SARS-CoV結(jié)構(gòu)蛋白的抗原性鑒定、DNA免疫與RNA干擾的研究
發(fā)布時間:2021-08-31 08:46
2002年末始發(fā)于中國廣東省的非典型肺炎(infectious atypical pneumonia,),隨后也被稱為嚴重急性呼吸綜合征(The severe acute respiratory syndrome,SARS),具有高度傳染性與致病性。疫情于2003年2月傳播至香港,隨后迅速向全球各地蔓延。其致病因子于2003年3月被鑒定為一種新的冠狀病毒,被命名為SARS冠狀病毒(SARS-CoV)。冠狀病毒是一類球形、有包膜的病毒,基因組為長約30 kb的單股正鏈RNA,主要引起人和動物的呼吸道與腸道疾病。SARS-CoV的基因組結(jié)構(gòu)為:5′-帽狀結(jié)構(gòu)-復(fù)制酶(rep)-刺突糖蛋白(S)-小包膜蛋白(E)-膜糖蛋白(M)-核衣殼蛋白(N)-polyA尾-3′。本研究用大腸桿菌表達出了SARS-CoV的結(jié)構(gòu)蛋白及3CLpro蛋白,檢測了SARS恢復(fù)期患者血清中的抗體情況,構(gòu)建了S與N蛋白的DNA疫苗,進行了小鼠免疫試驗,并篩選出了數(shù)段可特異阻斷S、N基因表達的小干擾RNA(siRNA)。該系列研究對于了解SARS-CoV的免疫學(xué)特點及為發(fā)展SARS-CoV感染的防...
【文章來源】:中國人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué)上海市 211工程院校
【文章頁數(shù)】:84 頁
【學(xué)位級別】:博士
【部分圖文】:
蛋白表達質(zhì)粒的鑒定1234567圖ZN、E蛋白表達質(zhì)粒的鑒定
C/MCll0E3CLpRoPPROEXHTapGEX一4T一1pGEX一4T一1ROSettaBL21(DE3)BL21(DE3)30KDa34kDa60kDa2345678910圖15蛋白表達質(zhì)粒的鑒定NAmarkerDL2000;2,PCRProductof5300:3,S300digestedwithEcoRI:4,PCRProduetof0:5,PET-S240di羅stedwithECoRI乙粉Jol:6,PCRduetof5338;7,PGEX一5338digestedwithRI/入勺tl:8,PCRProduetof5324:9,PGEX一5324stedwithECoRI幼白rl;10,DNAmarkerDL150001234567圖ZN、E蛋白表達質(zhì)粒的鑒定l,DL2000:2,PCRProduetofN42PBV220一N422digestedwithBamHI汪七oRPHT-N422digestedwithBamHI伍乞oRPCRProduetofE:6,PGEX一EdigestedEcoRI/入勺rl;7,DL15000
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【參考文獻】:
期刊論文
[1]SARS-CoV核衣殼蛋白抗原性鑒定和基因免疫研究[J]. 柯金山,趙平,張景熙,秦照玲,于嘉屏,戚中田. 中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志. 2004(08)
[2]SARS患者血清特異性IgG抗體的滴度變化[J]. 李剛,陳雪娟,陳文思,代志琰,崇雨田,楊林,江元森,姚集魯. 熱帶醫(yī)學(xué)雜志. 2003(03)
[3]傳染性非典型肺炎患者體液免疫特征初步研究[J]. 匡鐵吉,董梅,梁艷,雷紅,孟祥紅,何菊芳,佟愛華,楊彩娥. 軍醫(yī)進修學(xué)院學(xué)報. 2003(03)
[4]嚴重急性呼吸綜合征康復(fù)者志愿特殊獻漿前健康檢查分析[J]. 崔徐江,王憬惺,聶詠梅,陳會友,袁理,鄭鵬,高軍瑞,李曉帆,張偉玲,黃可君,任俊. 中國輸血雜志. 2003(04)
[5]SARS病人SARS冠狀病毒核殼抗原抗體的變化規(guī)律[J]. 車小燕,郝衛(wèi),丘立文,潘玉先,廖志勇,徐華,陳金軍,候金林,Patrick CY Woo,Susanna KP Lau,Kwok Yung Yuen,黃震. 第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報. 2003(07)
