背景:骨髓間充質干細胞作為中胚層來源的多能干細胞,除了能夠分化為間充質系細胞如成骨細胞、脂肪細胞和軟骨細胞外,還具有神經分化潛能,具有廣闊的應用前景。目的:探討膠質細胞源性神經營養(yǎng)因子體外誘導骨髓間充質干細胞分化為神經元樣細胞的可行性。方法:選用健康SD大鼠,采用全骨髓貼壁法體外培養(yǎng)、純化骨髓間充質干細胞,經流式細胞儀進行細胞表型鑒定。取生長狀態(tài)良好的第4代骨髓間充質干細胞進行實驗分組:對照組不加任何誘導劑;實驗組培養(yǎng)液內加入膠質細胞源性營養(yǎng)因子,調整質量濃度分別為20,50,100μg/L,倒置相差顯微鏡連續(xù)觀察細胞生長情況及形態(tài)變化。誘導6,12,24,48,72 h,采用免疫組化法檢測巢蛋白、神經元特異性烯醇化酶的表達。結果與結論:①原代提取獲得的骨髓間充質干細胞形態(tài)均一性較好,流式細胞儀檢測結果為CD44,CD90呈強陽性表達,CD34,CD45陽性表達率很低;②經膠質細胞源性營養(yǎng)因子誘導后,細胞胞體逐漸向胞核收縮,變形細胞逐漸增多,出現雙極、多極和錐形等典型的神經元樣細胞形態(tài),細胞邊緣出現突起,且與鄰近細胞突起逐漸相互連接;③膠質細胞源性營養(yǎng)因子誘導6 h后出現巢蛋白表達陽性... 

【文章來源】：中國組織工程研究. 2019,23(29)北大核心

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文題釋義:
0引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
    1.1 設計
    1.2 時間及地點
    1.3 材料
        1.3.1 實驗動物
        1.3.2 實驗試劑
    1.4 實驗方法
        1.4.1 骨髓間充質干細胞的分離、培養(yǎng)、純化及鑒定
        1.4.2 體外誘導骨髓間充質干細胞向神經元樣細胞分化
        1.4.3 細胞免疫化學檢測
    1.5 主要觀察指標
    1.6 統計學分析
2 結果Results
    2.1 骨髓間充質干細胞的形態(tài)及鑒定結果
    2.2 誘導后細胞生長變化
    2.3 神經元樣細胞的鑒定結果
3 討論Discussion


【參考文獻】：
期刊論文
[1]Electroacupuncture promotes peripheral nerve regeneration after facial nerve crush injury and upregulates the expression of glial cell-derived neurotrophic factor[J]. Jing Fei,Lin Gao,Huan-Huan Li,Qiong-Lan Yuan,Lei-Ji Li.  Neural Regeneration Research. 2019(04)
[2]共培養(yǎng)方法誘導3種間充質干細胞向神經細胞分化的比較[J]. 徐麗麗,王洪元,李學達,劉兵,鄭方芳,楊乃龍.  中國組織工程研究. 2017(17)
[3]骨髓間充質干細胞向神經細胞分化的相關信號通路研究現狀[J]. 劉振東,王靜成,楊建東.  中國組織工程研究. 2012(06)
[4]膠質源性神經營養(yǎng)因子基因修飾骨髓間充質干細胞與缺氧復氧神經細胞的共培養(yǎng)[J]. 熊懷林,鄧莉,高小青,王特為,郭侃,楊朝鮮.  中國組織工程研究與臨床康復. 2011(49)



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