代謝型谷氨酸受體5-脂多糖作用小膠質(zhì)細(xì)胞的全新靶點(diǎn)初步研究
發(fā)布時(shí)間:2021-09-30 05:55
正常中樞神經(jīng)系統(tǒng)因血腦屏障的存在使免疫系統(tǒng)的成分不能進(jìn)入,被認(rèn)為是免疫特免區(qū)。然而,越來(lái)越多的證據(jù)顯示,中樞與免疫系統(tǒng)存在著相互作用。神經(jīng)通路參與了細(xì)胞與體液免疫反應(yīng)的調(diào)控,而免疫系統(tǒng)也主要通過(guò)細(xì)胞因子來(lái)影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)的功能。中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)有免疫受體的分布,而免疫系統(tǒng)也有神經(jīng)受體的表達(dá),它們共用一套相同的信號(hào)分子(神經(jīng)遞質(zhì),神經(jīng)肽,細(xì)胞因子等)。長(zhǎng)久以來(lái),神經(jīng)-免疫間相互作用的研究都局限于其信號(hào)分子與受體間的作用,在神經(jīng)細(xì)胞上往往同時(shí)有免疫受體的表達(dá),而在免疫細(xì)胞,特別是小膠質(zhì)細(xì)胞上同樣也可見(jiàn)到神經(jīng)受體的表達(dá),那么在這兩類(lèi)受體之間除通過(guò)神經(jīng)遞質(zhì)或免疫因子產(chǎn)生相互作用外,是否在受體蛋白之間存在直接的相互作用,目前尚未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。為此,本研究,擬以腦小膠質(zhì)細(xì)胞為切入點(diǎn),就小膠質(zhì)細(xì)胞免疫受體與神經(jīng)受體是否存在直接的蛋白作用進(jìn)行探討,期望所獲結(jié)果能有助于我們更好地理解神經(jīng)系統(tǒng)-免疫系統(tǒng)之間的聯(lián)系,并為臨床相關(guān)疾病的防治提供有益的理論基礎(chǔ)。小膠質(zhì)細(xì)胞廣泛分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi),參與腦內(nèi)的固有免疫反應(yīng),構(gòu)成中樞神經(jīng)系統(tǒng)抵御病原體入侵的第一防線,被認(rèn)為是正常中樞神經(jīng)系統(tǒng)中最有代表性的免疫細(xì)胞。小膠質(zhì)...
【文章來(lái)源】:中國(guó)人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學(xué)重慶市
【文章頁(yè)數(shù)】:148 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【部分圖文】:
-1處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的N9細(xì)胞(光鏡)
A:(20×) B:(40×)圖 2-1-2 處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的 EOC 20 細(xì)胞(光鏡)2.1.1.2.2 細(xì)胞蛋白提取方法小心除去培養(yǎng)液,細(xì)胞以 PBS 洗 3 次,在細(xì)胞培養(yǎng)瓶中加入合適體積的哺乳動(dòng)物細(xì)胞蛋白質(zhì)抽提試劑(按比例加入 100×的蛋白酶抑制劑),冰上放置 5min,以細(xì)胞刮收集細(xì)胞,吸取細(xì)胞混懸液入 EP 管,4℃,14000g,離心 20min,取上清液,分裝,(50μl/管),于-70℃凍存,另一部分上清用于檢測(cè)蛋白濃度2.1.1.2.3 蛋白質(zhì)定量方法(CBG 法)(1) Bradford 蛋白定量試劑的配制考馬斯亮藍(lán) G-250 0.1g95%乙醇 50ml85%磷酸 100ml雙蒸水定容至 1000ml, 濾紙過(guò)濾,避光保存。
34NMDAR1 TLR4 共定位圖 2-3-1 LPS 刺激前后 N9 細(xì)胞 TLR4 與 NMDAR1 受體的免疫熒光及共定位圖像紅色熒光代表 TLR4 受體,綠色熒光代表 NMDAR1 受體,黃色為合并后的共定位圖片。A,B,C,D,E 分別為 LPS 刺激 0,30min,1h,2h,4h 后的圖片,F(xiàn) 為一抗二抗都未用的陰性對(duì)照?qǐng)D片,G 為只用二抗未用一抗的陰性對(duì)照?qǐng)D片
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]選擇性代謝性谷氨酸受體5激動(dòng)劑CHPG對(duì)創(chuàng)傷性神經(jīng)元損傷的保護(hù)作用研究[J]. 陳繼軍,李隨芬,李超,趙鵬,尹文. 現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2011(24)
[2]代謝型谷氨酸受體5在大鼠急性腦缺血中的變化[J]. 張茂林,劉俊平,楊巧蓮,周立社,吳躍華. 包頭醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2007(05)
[3]代謝型谷氨酸受體的藥理學(xué)、生理學(xué)及其與癲癇的關(guān)系[J]. 劉子建. 中國(guó)組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志. 2003(01)
本文編號(hào):3415263
【文章來(lái)源】:中國(guó)人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學(xué)重慶市
【文章頁(yè)數(shù)】:148 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【部分圖文】:
-1處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的N9細(xì)胞(光鏡)
A:(20×) B:(40×)圖 2-1-2 處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的 EOC 20 細(xì)胞(光鏡)2.1.1.2.2 細(xì)胞蛋白提取方法小心除去培養(yǎng)液,細(xì)胞以 PBS 洗 3 次,在細(xì)胞培養(yǎng)瓶中加入合適體積的哺乳動(dòng)物細(xì)胞蛋白質(zhì)抽提試劑(按比例加入 100×的蛋白酶抑制劑),冰上放置 5min,以細(xì)胞刮收集細(xì)胞,吸取細(xì)胞混懸液入 EP 管,4℃,14000g,離心 20min,取上清液,分裝,(50μl/管),于-70℃凍存,另一部分上清用于檢測(cè)蛋白濃度2.1.1.2.3 蛋白質(zhì)定量方法(CBG 法)(1) Bradford 蛋白定量試劑的配制考馬斯亮藍(lán) G-250 0.1g95%乙醇 50ml85%磷酸 100ml雙蒸水定容至 1000ml, 濾紙過(guò)濾,避光保存。
34NMDAR1 TLR4 共定位圖 2-3-1 LPS 刺激前后 N9 細(xì)胞 TLR4 與 NMDAR1 受體的免疫熒光及共定位圖像紅色熒光代表 TLR4 受體,綠色熒光代表 NMDAR1 受體,黃色為合并后的共定位圖片。A,B,C,D,E 分別為 LPS 刺激 0,30min,1h,2h,4h 后的圖片,F(xiàn) 為一抗二抗都未用的陰性對(duì)照?qǐng)D片,G 為只用二抗未用一抗的陰性對(duì)照?qǐng)D片
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]選擇性代謝性谷氨酸受體5激動(dòng)劑CHPG對(duì)創(chuàng)傷性神經(jīng)元損傷的保護(hù)作用研究[J]. 陳繼軍,李隨芬,李超,趙鵬,尹文. 現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2011(24)
[2]代謝型谷氨酸受體5在大鼠急性腦缺血中的變化[J]. 張茂林,劉俊平,楊巧蓮,周立社,吳躍華. 包頭醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2007(05)
[3]代謝型谷氨酸受體的藥理學(xué)、生理學(xué)及其與癲癇的關(guān)系[J]. 劉子建. 中國(guó)組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志. 2003(01)
本文編號(hào):3415263
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