目的:優(yōu)化人外周血淋巴細(xì)胞增殖試驗(yàn)條件;考察動(dòng)物源材料的Gal抗原含量與淋巴細(xì)胞增殖效應(yīng)的相關(guān)性;并比較人外周血淋巴細(xì)胞與小鼠脾臟淋巴細(xì)胞增殖試驗(yàn)對(duì)動(dòng)物源材料的敏感性差異。方法:從細(xì)胞接種量,陽(yáng)性對(duì)照（刀豆球蛋白A,Con A）的工作濃度與細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間,優(yōu)化人外周血淋巴細(xì)胞增殖試驗(yàn)的最佳條件;利用優(yōu)化的試驗(yàn)方法,通過人外周血淋巴細(xì)胞與動(dòng)物源性材料的（牛跟腱或由牛跟腱純化的膠原蛋白海綿）勻漿液或浸提液共培養(yǎng),考察材料的不同前處理方式對(duì)人外周血淋巴細(xì)胞增殖的影響;參考標(biāo)準(zhǔn)YY/T 1561-2017,檢測(cè)材料勻漿液或浸提液的Gal抗原含量,分析其抗原含量與淋巴細(xì)胞增殖效應(yīng)的相關(guān)性;同時(shí)參考標(biāo)準(zhǔn)YY/T 1465.1-2016,考察材料勻漿液與浸提液對(duì)小鼠脾臟淋巴細(xì)胞增殖效應(yīng)的影響,并對(duì)比分析對(duì)動(dòng)物源材料的敏感性差異。結(jié)果:人外周血淋巴細(xì)胞增殖試驗(yàn)最佳反應(yīng)條件經(jīng)優(yōu)化確定為:細(xì)胞接種量為1×10⁵,陽(yáng)性對(duì)照（Con A）的終濃度選擇5～10μg·mL^-1,培養(yǎng)時(shí)間為4 d。人外周血淋巴細(xì)胞與膠原蛋白海綿（勻漿組與浸提液組）共培養(yǎng)后,樣品組與正常細(xì)胞對(duì)... 

【文章來源】：藥物分析雜志. 2019,39(08)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：8 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料
    1.1 試驗(yàn)樣品
    1.2 試劑與耗材
    1.3 主要設(shè)備
2 方法
    2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
    2.2 試驗(yàn)條件優(yōu)化
        2.2.1 陽(yáng)性對(duì)照制備
        2.2.2 人外周血淋巴細(xì)胞接種和檢測(cè)
    2.3 考察樣品的淋巴細(xì)胞增殖效應(yīng)
        2.3.1 樣品制備
        2.3.2 試驗(yàn)樣品與細(xì)胞共培養(yǎng)及細(xì)胞增殖率檢測(cè)
    2.4 小鼠脾臟淋巴細(xì)胞增殖試驗(yàn)
    2.5 Gal抗原含量檢測(cè)
    2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果
    3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線
    3.2 試驗(yàn)條件優(yōu)化結(jié)果
    3.3 樣品淋巴細(xì)胞增殖效應(yīng)的檢測(cè)結(jié)果
    3.4 小鼠脾臟淋巴細(xì)胞增殖檢測(cè)結(jié)果
    3.5 Gal抗原含量檢測(cè)結(jié)果
4 小結(jié)和討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]應(yīng)用CCK8法檢測(cè)雞淋巴細(xì)胞活性的檢測(cè)最佳條件研究[J]. 劉素貞,曹曉敏,許麗娟,白宇,盧立志,柴一秋.  黑龍江畜牧獸醫(yī). 2017(13)
[2]超聲波促進(jìn)人外周血單核淋巴細(xì)胞增殖的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 史春穎,李甜甜,安婷婷,張久維,李子卓,王琦,楊秀華.  哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2015(05)
[3]MTT法和CCK-8法檢測(cè)懸浮細(xì)胞增殖的比較[J]. 侯春梅,李新穎,葉偉亮,曹曦元,肖鶴,黎燕.  軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院院刊. 2009(04)
[4]MTT法檢測(cè)T淋巴細(xì)胞增殖功能的方法學(xué)探討與應(yīng)用[J]. 林忠寧,董勝璋,董書蕓,盧次勇,余貴英.  中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志. 2000(01)
[5]改良MTT比色法測(cè)定淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)[J]. 邊興艷,楊明燕,張英.  吉林醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 1997(02)
[6]MTT比色測(cè)定淋巴細(xì)胞增殖的反應(yīng)[J]. 許文榮,趙家宏,劉恭植,董德平.  鎮(zhèn)江醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 1994(04)



本文編號(hào)：3239274