鉤端螺旋體是結構和遺傳特征都較特殊的一類微生物，它所導致的鉤端螺旋體病是在世界范圍內(nèi)流行的人獸共患自然免疫源性疾病，嚴重危害人類健康和農(nóng)牧業(yè)生產(chǎn)。闡明鉤端螺旋體的致病機制是控制本病的關鍵環(huán)節(jié)。由于結構和遺傳特征的特殊性，大多數(shù)細菌學研究方法不適于鉤體研究，與致病或毒力相關的基因研究報道很少，致使鉤體致病的分子機制研究進展緩慢。 致病微生物與非致病微生物差異基因的研究對闡明致病微生物的致病機制具有重要的意義。本研究以抑制消減雜交技術（Substration Suppressive Hybridization，SSH）篩選得到致病鉤體與非致病鉤體的差異基因片段，采用盒式連接半巢式PCR技術擴增其相鄰兩側未知序列，進行序列測定、生物信息學分析及功能鑒定，對賴型鉤體的分子致病機制及疾病防治具有重要理論意義和應用價值。四川大學博士論文問號賴型鉤端螺旋體毒力新基因的篩選及其功能研究 本研究根據(jù)SSH技術篩選的賴型鉤體017株特異性存在基因片段 （GeneBank登錄號AF325818），設計引物進行盒式連接半巢式PCR擴增相鄰兩側未知序列，PCR純化產(chǎn)物T載體克隆，選取陽性克隆測序，... 

【文章來源】：四川大學四川省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：141 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

賴型鉤端螺旋體017株差異新基因

20證)《)!500圖1一3Figl一3重組質(zhì)粒TL17的酶切圖譜Therestrietionen砂memaPofreeombinantPlasmidTL17M:marker(DNALadder).A:reeombinantplasmidTL17B:reeombinantPlasmidTL17di羅stedwithBamHIandEeoRI圖1一4L17PCR擴增產(chǎn)物探針與賴型鉤端螺旋體基因組DNA斑點雜交Figl一4DotblottingofL17PCRprobewithgenomieDNAofLeptospiraSer0VarA:LePtosPiraserovarlaistrain017;B:LePtosPiraserovarlaistrain56601.3I

20證)《)!500圖1一3Figl一3重組質(zhì)粒TL17的酶切圖譜Therestrietionen砂memaPofreeombinantPlasmidTL17M:marker(DNALadder).A:reeombinantplasmidTL17B:reeombinantPlasmidTL17di羅stedwithBamHIandEeoRI圖1一4L17PCR擴增產(chǎn)物探針與賴型鉤端螺旋體基因組DNA斑點雜交Figl一4DotblottingofL17PCRprobewithgenomieDNAofLeptospiraSer0VarA:LePtosPiraserovarlaistrain017;B:LePtosPiraserovarlaistrain56601.3I

【參考文獻】：
期刊論文
[1]基因打靶技術的研究進展[J]. 薛猛.  生物學雜志. 2002(01)
[2]利用抑制消減雜交技術研究鉤端螺旋體致病相關基因[J]. 鮑朗,胡昌華,李學敏,晏菊芳,張萬江,張會東.  中華微生物學和免疫學雜志. 2001(05)
[3]鉤端螺旋體分類學研究進展[J]. 秦進才.  預防醫(yī)學情報雜志. 2001(03)
[4]90年代鄂西北地區(qū)鉤端螺旋體病流行病學研究[J]. 程均福,徐世海,楊曉艷.  中國媒介生物學及控制雜志. 2001(02)
[5]在小鼠進行基因打靶的研究進展[J]. 楊曉,黃培堂,黃翠芬.  科學通報. 2000(15)
[6]抑制消減雜交（SSH）在腫瘤相關基因克隆中的應用[J]. 陳杰,錢桂生.  癌癥. 2000(06)
[7]一起鉤端螺旋體病暴發(fā)的調(diào)查[J]. 林平章,潘騰強,沈忠偉,熊清源,謝加發(fā),王文莉.  解放軍預防醫(yī)學雜志. 2000(02)
[8]鉤端螺旋體病研究進展與待解決的問題[J]. 時曼華.  實用預防醫(yī)學. 1999(04)
[9]上饒縣1998年洪災后的鉤體病疫情調(diào)查[J]. 蔣秀高,聶一新,徐玫清,李文行,肖玉春,時曼華.  疾病監(jiān)測. 1999(02)
[10]湖南省1990～1997年鉤端螺旋體病流行病學分析[J]. 周新宇,張立新.  實用預防醫(yī)學. 1998(03)



本文編號：3228733