目的 本實驗用干冰造成大鼠腦的右側(cè)頂葉局部凍傷，引起腦水腫。用免疫組織化學(xué)和透射電鏡的方法，觀察腦水腫時間藤細胞的增時變化。特別是應(yīng)用免疫金電鏡技術(shù)，對細胞包含體內(nèi)的組織蛋白酶cathepsin D進行定位定量研究。 方法 1．動物模型 40只雄性Wistar大鼠，生后4個月。用牙鉆在右側(cè)頂骨鉆一個直徑2毫米的小孔，注意不破壞硬腦膜，然后將小塊干冰置于硬腦膜上，造成腦局部凍傷，引起腦水腫，對照組為只開孔，不使用干冰凍傷的假手術(shù)組。在手術(shù)后5小時，10小時，1天，2天，3天，1周，2周，用4％多聚甲醛磷酸緩沖液（pH7.4）經(jīng)心臟灌流固定，取出腦，切取包括損傷部位的2毫米厚冠狀切片，浸泡固定在各種固定液中，制成供光鏡，傳統(tǒng)的透射電鏡及免疫金電鏡技術(shù)使用的標(biāo)本。 2．辣根過氧化物酶（HRP）注射 部分大鼠在手術(shù)后各不同時間從股靜脈注射辣根過氧化物酶（HRP，Sigma Type Ⅱ），1小時后灌流固定，取出腦，切取包括損傷部位的2毫米厚冠狀切片，再用振動切片機切成40微米厚的冠狀切片。用酶組織化學(xué)方法（Vector SG過氧化物酶底物試劑盒，SK-470... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：44 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
一、 中文摘要
二、 英文摘要
三、 英文縮略語
四、 論文主體
    1 前言
    2 實驗材料與方法
    3 實驗結(jié)果
    4 討論
    5 結(jié)論
五、 本研究的創(chuàng)新點
六、 參考文獻
七、 致謝
八、 綜述
九、 個人簡介
十、 在學(xué)期間發(fā)表論文、獲獎等題目



本文編號：3206321