HER220是I20型酪氨酸激酶家族的成員之一,是分子量為185KD20的跨膜糖蛋白受體。正常情況下HER220蛋白在乳腺上皮細(xì)胞和全身多種組織和細(xì)胞表面有低水平的表達(dá)。HER220蛋白在25-30%的乳腺癌細(xì)胞表面有高水平的表達(dá);HER220蛋白的高表達(dá)和對(duì)多種化療藥物的耐受以及臨床的不良預(yù)后相關(guān)。HER220蛋白是一個(gè)安全有效的腫瘤治療靶點(diǎn)。以高表達(dá)HER220蛋白為治療靶點(diǎn)的多種藥物已經(jīng)上市或正在進(jìn)行臨床研究。分子量為65KD20的卡介苗熱休克蛋白（BCG20HSP65）是一種分子伴侶。在免疫應(yīng)答的過程中,HSP6520可引導(dǎo)與其形成復(fù)合物或融合蛋白的抗原肽在樹突狀細(xì)胞內(nèi)經(jīng)MHC20I20類途徑加工遞呈,從而激活基于抗原特異性細(xì)胞毒性T20淋巴細(xì)胞（CTLs）的免疫反應(yīng)。熱休克蛋白已經(jīng)成為可以激活細(xì)胞毒性T20淋巴細(xì)胞免疫反應(yīng)的分子佐劑。我們?cè)O(shè)計(jì)的免疫治療制劑目的是通過特異性細(xì)胞毒效應(yīng)（CTL）來治療乳腺腫瘤。這種免疫治療制劑是將結(jié)核桿菌熱休克蛋白6520的編碼基因和人HER2多CTL20表位基因融合。在大腸桿菌成功地表達(dá)了卡介苗熱休克蛋白65-多表位HER220融合蛋白,即HS... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：122 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
英文縮寫詞表
前言
第一章 文獻(xiàn)回顧
    一、HER2 研究綜述
        (一) 前言
        (二) HER2 的過度表達(dá)和乳腺癌
        (三) HER2 表達(dá)水平的檢測(cè)
        (四) HER2 是腫瘤治療的分子靶點(diǎn)
    二、熱休克蛋白的研究現(xiàn)狀
        (一) 概述
        (二) 合成
        (三) HSP的釋放
        (四) HSPs的受體和信號(hào)傳遞
        (五) 生物學(xué)作用
第二章 材料與方法
    一、實(shí)驗(yàn)材料
        (一) 限制性內(nèi)切酶及其它試劑
        (二) 質(zhì)粒與菌株
        (三) 細(xì)胞株和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        (四) 引物的合成
        (五) 培養(yǎng)基
        (六) 抗體
    二、主要方法
        (一) 采用PCR法合成特異性基因/DNA片段
        (二) DNA 片段的TA克隆
        (三) 相關(guān)質(zhì)粒的構(gòu)建
        (四) 816/HER2 轉(zhuǎn)染細(xì)胞的建立和鑒定
        (五) 融合蛋白的表達(dá)和純化
        (六) HSP-HER2ME的小鼠試驗(yàn)
        (七) HSP-HER2ME的人體外實(shí)驗(yàn)
第三章 實(shí) 驗(yàn) 結(jié) 果
    一、獲取HSP-HER2ME重組蛋白
    二、獲取Chap10-HER2ME重組蛋白
    三、獲取TAT-HER2ME重組蛋白
    四、制備HER2ME轉(zhuǎn)染816 細(xì)胞
    五、HSP-HER2ME蛋白的CTLs誘生及抗腫瘤活性
        (一) HSP-HER2ME的CTLs誘生作用
        (二) HSP-HER2ME對(duì)裝載TAT-HER2ME腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用
        (三) HSP-HER2ME對(duì)816/HER2ME腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用
    六、HSP-HER2ME蛋白對(duì)人免疫細(xì)胞的生物學(xué)作用
        (一) HSP-HER2ME對(duì)人PBMC的激活作用
        (二) HSP-HER2ME對(duì)人DCs的表面標(biāo)志的誘導(dǎo)作用
        (三) HSP-HER2ME對(duì)HER2 特異性CTLs的誘生作用
    圖和照片
第四章 討論
    一、外源蛋白在大腸桿菌中的表達(dá)
    二、免疫學(xué)經(jīng)典抗原遞呈途徑和交叉抗原遞呈途徑
    三、腫瘤的免疫治療
    四、腫瘤免疫制劑
        (一) 腫瘤抗原
        (二) 抗腫瘤細(xì)胞免疫中的CTL表位肽
        (三) HER2 特異性表位肽的選取
        (四) 間隔序列的選取
        (五) DCs在抗腫瘤免疫中的作用
    五、HER2 為靶點(diǎn)的腫瘤免疫治療
    六、HSP的免疫學(xué)
    七、HSP-HER2ME能在小鼠體內(nèi)抑制表達(dá)HER2 腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)
    八、人體外實(shí)驗(yàn)表明HSP-HER2ME能產(chǎn)生HER2 特異性的CTL反應(yīng)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀博士期間發(fā)表論文和/或申報(bào)專利情況
個(gè)人簡(jiǎn)歷
中文摘要
ABSTRACT
吉林大學(xué)博士學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明



本文編號(hào)：3178557