目的探討Wnt3a單獨(dú)以及聯(lián)合骨形態(tài)發(fā)生蛋白9（BMP9）誘導(dǎo)C3H10T1/2細(xì)胞向心肌細(xì)胞樣細(xì)胞分化的作用。方法利用HEK293細(xì)胞擴(kuò)增重組腺病毒AdGFP、AdBMP9、AdWnt3a;分別轉(zhuǎn)染C3H10T1/2細(xì)胞3周后,倒置顯微鏡和熒光顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)及綠色熒光蛋白表達(dá);流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率;Westernblot法、免疫熒光技術(shù)及實(shí)時(shí)定量PCR（qRT-PCR）分別檢測(cè)縫隙連接蛋白43（Cx43）、肌鈣蛋白T（cTnT）、GATA結(jié)合蛋白4（GATA4）、心肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2C（MEF2C）的表達(dá)。結(jié)果經(jīng)HEK293細(xì)胞擴(kuò)增可得到高滴度的重組腺病毒;轉(zhuǎn)染C3H10T1/2細(xì)胞3周后,Wnt3a組Cx43、cTnT、GATA4、MEF2C的表達(dá)量與空白組比較無明顯差異;Wnt3a聯(lián)合BMP9組的Cx43、cTnT、GATA4、MEF2C基因的表達(dá)量顯著高于空白組、GFP組和Wnt3a組,與單獨(dú)BMP9組相比無顯著性差異。結(jié)論Wnt3a不能單獨(dú)誘導(dǎo)C3H10T1/2細(xì)胞向心肌細(xì)胞樣細(xì)胞分化;Wnt3a聯(lián)合BMP9可誘導(dǎo)C3H10T1/2細(xì)胞向心肌細(xì)胞樣細(xì)胞分化。 

【文章來源】：細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2015,31(04)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：4 頁

【文章目錄】：
1材料和方法
    1. 1材料
    1. 2方法
2結(jié)果
    2.1重組腺病毒的擴(kuò)增
    2.2C3H10T1/2細(xì)胞形態(tài)觀察
    2.3流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率
    2.4Westernblot法檢測(cè)心肌特異性蛋白Cx43、cTnT的表達(dá)
    2.5免疫熒光技術(shù)定位Cx43在細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)
    2.6qRT-PCR檢測(cè)心肌特異性基因GATA4、MEF2C表達(dá)
3討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Stem cell mechanisms during left ventricular remodeling post-myocardial infarction:Repair and regeneration[J]. Rogelio Zamilpa,Mary M Navarro,Iris Flores,Sy Griffey.  World Journal of Cardiology. 2014(07)
[2]大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化為心肌樣細(xì)胞的研究[J]. 顧健,王愛玲,郝玉瑜,張夢(mèng)達(dá),孫繼敏.  醫(yī)學(xué)綜述. 2014(06)
[3]基因槍介導(dǎo)的骨形態(tài)發(fā)生蛋白2基因轉(zhuǎn)染治療陳舊性骨缺損[J]. 朱小萌,王翀,宋興華,詹玉林,李文舉.  中國組織工程研究. 2014(11)
[4]心肌微環(huán)境誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌樣細(xì)胞的分化(英文)[J]. 胡波,高攀,馬志峰,張志峰,張中明,袁紅花,董紅燕.  中國組織工程研究. 2012(32)
[5]BMP9對(duì)C3H10T1/2干細(xì)胞向心肌樣細(xì)胞分化的影響[J]. 譚金童,陳沅,向平.  重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2009(06)
[6]三七皂甙誘導(dǎo)骨髓基質(zhì)細(xì)胞分化為心肌樣細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 孔曉丹,曲鵬,王彥,李玲,富晶.  中國心血管病研究雜志. 2005(07)
[7]骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外分化為心肌樣細(xì)胞相關(guān)調(diào)控基因的時(shí)序表達(dá)[J]. 張文,田杰,江德勤,張蕾,朱靜,陳沅.  中華心血管病雜志. 2004(11)



本文編號(hào)：3394995