G蛋白偶聯(lián)受體（G protein-coupled receptors, GPCR）作為最大的人膜蛋白受體家族，在細(xì)胞存活、維持細(xì)胞平衡、免疫監(jiān)測(cè)、分子轉(zhuǎn)運(yùn)及神經(jīng)調(diào)節(jié)等方面具有重要作用。因此目前全球市場(chǎng)70%以上的治療藥物都是針對(duì)GPCR,因此日益成為生物醫(yī)藥研究的重點(diǎn)、熱點(diǎn)和難點(diǎn)。但是GPCR高度疏水的7次跨膜結(jié)構(gòu)，靈活的構(gòu)象仍然給體外研究其功能活性造成了巨大的困難，因此構(gòu)建一種篩選GPCR功能活性的平臺(tái)無疑對(duì)藥物高通量篩選具有重要意義。目前新藥篩選方法主要是在藥物與某一種細(xì)胞GPCR相互作用后，借助熒光共振能量轉(zhuǎn)移（fluorescence resonance energy transfer, FRET）等生物物理方法，檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)分子間相互作用激發(fā)的化學(xué)熒光信號(hào)，從而發(fā)現(xiàn)具有特定療效的藥物。雖然這種在細(xì)胞水平的方法穩(wěn)定、適于自動(dòng)化，但是仍然存在無效信號(hào)或信號(hào)偏差導(dǎo)致篩選過程復(fù)雜化，成本高、集成度小、篩選效率低。因?yàn)椴《景ど嫌性S多規(guī)則排列的糖蛋白，如HSV-1的主要包膜糖蛋白gB（glycoprotein B, gB）、gC （glycoprotein C, gC）,所以本研究中提... 

【文章來源】：重慶大學(xué)重慶市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：99 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

GPCR上游信號(hào)傳導(dǎo)簡圖

1 緒 論控人體內(nèi)特定信號(hào)通路的活性化合物、抗體和基因 (Alan, 1999; Williams C,2004)，并得到相應(yīng)數(shù)據(jù)庫支持運(yùn)轉(zhuǎn)。高通量方法從系統(tǒng)生物學(xué)的角度進(jìn)行研究，相比傳統(tǒng)的研究方法具有微量、快速、靈敏和準(zhǔn)確的優(yōu)勢(shì)，并得以廣泛應(yīng)用。藥物 HTS 能在短時(shí)間內(nèi)，進(jìn)行低成本的最大數(shù)量的進(jìn)行活性藥物的篩選，簡言之就是可以通過一次實(shí)驗(yàn)獲得藥物的大量的信息，并從中找到有價(jià)值的信息，為許多復(fù)雜疾病機(jī)理的治療帶來了希望。

钚�、�?蠆?锏壬稈×煊蛺逑至飼八?從械撓τ眉壑?（圖1.3）。(Glickman JF&Schmid A, 2008；Hu S et al., 2010, Taylor HD et al., 2007)。例如目前主要的藥物 HTS方法有以下幾類：1.2.1 細(xì)胞標(biāo)記的藥物 HTS ( signal pathway dependent )藥物作用 GPCR 后，必然對(duì)細(xì)胞內(nèi)基因表達(dá)進(jìn)行調(diào)控，所以藥物的藥理活性主要體現(xiàn)在細(xì)胞內(nèi)一系列信號(hào)分子的時(shí)空變化上，所以我們可以通過對(duì)這些分子進(jìn)行熒光標(biāo)記來檢測(cè)這些變化，從而對(duì)藥效進(jìn)行表征。主要技術(shù)方法如表 1.1( Cheng Z et al., 2010; Labrecque J et al., 2009; Liu K et al., 2008; Ru Z, 2012; Zhao Xet al.,2008 )。5


本文編號(hào)：3397908