目的:比較R848聯(lián)合PGE2促成熟樹突狀細胞（DCs）和IL-1β、IL-6、TNF-α聯(lián)合PGE2促成熟DCs的差異。方法:從外周血單個核細胞分選出CD14⁺單核細胞后,采用貼壁法在無血清培養(yǎng)基AIM-V中培養(yǎng)。用rhGM-CSF和rhIL-4誘導(dǎo)5 d獲得未成熟DCs后,分別用R848聯(lián)合PGE2或IL-1β、IL-6、TNF-α聯(lián)合PGE2促成熟2 d。采用流式細胞術(shù)檢測DCs表型、吞噬能力和存活率,通過混合淋巴細胞反應(yīng)檢測DCs刺激異體T細胞增殖的能力,ELISA檢測成熟DCs分泌細胞因子的能力以及細胞內(nèi)因子染色檢測誘導(dǎo)Th1/Th2細胞反應(yīng)的能力。結(jié)果:兩種方案促成熟DCs表達CD40、CD80、CD83、CD86、HLA-DR和CXCR4的水平均相似,其中CD40、CD80、CD83、CD86和HLA-DR陽性DCs的頻率均超過90%,而R848聯(lián)合PGE2促成熟DCs表達CCR7的水平高于IL-1β、IL-6、TNF-α聯(lián)合PGE2促成熟DCs。此外,兩種方案促成熟DCs的存活率、吞噬能力、刺激異體T細胞增殖的能力也相似。盡管兩種方案促成熟DCs均... 

【文章來源】：中國免疫學(xué)雜志. 2019,35(14)北大核心CSCD

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【部分圖文】：

不同方案促成熟DCs誘導(dǎo)Th1/Th2反應(yīng)的能力Fig．4CapacityofDCstoinduceTh1/Th2responses

rerepresentsphagocytosisabili-ty.Oneofthreeperformedexperimentsispresented.性細胞(即活細胞)的比例相似，分別為94.92%和92.83%。此外，和未成熟DCs相比，兩種方案促成熟DCs吞噬能力均顯著下降，分別為3.39%和2.06%(圖1)。2.3混合淋巴細胞反應(yīng)兩種方案促成熟DCs與去除了CD14+單核細胞的異體PBMCs(2×105)以1∶10的比例共培養(yǎng)4d，用CellTiter96?AQueous無放射性試劑進行檢測，結(jié)果顯示OD值(490nm)分別為0.61和0.53(P＞0.05)(圖2)。說明R848聯(lián)合PGE2促成熟DCs和IL-1β、IL-6、TNF-α聯(lián)合PGE2促成熟DCs刺激異體T細胞增殖的能力相似。2.4成熟DCs產(chǎn)生細胞因子IL-12p40、IL-12p70和IL-10的水平兩種方案促成熟DCs均可產(chǎn)生高水平IL-12p40，分別為814.52pg/ml和1447.96pg/ml;而R848聯(lián)合PGE2促成熟DCs產(chǎn)生IL-12p70的水平明顯高于IL-1β、IL-6、TNF-α聯(lián)合PGE2促成熟DCs，圖2混合淋巴細胞反應(yīng)結(jié)果Fig．2ResultsofmixedlymphocytereactionNote:*.P＞0.05.圖3不同方案促成熟DCs產(chǎn)生細胞因子的結(jié)果Fig．3ResultsofcytokineproductionsecretedbydifferentproceduresmaturedDCsNote:A，BandCwastheresultofIL-12p40，IL-12p70andIL-10pro-ductionsecretedbydifferentproceduresmaturedDCsrespective-ly.DCsmaturedbyR848plusPGE2producedhigherlevelsofIL-12p40，IL-12p70andIL-10.Resultsofcytokineproductionarepresentedasmeanoftwoindependentexperiments.甘麗等R848聯(lián)合PGE2促成熟樹突狀細胞產(chǎn)生高水平IL-1

。說明R848聯(lián)合PGE2促成熟DCs和IL-1β、IL-6、TNF-α聯(lián)合PGE2促成熟DCs刺激異體T細胞增殖的能力相似。2.4成熟DCs產(chǎn)生細胞因子IL-12p40、IL-12p70和IL-10的水平兩種方案促成熟DCs均可產(chǎn)生高水平IL-12p40，分別為814.52pg/ml和1447.96pg/ml;而R848聯(lián)合PGE2促成熟DCs產(chǎn)生IL-12p70的水平明顯高于IL-1β、IL-6、TNF-α聯(lián)合PGE2促成熟DCs，圖2混合淋巴細胞反應(yīng)結(jié)果Fig．2ResultsofmixedlymphocytereactionNote:*.P＞0.05.圖3不同方案促成熟DCs產(chǎn)生細胞因子的結(jié)果Fig．3ResultsofcytokineproductionsecretedbydifferentproceduresmaturedDCsNote:A，BandCwastheresultofIL-12p40，IL-12p70andIL-10pro-ductionsecretedbydifferentproceduresmaturedDCsrespective-ly.DCsmaturedbyR848plusPGE2producedhigherlevelsofIL-12p40，IL-12p70andIL-10.Resultsofcytokineproductionarepresentedasmeanoftwoindependentexperiments.甘麗等R848聯(lián)合PGE2促成熟樹突狀細胞產(chǎn)生高水平IL-12第14期·9761·

【參考文獻】：
期刊論文
[1]未成熟樹突狀細胞快速分離與體外誘導(dǎo)培養(yǎng)及其鑒定研究[J]. 朱娜,王海桃,李昌,李海僖,郭焱,金寧一.  中國免疫學(xué)雜志. 2017(07)
[2]白細胞介素10通過抑制自噬調(diào)節(jié)樹突狀細胞功能[J]. 屈玉蘭,鄧捷文,鄧常文,夏福燦,郭振紅,白沖.  中國免疫學(xué)雜志. 2017(03)



本文編號：3327160