抑制性寡核苷酸（inhibitory ODN）是一種人工合成的Toll樣受體拮抗劑,具有特定核苷酸順序的單鏈DNA分子,多為硫代修飾的骨架結(jié)構,長度通常在15-30核苷酸,能抑制由內(nèi)源性或外源性TLR配體引起的免疫細胞的激活,在治療與Toll受體活化的相關疾病方面展示了廣闊的應用前景。我們應用HSV-1和PR8-flu病毒建立了抑制性ODN的篩選平臺,對自行設計的ODN的進行了篩選,將其中抑制活性最強的含CCT基序的ODN命名為IMO03,并對其功能特點和作用機理進行了初步的研究。實驗結(jié)果表明,IMO03不僅能抑制由天然的和人工合成的TLR7/9的配體誘導的人外周血單個核細胞（PBMC）的免疫活化,也能抑制系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者血清及其來源的DNA片段引起的人PBMC免疫激活作用,這種作用可能依賴于競爭性結(jié)合TLR受體。IMO03不僅可以抑制人類免疫細胞的激活,還能保護小鼠避免死于CpG誘導的膿毒血癥的休克。我們的研究證明了不含“G”堿基的抑制性ODN（IMO03）對膿毒血癥模型小鼠具有治療作用,而且該抑制作用有TLR選擇性——只是針對TLR7/9受體的活化,并不針對TLR3/4的活化。I... 

【文章來源】：吉林大學吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：博士

【部分圖文】：

Toll樣受體在細胞內(nèi)的傳導通路及在細胞表達Fig1.1TLRsignalingandexpressionofTLRsinimmunecells(T.Kawaietal.,2007)

TLR-MyD88信號傳導途徑在膿毒血癥發(fā)病機理中扮演著重要的角色（WeighardtH et al., 2002）。圖1.2 膿毒血證的發(fā)病機理Fig 1.2 Sepsis pathogenesis (Buras JA et al., 2005)2.1.5.2 系統(tǒng)性紅斑狼瘡（Systemic Lupus Erythematosus, SLE）SLE 是一種較常見的累及多系統(tǒng)多器官的自身免疫性疾病，由于細胞和體液免疫功能障礙，產(chǎn)生多種自身抗體。關于 SLE 的發(fā)病和 TLR 的關系，是近年來自身免疫性疾病中研究的最多的，關系也逐漸明確。SLE 患者血漿內(nèi)存在著高水平的 IFN-α，pDC 作為人體 IFN-α的主要來源（Liu YJ. 2005）與 TLR 引起與自身免疫性疾病的關系十分密切。TLR 活化原因有兩種，一種是外源的細菌或病毒感染，另一種就是自身免疫復合物的存在。盡管 SLE 的病因還不明確，但細菌和病毒感染一直被懷疑是誘發(fā) SLE 的關鍵因素（Zandman-Goddard G et al., 2003）（圖 1.3）。人體天然免疫系統(tǒng)主要通過 Toll 樣受體識別細菌和病毒。病毒是 pDC 激活分泌 IFN-α的始動因素

14圖 1.3 Toll 樣受體，IFN-α和 SLEFig 1.3 TLRs, IFN-α and SLE (Marshak-Rothstein A 2006)2.1.5.3 類風濕性關節(jié)炎（Rheumatoid Arthritis, RA）類風濕性關節(jié)炎是一種以關節(jié)滑膜炎為特征的自身免疫性疾病。滑膜炎持久反復發(fā)作，可導致關節(jié)內(nèi)軟骨和骨的破壞，關節(jié)功能障礙，甚至殘廢。在動物模型上，小鼠來源的RF陽性自身反應性B細胞能通過B細胞表面抗原受體（BCR）和TLR7/9受體依賴途徑被IgG2a、DNA、RNA、或DNA/RNA免疫復合物所激活（Lau CM et al., 2005; Marshak-Rothstein A. et al., 2003; Viglianti G A et al., 2003Leadbetter E A et al., 2002）。最近的研究表明HMGB1（high-mobility group box 1）蛋白與CpG DNA復合物可以通過TLR9信號通路，活化B細胞和pDC，分泌RF抗體和相關的炎性因子（Tian J et al., 2007）。


本文編號：3141148