發(fā)布時間：2021-10-12 23:09

　　目的:利用Agilent基因芯片篩查ApoE^-/-小鼠在動脈粥樣硬化（AS）不同階段（10周齡、15周齡和25周齡）炎癥基因的表達譜變化,并利用RT-qPCR對篩選出的差異基因進行驗證和演變分析。方法:60只雄性ApoE^-/-小鼠隨機分為3組,每組20只,設定10周齡為AS初期組,15周齡為AS早期組,25周齡為AS后期組,相同遺傳背景的C57BL/6J野生型小鼠作為空白對照組。差異基因篩選采用Cy3標記的cRNA和基因芯片雜交,經洗脫、掃描圖像、提取數據和標準化后,篩選出P≤0.05且上調或下調倍數≥2.0的差異基因。最后對篩選出的上述基因進行RT-qPCR定量分析。結果:（1）與對照組相比,ApoE^-/-小鼠顯著變化的差異基因為10周齡895個,15周齡540個,25周齡591個;（2）對差異基因功能進行GO條目分析,并去除與AS炎癥反應無關的基因后選定白細胞介素12a（IL-12a）、基質金屬肽酶12（MMP-12）、IL-1β、生長分化因子15（GDF-15）和干擾素γ（IFN-γ）為目標差異基因;（3）目標差異... 

【文章來源】：中國病理生理雜志. 2019,35(09)北大核心CSCD

【文章頁數】：6 頁

【部分圖文】：

＊＊P＜0.01vscontrolgroup．圖1不同周齡ApoE－/－小鼠炎癥差異基因mＲNA表達的ＲT-qPCＲ定量

Figure1．ＲT-qPCＲwasusedtodetectthemＲNAexpressionofdifferentialinflammatorygenesindifferentweeksofApoE－/－mice．Mean±SD．n=15．*P＜0.05，＊＊P＜0.01vscontrolgroup．圖1不同周齡ApoE－/－小鼠炎癥差異基因mＲNA表達的ＲT-qPCＲ定量Figure2．Thedifferentialexpressiontendencyoftheinflammato-rygenesindifferentweeksofApoE－/－mice．圖2不同周齡ApoE－/－小鼠炎癥差異基因的表達趨勢圖ApoE－/－小鼠IL-6、MCP-1和TNF-α表達均呈上升趨勢，且周齡之間比較有統(tǒng)計學差異。荊文等［5］檢測1、2、3月齡ApoE－/－小鼠主動脈中11個特定炎癥相關基因的時序表達特點，發(fā)現(xiàn)ApoE－/－小鼠與同齡WT小鼠相比，1、2、3月齡時IL-1β的mＲNA表達水平均顯著上調，同時1月齡時VCAM-1、IкB-α、TGF-β和SOD1，2月齡時PDGF-α和CD36，3月齡時TNF-α和MMP-2的mＲNA表達水平與同齡WT小鼠相比均顯著上調。陳冰［6］等觀察ApoE－/－小鼠外周血單核細胞Mo及其亞型Ly6chi在4、8、12和16周齡的比例變化，發(fā)現(xiàn)表達單核細胞趨化蛋白1受體CCＲ2，并分泌TNF-α、IL-6等炎癥因子的炎癥型Ly6chi表型僅在8周齡時升高，具有免疫保護功能的Mo表型在4周即高于同周齡C57BL/6J小鼠，8周齡開始有所下降并持續(xù)至16周。提示天然免疫系統(tǒng)可能在AS病變8周齡時開啟炎癥反應的高峰。徐芳［7］等觀察不同周齡ApoE－/－小鼠血管外膜成纖維細胞的表型變化，發(fā)現(xiàn)10周齡和15周齡ApoE－/－小鼠的血管

【參考文獻】：
期刊論文
[1]小鼠動脈粥樣硬化模型中miR-23a與血清炎癥因子相關性的研究[J]. 孫婷婷,王珺曉,徐揚,仉珊珊,劉亞坤,羅善順.  哈爾濱醫(yī)科大學學報. 2017(04)
[2]阿托伐他汀對ApoE基因敲除小鼠血管外膜成纖維細胞表型的影響[J]. 徐芳,劉穎,齊潔,石磊,胡業(yè)佳,王蔚琛,蔡虹靜,劉巍,李鈺伶.  中國病理生理雜志. 2016(09)
[3]黃連解毒湯對apoE基因敲除小鼠單核細胞發(fā)育的影響[J]. 陳冰,孔雅嫻,李玉梅,薛欣,張劍平,曾輝,胡鏡清,馬雅鑾.  中國中西醫(yī)結合雜志. 2016(01)
[4]超聲生物顯微鏡在ApoE基因敲除小鼠動脈粥樣硬化病變與C反應蛋白的相關性研究[J]. 李嶸娟,楊婭,謝謹捷,蘇瑞娟,江波,孫琪瑋,李宜嘉,Qin Gangjian.  心肺血管病雜志. 2014(03)



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