca-1+MSC和imDCs共培養(yǎng),流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)調(diào)節(jié)型DC的生成,ELISA實(shí)驗(yàn)尋找共培養(yǎng)體系中發(fā)揮關(guān)鍵誘導(dǎo)作用的細(xì)胞因子,Western bloting實(shí)驗(yàn)檢測(cè)不同DC亞群之間轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)的差異。 [研究結(jié)果]1.小鼠骨髓中存在Sca-1+MSC:2.Sca-1+MSC具有非常典型的干細(xì)胞特征：梭形或紡錘形的形態(tài)、對(duì)數(shù)期生長(zhǎng)曲線、G0/G1期細(xì)胞比例高、高表達(dá)干細(xì)胞表面分子,以及具有分化為脂肪細(xì)胞和成骨細(xì)胞的能力。3.Sca-1+MSCs能夠誘導(dǎo)imDC生成CD11bhighlalowCDllclow regDCs,與imDCs口maDCs在細(xì)胞表型、細(xì)胞因子分泌和細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)等方面均有所不同。4.Sca-1+MSCs抑制imDCs的成熟,LPS的作用也不能使其發(fā)生改變。5.IRF8與炎性因子(IL-12、TNF-α)的分泌有關(guān),在regDC中,IRF8表達(dá)量下調(diào),ELISA結(jié)果顯示IL-12和TNF-a的分泌水平降低,而IL-10的分泌水平較高,這表明Sca-1+MSCs對(duì)其具有一定的調(diào)節(jié)作用。6.在培養(yǎng)體系中加入Notch抑制劑(DAPT)后,IRF8表達(dá)量重新上調(diào),IL-12和TNF-α的分泌水平也隨之升高,提示Notch抑制劑(DAPT)可以改變Sca-1+MSCs對(duì)imDCs的誘導(dǎo)作用。 [結(jié)論]Sca-1+MSC能夠誘導(dǎo)imDCs分化生成CD11bhighlalowCD11clow調(diào)節(jié)型DC,表現(xiàn)出免疫調(diào)節(jié)作用,而Notch抑制劑(DAPT)可以影響Sca-1+MSC的免疫調(diào)節(jié)作用。
【關(guān)鍵詞】：小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 調(diào)節(jié)型樹突狀細(xì)胞 IRF8 Notch抑制劑(DAPT)
【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R329.2
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• ABSTRACT6-8
• 第一部分 小鼠骨髓來源的多能干細(xì)胞的生物學(xué)特性8-26
• 前言8-9
• 材料與方法9-14
• 結(jié)果與分析14-17
• 討論17-20
• 結(jié)論20-21
• 參考文獻(xiàn)21-26
• 第二部分 Sca-1~+MSc誘導(dǎo)imDC生成新型調(diào)節(jié)性樹突細(xì)胞26-46
• 前言26-28
• 材料與方法28-34
• 結(jié)果與分析34-39
• 討論39-41
• 結(jié)論41-42
• 參考文獻(xiàn)42-46
• 綜述46-64
• 參考文獻(xiàn)53-64
• 中英文縮略詞表64-66
• 論文題錄66-68
• 致謝68-70

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 袁茵;陳丹亮;陳璇;邵紅偉;黃樹林;;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞通過激活Notch信號(hào)通路促進(jìn)白血病細(xì)胞株Jurkat的體外存活(英文)[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2014年04期

2 彭正軍;劉路;凌均h

本文編號(hào)：343488