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人外周血淋巴細胞增殖試驗的優(yōu)化及其應用

發(fā)布時間:2021-06-20 13:22
  目的:優(yōu)化人外周血淋巴細胞增殖試驗條件;考察動物源材料的Gal抗原含量與淋巴細胞增殖效應的相關性;并比較人外周血淋巴細胞與小鼠脾臟淋巴細胞增殖試驗對動物源材料的敏感性差異。方法:從細胞接種量,陽性對照(刀豆球蛋白A,Con A)的工作濃度與細胞培養(yǎng)時間,優(yōu)化人外周血淋巴細胞增殖試驗的最佳條件;利用優(yōu)化的試驗方法,通過人外周血淋巴細胞與動物源性材料的(牛跟腱或由牛跟腱純化的膠原蛋白海綿)勻漿液或浸提液共培養(yǎng),考察材料的不同前處理方式對人外周血淋巴細胞增殖的影響;參考標準YY/T 1561-2017,檢測材料勻漿液或浸提液的Gal抗原含量,分析其抗原含量與淋巴細胞增殖效應的相關性;同時參考標準YY/T 1465.1-2016,考察材料勻漿液與浸提液對小鼠脾臟淋巴細胞增殖效應的影響,并對比分析對動物源材料的敏感性差異。結果:人外周血淋巴細胞增殖試驗最佳反應條件經(jīng)優(yōu)化確定為:細胞接種量為1×105,陽性對照(Con A)的終濃度選擇5~10μg·mL-1,培養(yǎng)時間為4 d。人外周血淋巴細胞與膠原蛋白海綿(勻漿組與浸提液組)共培養(yǎng)后,樣品組與正常細胞對... 

【文章來源】:藥物分析雜志. 2019,39(08)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】:8 頁

【文章目錄】:
1 材料
    1.1 試驗樣品
    1.2 試劑與耗材
    1.3 主要設備
2 方法
    2.1 標準曲線的建立
    2.2 試驗條件優(yōu)化
        2.2.1 陽性對照制備
        2.2.2 人外周血淋巴細胞接種和檢測
    2.3 考察樣品的淋巴細胞增殖效應
        2.3.1 樣品制備
        2.3.2 試驗樣品與細胞共培養(yǎng)及細胞增殖率檢測
    2.4 小鼠脾臟淋巴細胞增殖試驗
    2.5 Gal抗原含量檢測
    2.6 統(tǒng)計學分析
3 結果
    3.1 標準曲線
    3.2 試驗條件優(yōu)化結果
    3.3 樣品淋巴細胞增殖效應的檢測結果
    3.4 小鼠脾臟淋巴細胞增殖檢測結果
    3.5 Gal抗原含量檢測結果
4 小結和討論


【參考文獻】:
期刊論文
[1]應用CCK8法檢測雞淋巴細胞活性的檢測最佳條件研究[J]. 劉素貞,曹曉敏,許麗娟,白宇,盧立志,柴一秋.  黑龍江畜牧獸醫(yī). 2017(13)
[2]超聲波促進人外周血單核淋巴細胞增殖的實驗研究[J]. 史春穎,李甜甜,安婷婷,張久維,李子卓,王琦,楊秀華.  哈爾濱醫(yī)科大學學報. 2015(05)
[3]MTT法和CCK-8法檢測懸浮細胞增殖的比較[J]. 侯春梅,李新穎,葉偉亮,曹曦元,肖鶴,黎燕.  軍事醫(yī)學科學院院刊. 2009(04)
[4]MTT法檢測T淋巴細胞增殖功能的方法學探討與應用[J]. 林忠寧,董勝璋,董書蕓,盧次勇,余貴英.  中國衛(wèi)生檢驗雜志. 2000(01)
[5]改良MTT比色法測定淋巴細胞增殖反應[J]. 邊興艷,楊明燕,張英.  吉林醫(yī)學院學報(自然科學版). 1997(02)
[6]MTT比色測定淋巴細胞增殖的反應[J]. 許文榮,趙家宏,劉恭植,董德平.  鎮(zhèn)江醫(yī)學院學報. 1994(04)



本文編號:3239274

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