[6]SARS病毒核衣殼蛋白、膜蛋白在大腸桿菌中的高效表達和純化[J]. 易艷萍,李楚芳,石玉嶺,李林海,李平,黃維,王升啟,馬清鈞,曹誠. 生物工程學(xué)報. 2003(04)
[7]非典型肺炎病例標(biāo)本中新型冠狀病毒的分離與鑒定[J]. 祝慶余,秦鄂德,王翠娥,于曼,司炳銀,范寶昌,常國輝,彭文明,楊保安,姜濤,李豫川,鄧永強,劉洪,甘永華. 中國生物工程雜志. 2003(04)
[8]表達HCV核心蛋白的重組減毒鼠傷寒沙門菌口服免疫小鼠的研究[J]. 趙平,曹潔,曹明媚,朱詩應(yīng),戚中田. 自然科學(xué)進展. 2002(09)
本文編號:3374594
【文章來源】:中國人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué)上海市 211工程院校
【文章頁數(shù)】:84 頁
【學(xué)位級別】:博士
【部分圖文】:
蛋白表達質(zhì)粒的鑒定1234567圖ZN、E蛋白表達質(zhì)粒的鑒定
C/MCll0E3CLpRoPPROEXHTapGEX一4T一1pGEX一4T一1ROSettaBL21(DE3)BL21(DE3)30KDa34kDa60kDa2345678910圖15蛋白表達質(zhì)粒的鑒定NAmarkerDL2000;2,PCRProductof5300:3,S300digestedwithEcoRI:4,PCRProduetof0:5,PET-S240di羅stedwithECoRI乙粉Jol:6,PCRduetof5338;7,PGEX一5338digestedwithRI/入勺tl:8,PCRProduetof5324:9,PGEX一5324stedwithECoRI幼白rl;10,DNAmarkerDL150001234567圖ZN、E蛋白表達質(zhì)粒的鑒定l,DL2000:2,PCRProduetofN42PBV220一N422digestedwithBamHI汪七oRPHT-N422digestedwithBamHI伍乞oRPCRProduetofE:6,PGEX一EdigestedEcoRI/入勺rl;7,DL15000
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【參考文獻】:
期刊論文
[1]SARS-CoV核衣殼蛋白抗原性鑒定和基因免疫研究[J]. 柯金山,趙平,張景熙,秦照玲,于嘉屏,戚中田. 中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志. 2004(08)
[2]SARS患者血清特異性IgG抗體的滴度變化[J]. 李剛,陳雪娟,陳文思,代志琰,崇雨田,楊林,江元森,姚集魯. 熱帶醫(yī)學(xué)雜志. 2003(03)
[3]傳染性非典型肺炎患者體液免疫特征初步研究[J]. 匡鐵吉,董梅,梁艷,雷紅,孟祥紅,何菊芳,佟愛華,楊彩娥. 軍醫(yī)進修學(xué)院學(xué)報. 2003(03)
[4]嚴重急性呼吸綜合征康復(fù)者志愿特殊獻漿前健康檢查分析[J]. 崔徐江,王憬惺,聶詠梅,陳會友,袁理,鄭鵬,高軍瑞,李曉帆,張偉玲,黃可君,任俊. 中國輸血雜志. 2003(04)
[5]SARS病人SARS冠狀病毒核殼抗原抗體的變化規(guī)律[J]. 車小燕,郝衛(wèi),丘立文,潘玉先,廖志勇,徐華,陳金軍,候金林,Patrick CY Woo,Susanna KP Lau,Kwok Yung Yuen,黃震. 第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報. 2003(07)
[6]SARS病毒核衣殼蛋白、膜蛋白在大腸桿菌中的高效表達和純化[J]. 易艷萍,李楚芳,石玉嶺,李林海,李平,黃維,王升啟,馬清鈞,曹誠. 生物工程學(xué)報. 2003(04)
[7]非典型肺炎病例標(biāo)本中新型冠狀病毒的分離與鑒定[J]. 祝慶余,秦鄂德,王翠娥,于曼,司炳銀,范寶昌,常國輝,彭文明,楊保安,姜濤,李豫川,鄧永強,劉洪,甘永華. 中國生物工程雜志. 2003(04)
[8]表達HCV核心蛋白的重組減毒鼠傷寒沙門菌口服免疫小鼠的研究[J]. 趙平,曹潔,曹明媚,朱詩應(yīng),戚中田. 自然科學(xué)進展. 2002(09)
本文編號:3374594
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