目的用結(jié)核分枝桿菌（M.tuberculosis）特異性抗原Rv3117聯(lián)合雙十八烷基二甲基溴化銨（DDA）/單磷酰脂質(zhì)體A（MPL）佐劑構(gòu)建結(jié)核亞單位疫苗（Rv3117/DDA/MPL）,并在C57BL/6小鼠體內(nèi)評估其加強(qiáng)卡介苗（BCG）首次免疫后的免疫效應(yīng)。方法采用分子克隆方法構(gòu)建重組質(zhì)粒p ET32a-Rv3117,轉(zhuǎn)入感受態(tài)大腸埃希菌BL21（DE3）PLys S,誘導(dǎo)表達(dá)并純化目的蛋白,用Triton X-114相分離法去除目的蛋白中的內(nèi)毒素,然后與DDA/MPL佐劑充分乳化構(gòu)建亞單位疫苗。C57BL/6小鼠隨機(jī)分為對照組（未予任何處理）、PBS組（免疫PBS）、BCG組（單純首次免疫BCG）、BCG+DDA/MPL組（首次免疫BCG,2周后用佐劑DDA/MPL加強(qiáng)免疫2次）和BCG+Rv3117/DDA/MPL組（首次免疫BCG后用亞單位疫苗Rv3117加強(qiáng)免疫2次）,每組5只。分別采用酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)檢測（ELISPOT）和酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）技術(shù)對免疫小鼠的細(xì)胞免疫和體液免疫進(jìn)行評估。結(jié)果成功克隆表達(dá)并純化結(jié)核特異性抗原Rv3117。ELISPOT和ELISA結(jié)... 

【文章來源】：上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2015,35(01)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1. 1 實(shí)驗(yàn)材料
    1. 2 方法
    1. 3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié) 果
    2. 1 重組蛋白的純化
    2. 2 內(nèi)毒素檢測結(jié)果
    2. 3 ELISPOT 檢測結(jié)果
    2. 4ELISA 檢測結(jié)果
3 討 論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]結(jié)核分枝桿菌特異性抗原Rv3117的克隆表達(dá)和誘導(dǎo)小鼠免疫應(yīng)答的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 湯俊明,陳翠翠,王學(xué)才,趙俊偉,張舒林.  上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2012(11)



本文編號：3189756