目的 構(gòu)建和拯救重組嵌合表達(dá)人偏肺病毒（human metapneumovirus, hMPV）表位的流感病毒株。方法 將通過(guò)生物信息學(xué)軟件預(yù)測(cè)的hMPV B細(xì)胞表位、CTL表位和Th表位串聯(lián)為不同表位組合,將其表位蛋白基因分別插入A/PR/8/34 （PR8）流感病毒非結(jié)構(gòu)蛋白NS1基因,利用8質(zhì)粒系統(tǒng)共轉(zhuǎn)染293T/MDCK細(xì)胞,拯救重組流感病毒毒株,全基因組測(cè)序鑒定重組流感病毒。同時(shí)測(cè)定重組病毒的血凝素（HA）活性和半數(shù)細(xì)胞感染量（TCID50）及生長(zhǎng)曲線。結(jié)果 在hMPV不同表位間引入間隔序列GPGPG和KK,構(gòu)建串聯(lián)多表位抗原,將該抗原基因插入PR8流感病毒非結(jié)構(gòu)蛋白NS基因,經(jīng)反向遺傳學(xué)成功拯救出3株重組流感病毒毒株。經(jīng)MDCK細(xì)胞傳代3次,雞胚傳代1次,3株重組流感病毒毒株增殖穩(wěn)定。流感病毒全基因組測(cè)序證實(shí),重組的3株流感病毒毒株分別嵌入了hMPV的B細(xì)胞表位、CTL表位/Th細(xì)胞表位和B細(xì)胞表位/Th細(xì)胞表位,命名為rFLU/hMPV/B、rFLU/hMPV/CTL-Th、rFLU/hMPV/B-Th。HA滴度分別為128、128、256,TCID50分別為107.0/... 

【文章來(lái)源】：中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志. 2019,(01)

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【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]人偏肺病毒多表位抗原的小鼠免疫應(yīng)答[J]. 李曉燕,郭麗茹,孔梅,鄒明,蘇旭.  中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志. 2015 (09)
[2]人偏肺病毒感染住院兒童的臨床特征及病毒基因特性分析[J]. 李曉燕,謝彤,陳錦英,趙煜,謝藝,孔梅,蘇旭,鄒明,張樺.  中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志. 2010 (04)



本文編號(hào)：3181691