目的:利用Agilent基因芯片篩查ApoE^-/-小鼠在動(dòng)脈粥樣硬化（AS）不同階段（10周齡、15周齡和25周齡）炎癥基因的表達(dá)譜變化,并利用RT-qPCR對(duì)篩選出的差異基因進(jìn)行驗(yàn)證和演變分析。方法:60只雄性ApoE^-/-小鼠隨機(jī)分為3組,每組20只,設(shè)定10周齡為AS初期組,15周齡為AS早期組,25周齡為AS后期組,相同遺傳背景的C57BL/6J野生型小鼠作為空白對(duì)照組。差異基因篩選采用Cy3標(biāo)記的cRNA和基因芯片雜交,經(jīng)洗脫、掃描圖像、提取數(shù)據(jù)和標(biāo)準(zhǔn)化后,篩選出P≤0.05且上調(diào)或下調(diào)倍數(shù)≥2.0的差異基因。最后對(duì)篩選出的上述基因進(jìn)行RT-qPCR定量分析。結(jié)果:（1）與對(duì)照組相比,ApoE^-/-小鼠顯著變化的差異基因?yàn)?0周齡895個(gè),15周齡540個(gè),25周齡591個(gè);（2）對(duì)差異基因功能進(jìn)行GO條目分析,并去除與AS炎癥反應(yīng)無(wú)關(guān)的基因后選定白細(xì)胞介素12a（IL-12a）、基質(zhì)金屬肽酶12（MMP-12）、IL-1β、生長(zhǎng)分化因子15（GDF-15）和干擾素γ（IFN-γ）為目標(biāo)差異基因;（3）目標(biāo)差異... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)病理生理雜志. 2019,35(09)北大核心CSCD

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【部分圖文】：

＊＊P＜0.01vscontrolgroup．圖1不同周齡ApoE－/－小鼠炎癥差異基因mＲNA表達(dá)的ＲT-qPCＲ定量

Figure1．ＲT-qPCＲwasusedtodetectthemＲNAexpressionofdifferentialinflammatorygenesindifferentweeksofApoE－/－mice．Mean±SD．n=15．*P＜0.05，＊＊P＜0.01vscontrolgroup．圖1不同周齡ApoE－/－小鼠炎癥差異基因mＲNA表達(dá)的ＲT-qPCＲ定量Figure2．Thedifferentialexpressiontendencyoftheinflammato-rygenesindifferentweeksofApoE－/－mice．圖2不同周齡ApoE－/－小鼠炎癥差異基因的表達(dá)趨勢(shì)圖ApoE－/－小鼠IL-6、MCP-1和TNF-α表達(dá)均呈上升趨勢(shì)，且周齡之間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。荊文等［5］檢測(cè)1、2、3月齡ApoE－/－小鼠主動(dòng)脈中11個(gè)特定炎癥相關(guān)基因的時(shí)序表達(dá)特點(diǎn)，發(fā)現(xiàn)ApoE－/－小鼠與同齡WT小鼠相比，1、2、3月齡時(shí)IL-1β的mＲNA表達(dá)水平均顯著上調(diào)，同時(shí)1月齡時(shí)VCAM-1、IкB-α、TGF-β和SOD1，2月齡時(shí)PDGF-α和CD36，3月齡時(shí)TNF-α和MMP-2的mＲNA表達(dá)水平與同齡WT小鼠相比均顯著上調(diào)。陳冰［6］等觀察ApoE－/－小鼠外周血單核細(xì)胞Mo及其亞型Ly6chi在4、8、12和16周齡的比例變化，發(fā)現(xiàn)表達(dá)單核細(xì)胞趨化蛋白1受體CCＲ2，并分泌TNF-α、IL-6等炎癥因子的炎癥型Ly6chi表型僅在8周齡時(shí)升高，具有免疫保護(hù)功能的Mo表型在4周即高于同周齡C57BL/6J小鼠，8周齡開(kāi)始有所下降并持續(xù)至16周。提示天然免疫系統(tǒng)可能在AS病變8周齡時(shí)開(kāi)啟炎癥反應(yīng)的高峰。徐芳［7］等觀察不同周齡ApoE－/－小鼠血管外膜成纖維細(xì)胞的表型變化，發(fā)現(xiàn)10周齡和15周齡ApoE－/－小鼠的血管

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]小鼠動(dòng)脈粥樣硬化模型中miR-23a與血清炎癥因子相關(guān)性的研究[J]. 孫婷婷,王珺曉,徐揚(yáng),仉珊珊,劉亞坤,羅善順.  哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2017(04)
[2]阿托伐他汀對(duì)ApoE基因敲除小鼠血管外膜成纖維細(xì)胞表型的影響[J]. 徐芳,劉穎,齊潔,石磊,胡業(yè)佳,王蔚琛,蔡虹靜,劉巍,李鈺伶.  中國(guó)病理生理雜志. 2016(09)
[3]黃連解毒湯對(duì)apoE基因敲除小鼠單核細(xì)胞發(fā)育的影響[J]. 陳冰,孔雅嫻,李玉梅,薛欣,張劍平,曾輝,胡鏡清,馬雅鑾.  中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2016(01)
[4]超聲生物顯微鏡在ApoE基因敲除小鼠動(dòng)脈粥樣硬化病變與C反應(yīng)蛋白的相關(guān)性研究[J]. 李嶸娟,楊婭,謝謹(jǐn)捷,蘇瑞娟,江波,孫琪瑋,李宜嘉,Qin Gangjian.  心肺血管病雜志. 2014(03)



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